• Forum - Stable, Pression, Sélection

Stratégies d'insertion de fusions de gènes

pour repondre a ta question, je ne vois pas pourquoi tu parles de disruption, puisque l'on peut tres bien faire de l'integration ciblée sans disrupter un gene ou sans en alterer son fonctionnement. In fois l'insertion effectuée, celle-ci est stable il n'y a donc pas besoin de maintenir la pression de selection.  [...] Pour que l'insertion soit stable, comment tu fais si tu ne maintiens pas la pression de sélection notamment dans le cas d'insertion via des transposases J'arrive à comprendre qu'une insertion via un plasmide vecteur et recombinaison homologue reste stable, mais le propre de l'élément transposable n'est-il pas justement de transposer La cellule a t-elle intérêt à maintenir une insertion qui ne lui apporte rien (c'est un peu finaliste comme question, mais c'est vrai.  [...]

[Génétique] Plasmide

Oui et non. En effet s'il confère un avantage sélectif en présence d'une pression de sélection, il sera conservé par sélection positive, donc sa présence sera stable au cours des générations. Pour autant, s'il ne confère pas d'avantage sélectif mais qu'il ne désavantage par la bactérie porteuse, il n'y a aucune raison pour qu'il ne soit pas stable au cours des générations.  [...] Toutefois il y a plus de chance qu'il soit perdu puisque la pression de sélection oblige les bactéries à conserver le plasmide conférant l'avantage sélectif pour leur survie.  [...]

[Evolution] des questions auxquelles il faut bien répondre.

C'est une question d'intensité de la pression évolutive. Je m'explique. Une espèce soudainement soumise à un changement dans son environnement, et qui se retrouve à la limite de ces tolérances biologiques, va subir une pression de sélection intense. L'espèce concernée va donc connaître une évolution radicale en un temps relativement rapide.  [...] En revanche dans un environnement qui est stable,on va avoir une pression de sélection plus douce car les espèces sont en principe déjà bien adaptées.  [...]

[Evolution] Apparition du sonar

C'est aussi l'impression que je m'étais faite, en tout cas, l'hypothèse la plus plausible pour moi... l'idée de l'organe inutile me paraît en effet évolutivement peu défendable.  [...] Par servir à rien, réellement provocateur dans un contexte évolutionniste, j'entendais servir peu (encore une hypothèse car la détection des ultra-sons peut apporter un avantage évolutif même si l'espèce est incapable d'en émettre, pourquoi pas). Quand on voit que des cellules ayant un transgène intégré de façon stable arrivent à le faire sauter s'il leur sert à rien (plus de pression de sélection), la vie est clairement contre la dépense énergétique inutile.  [...]

[Biologie Moléculaire] siRNA, shRNA ??

Donc l'action d'un siRNA est forcément transitoire, tandis qu'avec le shRNA, si tu maintiens une pression de sélection, le plasmide sera exprimé de façon permanente et donc le silencing durera... De plus, si tu as un promoteur particulier, ça te permet d'avoir un silencing inductible.  [...] Juste une dernière précision. lorsque le shRNA est codé dans un plasmide, il n'a pas besoin d'être intégré dans le gênôme de la cellule hôte pôur être stable... Une simple pression de sélection par un antibiotique (par exemple) permet une transfection stable.  [...]

[Biotechnologie] RNA interference : siRNA, shRNA

En culture cellulaire, si le vecteur est un plasmide, il ne s'intègre pas dans le génome mais peut se répliquer. Cependant il risque d'être expulser si il n'y as pas de pression de sélection comme une résistance à un antibiotique. Le moyen le plus sure de faire une lignée stable est d'utiliser un vecteur lentivirus, qui intègre la séquence du shRNA (ou de n'importe quel gène) dans le génome.  [...] En effet le shRNA a besoin d'un promoteur et d'autres séquences pour s'exprimer (moins ready to use que le si). On peut effectivement l'intégrer dans un vecteur adénoviral (qui ne s'intègre pas. effet transitoire) ou lentiviral (qui s'intègre, donc effet stable si on utilise une sélection des cellules ayant intégré le vecteur) ou AAV.  [...]

[Evolution] L'homme est-il sorti de la théorie de l'évolution de Darwin? - Page 4

Bien sûr, les changements de l'environnement sont un facteur important de pression de sélection, donc d'évolution. C'est pourquoi je maintient qu'avoir conditionné l'évolution darwinienne à un environnement stable c'est n'importe quoi.  [...] Pour qu'une pression ait un effet non négligeable, faut qu'elle s'exerce toujours dans le même sens. La stabilité temporelle de la pression est donc un facteur important. Un changement d'environnement crée de nouvelles pressions, mais celles-ci n'auront un effet non négligeable qu'à condition que le nouvel environnement soit stable suffisamment longtemps.  [...]

[Biologie Cellulaire] Sélection d'un clone stable : combien de temps ?

Je viens de me lancer dans la sélection d'un clone stable à partir de cellules C2C12. J'ai fait ma transfection et j'ai ajouté mon antibio de sélection G418 un jour aprés et j'attendais de voir mourrir mes cellules mais... rien Ca fait 3 jours Est ce normal combien de temps faut il attendre pour voir la sélection s'opérer.  [...] Perso quand j'ai fais des clones stables de cellules (pas des C2C12) je n'ai pas opté pour une telle stratégie. Attention je fais des choses compliquées, j'aime bien... protéine d'intérêt-IRES-IL2. Du coup la séléction était rapide et efficace vu qu'il suffisait de cultiver les cellules avec des billes magnétiques coatées avec l'anticorps anti IL2.  [...]

Jeux artériole afférente- efférente Rénale et SRA

Le rein est donc capable de maintenir une pression endocapillaire stable grâce au jeu des résistances en amont du glomérule. Toutefois, cela ne veut pas dire que cette pression endocapillaire est une constante. s'il est dans les fait capable de rétablir sa pression vers une valeur stable, des facteurs de régulations peuvent moduler cette valeur de pression, et donc venir impacter sur le DFG.  [...] En conclusion, ton rein dispose d'un système d'auto-régulation lui permettant de maintenir un DFG stable (autour de 45 mmHg) dans une gamme de pression de pression allant de 80 à 180 mHg en cas de variations brusques de la pression (non physiologiques). La valeur de la pression endocapillaire glomérulaire peut toutefois être régulée par des processus de régulations physiologiques extrinsèques faisant intervenir principalement la résistance artériolaire.  [...]

[Evolution] Darwin et la diversité intraspécifique

avantage des hétérozygotes, pressions de sélection des parasites et pathogènes variant rapidement (bon en fait c'est un cas particulier de variabilité ), sélection sexuelle pour des individus non apparentés.  [...] Là tu raisonne avec un paysage adaptatif simple. En fait quand on prend en compte plusieurs dimensions, plusieurs pressions de sélections agissant simultanément, ça peut être beaucoup plus compliqué, avec des oscillation, des convergences vers des points qu'on n'atteint jamais, des instabilités.  [...]