• Forum - Sondes, Techniques, Marqueurs

méthodes d'étude histologique HIS

on utilise des traceurs en hybridation in situ qui sont des marquages froids comme la biotine ou la digoxigénine, quand on parle de sonde froide, cela signifie-t-il simplement que le marquage utilisé est de type biotine ou digoxigenine (pour détecter certaines séquences virales par exemple).  [...] La différence entre sondes froides et sondes chaudes c'est que les premières regroupent toutes les techniques non radioactives dont la biotine et la digoxigénine et les autres regroupe tous les marqueurs radioactifs utilisés sur des sondes (P32, etc.).  [...]

[Biologie Cellulaire] Le Génie génétique

en cherchant les techniques d'analyse (cytogénétique), je suis tombé sur le FISH (en français. hybridation in-situ par des sondes fluorescentes).  [...] Sans entrer dans les détails (que je connais mal) tu vas révéler au moyen de sondes fluorescentes (par ex) certaines séquences nucléotidiques présentes sur un objet biologique. à la différence des techniques de blotting, l'étude se fait donc directement sur l'échantillon (coupe de tissu par exemple).  [...]

Sondes nucléotidique

J'ai une petite question concernant les sondés nucléotidique... Je ne comprends pas le principe. Dans mon cours est écrit qu'une sonde est capable de s'hybrider sur un acide nucléique. Pourquoi faire des sondes de 100 bases pour détecter un seul acide nucléique Je ne comprends pas l'intérêt en fait.  [...] Dans mon cours sur les techniques d'étude de l'ADN.. On dit que les amorces font 18 à 30 nucléotiques, je ne comprends pas cette notion d'amorces.. Puis c'est marqué que les sondes à proprement parler font 100 bases et qu'elles vont s' hybrider sur un acide nucléique que l'on souhaite étudier.  [...]

qu'est-ce qu'un BAC (chromosome artificiel bactérien) ?

Dans mon cours (sur la cytogénétique moléculaire), on parle successivement des sondes centromériques, puis des sondes locus spécifiques, puis de whole chromosome painting... et ensuite on parle des BACs... mais que vient faire BAC là dedans quel est le lien entre le fait de parler d'une bactérie qui peut cloner une séquence et les techniques de repérage de séquences nucléiques par des sondes je suis perdue.  [...] Pour revenir au chromosome painting (bonjour les techniques de 20 ans d'âge ) ou les premiers séquençages il faut simplement retenir qu'à l'époque les techniques étaient moins efficaces et nécessitaient beaucoup de copies d'un même gène pour pouvoir réaliser les analyses.  [...]

Génétique/Élément P/Transoposons

Si on a deux souches avec chacune une insertion sur l'X d'un élément P, comment savoir si elles sont sur le même locus chromosomique.   [...] Je cherche une réponse purement génétique et non pas en utilisant des techniques de Biologie Moléculaire (sondes. Etc...).  [...]

[Biologie Cellulaire] La cellule mystère.... - Page 11

Non ce ne sont pas des cellules. C'est une image qui résulte de l'utilisation de 2 techniques dont l'une est assez spéciale (biophysique), et l'autre est très utilisée en cytogénétique.  [...] Je vois pas trop ce que tu demandes, la technique pour la sonde fluorescente on la dit c'est la FISH mais peut être que tu veux plus de détails.  [...]

[Biologie Moléculaire] Rt-pcr

La rt-PCR est une des techniques pour détecter la présence ou l'absence d'un messager particulier. En effet les ARN sont présents en petite quantité et ne sont pas facilement détectables ni quantifiables de façon spécifique (sauf hybridation par sondes, etc.  [...] Juste une petite apartée, certaine personnes nomment aussi RT-PCR la PCR quantitative (pour Real Time-PCR), il ne faut donc pas confondre les deux techniques.  [...]

diagnostic prénatal technique

Pour faire les diagnostics grace a la biologie moleculaire on utilise pour quasi toutes les techniques de diagnostic des sondes spécifiques d'une sequences qui serait responsable des pathologies a detecter, mais comment trouve t on que justement c'est cette sequence nucleotidique qui est la source de la pathologie.  [...] La PCR est de plus en plus utilisé, et est généralement quantitative (même les petits hopitaux ont de beaux robots pour qPCR), le FISH est généralement réalisé sur les chromosomes du karyotype avec la technique du chromosome painting. L'avantage de ces deux techniques est qu'elles ne requirent pas beaucoups de cellules de départ (contrairement au SB et NB qui demande des quantités énormes d'ADN/ARN).  [...]

[Biologie Moléculaire] Marquage d'une sonde

Sinon au niveau de la nick translation et de la technique du PCR, lorsqu'on met la polymérase, on sait pas à combien de bases elle va arrêter de transcrire le brin matrice Donc à la fin de ces deux techniques, il y aura pleins de fragments de tailles variables dans le tube De plus la longueur de la sonde va varier puisque la polymérase lorsqu'elle va créer les sondes (en supposant qu'on veuille faire plusieurs sondes pour un même brin matrice) elle ne va pas toujours s'arrêter aux mêmes endroits.  [...] Au final, si on révèle tout ces brins sur une technique sur gel d'agarose par autoradiographie, on va avoir des bandes autoradiographiques partout non, puisque le poids moléculaire des sondes formées seront différentes Et au final comment alors on peut connaître la taille de l'ADN matrice puisque sur le gel d'agarose on a la taille de la sonde + celle de l'ADN sur lequel la sonde s'est accroché.  [...]

[Biochimie] Travaux pratiques de biochimie des systemes integrés urgents

Il existe aussi des techniques mettant en évidence les transports d'ions et autres à travers les membranes, ça nécessiterait des sondes à certains ions.  [...] Une fois récupéré tu le transfecte dans des cellules genre HeLA pour voir où la protéine voulue se localise. Ensuite les techniques de microscopies sont plus poussées, je ne les connais pas moi même par coeur. Je m'excuse.  [...]