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[Biologie Cellulaire] Anticorp anti-espece et Western Blot

Dans le western blotting, tu vas effectivement utiliser deux anticorps distincts. L'anticorps dit primaire (que tu as nommé AC1), et l'anticorps qui sera dirigé contre la protéine que tu souhaite mettre en evidence par le western blotting. Cetr anticorps aura été produit par immunisation d'un animal en utilisant la protéine d'intérêt comme antigène.  [...] Cet anticorps sera lui dirigé contre l'anticorps primaire, c'est un Ac anti AC1. Par conséquent dans l'exemple, si tu as utilisé un anticorps de souris comme AC1, l'AC2 sera un anticrops anti anti-corps de souris, produit par exemple chez le lapin. le couple AC1-AC2 n'est pas produit dans la même espèce animale, puisque l'AC2 est censé reconnaire l'AC1 comme un antigène.  [...]

[Immunologie] Immuno-marquage

C'est basé sur le système antigène-anticorps. Imaginons qu'on veuille marqué une cellule X qui présente des protéines Y sur la surface. Et bien on va pouvoir utiliser des anticorps de Y qui vont naturellement se fixer dessus..marquant ainsi la cellule X. Les anticorps sont des immunoglobines spécialement sécrétées pour se fixer sur la protéine Y.  [...] La deuxième technique un peu plus complexe c'est d'injecter pareil une protéine qu'on veut observer ultérieurement dans une souris. On va là aussi sacrifier la p'tite souris et récupérer des globules blancs responsable de la synthèse d'anticorps(plasmocytes).  [...]

[Immunologie] Production d'anticorps polyclonaux

je souhaiterai faire produire des anticorps polyclonaux pour une manip de western blot contre une protéine membranaire de souris pour laquelle le seul anticorps existant n'est pas du tout spécifique.  [...] Est-ce que quelqu'un a déjà commandé des anticorps à la demande Et si oui pouvez-vous me donner une idée du prix (de la synthèse du peptide à la livraison de l'anticorps, purifié ou non, ou du serum) ainsi que le nom de la boite.  [...]

evaluation de l'immunogénicité

Isolation de ladite proteine et injection sur différentes espèce à différentes concentrations et observer les résultats (production d'anticorps, effets sur différents organes éventuel).  [...] Donc tu produis ta protéine dans le tabac, tu la purifies, tu l'injectes à une souris, et tu regardes ce qu'il se passe (tu peux par exemple titrer les anticorps contre cette protéine) et surtout, tu compares ces résultats avec ceux de la protéine directement produite par M.bovis.  [...]

[Biologie Cellulaire] Techniques d'étude de la cellule

C'est un outil très puissant pour visualiser un élément particulier dans une cellule. Exemple. tu veux visualiser chez la souris une protéine du cytosquelette, l'actine par exemple. Tu injectes de l'actine de souris dans un lapin, son système immunitaire va produire des anticorps contre l'actine de souris (l'antigène).  [...] Tu peux alors les récupérer, les purifier, et les coupler à une protéine fluorescente par exemple. Maintenant si tu mets tes cellules de souris en présence de cet anticorps, il va se fixer sur l'actine, et te permettre de la visualiser en fluorescence.  [...]

[Immunologie] anticorps anti-humain

je suis en train de lire un article scientifique dans lequel l'auteur parle d'anticorps de souris anti-humain du facteur inhibiteur de la leucémie.  [...] donc pour identifier quel riz a bien été transformé, les scientifiques sondent le riz avec cet anticorps (enfin c'est ce que je comprend ). Mais je ne comprend pas à quoi sert chez la souris un anticorps contre une protéine produite par l'homme.  [...]

[Biologie Cellulaire] Immunofluorescence

pour mettre en évidence la présence de NFKB dans le noyau par immunofluorescence indirecte, je dois fixer les cellules, les perméabiliser puis je les mets en présence d'anticorps anti NFKB (anticorps primaire), mais pour l'anticorps secondaire, je mets un anticorps qui s'exprime contre l'anticorps qui s'est fixé sur NFKBCet anticorps secondaire doit étre fluorescent,avec quelle molécule dois-je le coupler.  [...] L'anticorps secondaire pourra être un anticorps de lapin conjugué à la fluorescéine (marquage vert) ou à la rhodamine (marquage rouge ou rose) et dirigé contre les IgG de souris par exemple (si l'anticorps primaire est un anticorps de type IgG produit par la souris et dirigé contre une protéine du cytosquelette comme l'actine).  [...]

[Biochimie] Denaturation des IgG avant western-blot

Je dois étudier une protéine produite par une souris, mais le seul anticorps disponible a été fait chez la souris, l'autre problème est que ma protéine fait environ 150 kd, et que je vois une jolie bande d'IgG a cette taille.  [...] Es-tu obligé de dénaturer à la chaleur Du SDS ou de l'urée 8M ne seraient-ils pas suffisants Les anticorps étant multimériques et attachés par des ponts disulfures, n'utilise pas d'agents réducteur sinon tu obtiendra plusieurs bandes bien différentes.  [...]

[Immunologie] Anticorps relevant

dans un contrôle négatif, on utilise plutôt une anticorps irrelevant (c'est à dire qui ne reconnait rien qui a un intérêt pour toi on pourrait le traduire par non pertinent), en immunomarquage on utilise plutot le terme de contrôle isotypique. ex si tu veux révéler une protéine X, et tu utilises un marquage direct avec un anticorps IgG1 de souris anti-X couplé FITC, tu utilises en contrôle une IgG1 de souris irrelevante-FITC (qui ne reconnait rien dans ton système, ces molécules sont vendues sous le nom de contrôles isotypiques).  [...] oui à ce moment là l'anticorps contre la protéine d'intéret est l'anticorps relevant. mais enfin c'est un peu bizzare comme langage.  [...]

Anticorps anti Lipocalin2

Je fais un western sur des echantillons de fois de souris. La Lipocalin2 est ma proteine d'interet. J'ai un anticorps de chez Thermo, mais il ne marche pas. Quelqu'un aurait-il des réferences d'un AC qui marcherait bien chez la souris.  [...] je ne connais pas la lipocalin2. mais je peux vous donner des références de boîtes qui font de très bons anticorps en général.  [...]