• Forum - Substrat, Produit, Forme

[Biochimie] Méthode en point final

En conclusion je sais uniquement que cette méthode consiste à mesurer la transformation totale de substrat en produit. Qu'elle n'est appliquable uniquement si la transformation en produit est totale. Le Substrar disparait pour former le Produit.  [...] C = A/ e. L (concentration de produit formé ou de substrat consommé est proportionnel au delta d'absorbance avant et apres réaction).  [...]

Vitesse de fermentation (système inductible et concentration en sucre)

Parmi les sucres testés (fructose, glucose, lactose, maltose, saccharose), seul le maltose nécessiterait un système inductif pour être fermenté. D'ailleurs, il produit moins de CO2 à la fin que les autres, qui semblent pas mal tous égaux. Comment expliquer le fait qu'un système inductible ralentisse la fermentation.  [...] Selon votre expérience c'est donc qu'au début la quantité de produit obtenu (notamment CO 2 ) est proportionnelle à la quantité de substrat (= sucre) fermenté par les levures. Et puis au plafond, PAF ce sont les levures qui deviennent le facteur limitant puisque peu importe l'augmentation de la quantité de sucre cela n'accroit pas la quantité de produit formé, il n'y a donc tout simplement pas assez de levures pour fermenter tout le substrat.  [...]

[Biochimie] fonctionnement des enzymes

Comble du raffinement, souvent pour les hydrolases, s'il y a trop de produit P dans le milieu, il va s'attacher à l'enzyme et changer sa forme spatiale (Inhibition). Le Substrat ne peut plus former de complexe ES ni réagir. Cela permet donc une régulation du produit P dans le milieu.  [...] Le produit, lorsqu'il est en excès, se fixe à un autre endroit de l'enzyme. Ce faisant, l'enzyme va changer de forme, le site sur lequel le substrat devrait se fixer n'est plus accessible. (dans ma métaphore, le triangle en creux qui est souple devient un triangle déformé dans lequel on ne peut plus placer de triangle à cause du losange qui est venu se placer sur un autre endroit de l'enzyme).  [...]

[Biochimie] transamination

Au cours de la réaction enzymatique Bi-Bi ping pong aucun complexe ternaire n'est formé. Un premier substrat (S1) se fixe sur l'enzyme (E) et entraîne la libération du premier produit (P1). Un deuxième substrat (S2) se fixe et entraîne la libération du deuxième produit (P2).  [...] Il y'a libération du premier produit (P1). l'oxaloacétate suivie de la fixation du deuxième substrat (S2). l'alpha-cétoglutarate.  [...]

[Biochimie] mise au point de dosage enzymatique

Je travaille en microplaque. Quand j'introduis 1 unité enzymatique dans mon puit, je ne retrouve jamais 1µmol de substrat dégradé ou de produit formé. Et j'ai ce problème avec toutes les enzymes.  [...] PS. pour une mise de dosage enzymatique, c'est à dire adapter les concentrations, pH et température, à un organismes donné, vous procéderiez comment.   [...]

enrichissement de fractions

A mesure que l'on purifie, la concentration du produit d'intérêt devrait augmenter. En enzymologie, une méthode pour suivre cela est de suivre l'activité enzymatique (en gros la quantité de substrat consommé [ou de réactif formé]/unité de temps/quantité de protéine [ou volume]).  [...] L'enrichissement c'est le ratio de l'activité spécifique à l'étape suivie sur celle de l'étape précédente. et comme je sens que la question va finir par venir, le rendement, c'est le nombre d'unité enzymatique à l'étape présente sur celles de la précédente.   [...]

TON de Horseradish peroxidase

Bonjour, a priori si tu regarde par bioluminescence ça va dépendre de la stabilité du produit, et de son ratio d'émission. Je ne suis pas sûr que Pierce et Amersham divulgent la nature exacte de leurs produits.  [...] Dans les conditions optimales tu peux trouver les caractéristiques de l'enzyme, qui permettent de déduire la quantité de produit formé avec ta concentration de substrat. La HRP est assez robuste il me semble, je pense qu'elle n'est aps hyper sensible aux conditions expérimentales, en tampon TRIS ph 8.5 ça doit être proche de l'optimal.  [...]

[Biochimie] Questions à propos de l'activité enzymatique (1èreS)

- Quels points sommes-nous censés considérer pour calculer la cinétique ((y1-y2)/(x1-x2)) d'une réaction puisque la courbe représentant la concentration en produit en fonction du temps est parabolique. Et si cela rentre dans le programme de 1èreS, pourquoi a-t-elle une forme parabolique, logiquement elle devrait avoir la forme d'une droite non.  [...] Pour la concentration de produit en fonction du temps Dans le cas simple, la forme est bien une droite initialement, tant que la concentration en substrat est à peu près constante, ensuite elle fléchie lorsque le substrat vient à manquer. Ce n'est ni une parabole, ni une sigmoide.  [...]

[Biochimie] Calcul de la vitesse maximale

Calculer pour chaque courbe, la vitesse maximale. Elle représente la vitesse initiale Vi de la réaction. Cette Vitesse est définie comme la quantité de produit formé (ou de substrat utilisé) par unité de temps. Pour l'expérience présentée, elle sera donc exprimée en % d'O2/sec.  [...] Comme ils disent dans l'énoncé que cette Vitesse est définie comme la quantité de produit formé (ou de substrat utilisé) par unité de temps.  [...]

[Biochimie] Marquage enzymatique

Je m'intéresse en ce moment aux techniques cytochimiques et histochimiques, et en particulier aux marquages enzymatiques. J'ai compris qu'on pouvait révéler l'activité d'une enzyme par son produit coloré, observable en microscopie photonique, ou opaque aux électrons, obsevable en microscopie électronique (avec introduction préalable de substrat).  [...] J'ai également lu qu'une deuxième possibilité était de révéler un substrat par son enzyme. seulement, je ne comprends pas en quoi cette deuxième technique diffère de la première...Ne révèle-t-on pas le substrat par le produit coloré qu'il forme avec l'enzyme.  [...]