• Forum - Sondes, ARN, ADN

[Identification] taxonomie moléculaire

De toute façon, c'est un peu l'artillerie lourde pour classifier. un Gram ou des test de culture dans certains milieu permettent de bien s'en tirer, mais tout dépend de ce que l'on veut. classification médicale (diagnostic) ou classification phylogénétique (et donc biomol à un moment ou l'autre).   [...] moi j'ai trouver.l'hybridation ADN-ADN,ADN-ARN,mesure de GCp.cent,etudes des ARNr,des méthodes sans amplification de la cible (utilisation des sondes.  [...]

[Biologie Moléculaire] Un anticorps marqué par un fluorochrome peut-il se fixer à un acide nucléique?

J'ai une petite question... est-il possible d'utiliser des anticorps marqués par un fluorochrome pour détecter la présence d'ARN et d'ADN au sein d'une cellule.  [...] l'ADN et l'ARN c'est des acides nucléiques donc ils sont plutot marqués par des sondes fabriquées avec des sequences complémentaires à celle qu'on veut regarder.  [...]

[Biotechnologie] ADN ARN ou PROTEINE??

lorsqu'on a les résultats d'une expérience d'hybridation in situ, comment savoir si c'est la protéine ou l'ARN ou l'ADN qu'on regarde.  [...] on nous dit juste que c'est hybridation in situ de FGF8 et Sonic helgdog dans un embryon de souri en présence d'alcool et à des temps différents. et pour mon exposé faut que j'explique l'hybridation in situsauf que c'est carrément différent comme technique selon qu'on regarde adn ou proteine ou arn.  [...]

[Biologie Moléculaire] Quand faut-il une amorce?

Les arn, une fois formés, sont pris en charge par un bon nombre de protéines qui vont s'occuper d'euxi(maturation, délocalisation.. différentes selon le type d'ARN).  [...] On peut différencier entre une amorce d'ADN ou d'ARN en utilisant des sondes radioactifs approprier ou avec hybridation moléculaire.Sourthern blot ou Northen blot.  [...]

[Biologie Moléculaire] ARN antisens à partir d'un fragment de gène

Ces phages ont des ARN polymérases très efficaces et des promoteurs très simples et petits. Ils vont permettre de fabriquer in vitro de l'ARN.  [...] Ce plasmide sera utile car fournisseur de sondes pour des Northern blot (Southern blot pour de l'ARN et non plus de l'ADN) ou de la transcription traduction artificielle comme expliqué ci-dessus.  [...]

[Biologie Moléculaire] Ribosonde

Une ribosonde est tout simplement une sonde d'ARN. Comme elle est composée de RIBOnucléotides, on ajoute ribo devant sonde pour la différencier des sondes d'ADN.  [...] Eh bien je n'ai jamais étudié la question, mais il y a deux méthodes qui me viennent à l'esprit pour synthétiser des ribosondes. Soit tu fais une transcription in vitro à partir de la séquence d'ADN voulue, soit tu fais de la synthèse en phase solide, utilisée aussi pour faire des sondes ou amorces d'ADN et des peptides.  [...]

[Biologie Moléculaire] Sondes et polymérases

Il existe des tas de sondes différentes utilisables en biologie, mais vu que vous parlez de polymérase, j'en déduis que vous pensez aux sondes ARN ou ADN. Ces sondes sont des séquences de nucléotides monocaténaires qui sont exactement l'inverse de la séquence qu'on souhaite détecter (ADN, ARNm,  [...] ..). Elle vont donc se fixer à la séquence voulue par complémentarité. Sur ces sondes, on ajoute un marqueur (radio-actif, fluorescent, ou autre) qui nous permettra de localiser la sonde.  [...]

[Biologie moléculaire] Linéarisation de vecteur PGEMt pour faire des sondes HIS

J'ai une petite question concernant le vecteur PGEMt. Ce vecteur comprend un site multiple de clonage (avec mon insert d'intérêt) ainsi que des sites d'initiation de la transcription T7 et SP6. Je me demandais s'il était nécessaire de linéariser le plasmide avant de faire agir les polymérases SP6 et T7 ou bien s'il est prévu dans le plasmide des sites d'arrêt de transcription.   [...] Je sais qu'il existe des sites de terminaison de la transcription (paires de GC, structures secondaires, signal de polyadénylation.. en fonction de si on se place chez des procaryotes ou des eucaryotes) mais j'ai beaucoup de mal à trouver l'information pour le vecteur PGEMt.   [...]

definition exacte des genes et alleles

La technique de Fish (en utlisant les sondes) qui repere les genes.. Comment elle repere les genes C'est pas les alleles qu'elle repere.  [...] Elle peut être utilisée sur de l'ADN, de l'ARN, des protéines, par fluorescence (ce sont des sondes moléculaires avec un marqueur fluorescent).  [...]

[Biologie Moléculaire] Transcription in vitro de sondes ARN marquées

j'aurai bien besoin de l'avis d'un expert en biologie moléculaire. Je cherche à synthétiser des sondes ARN marquées à la DIG ou à la biotine pour faire de l'hybridation in situ.  [...] J'ai extrait des ARN à partir du tissu cible, fait une RT puis une PCR avec des primers couplés à des promoteurs T3 ou T7. J'ai fait migrer les produits, extrait l'ADN sur gel, et fait une deuxième PCR sur cet ADN.  [...]