• Forum - Sonde, Enzyme, Restriction

[Biologie Moléculaire] test de paternité

Mes cours de biologie moléculaire sur le sujet étant enfouis dans les tréfonds de mon cerveau, quelqu'un pourrait-il me rappeler la différence (s'il y en a une) entre micro et minisatellite.   [...] Bonsoir. Si hybridation avec la sonde se fait avec fragment clivée par l'enzyme de restriction, au moment de la détection, la position des traits indiquera que le père ou la mère ( selon le brin avec lequel la sonde s'est hybridé) à donné ce chromosome a l'enfant.  [...]

[Génétique] méthode RFLP

Le plus simple est donc de prendre une sonde dont la séquence contient le site de restriction de l'enzyme.  [...] Et il faut répéter ceci pour chaque marqueur RFLP analysé. Donc définitivement la solution 1 est celle qui est adoptée (à ma connaissance).   [...]

[Biologie Moléculaire] révélation RFLP

concernant l'utilisation des RFLP dans le diagnostic génotypique cette methode necessite le couple sonde/ enzyme de restriction, cela réfère a la technique southern blot, mais cette technique est très lourde. est ce qu'il ya un autre moyen pour rééler les RFLP.  [...] En fait, tout dépend de ce que tu veux faire avec ta RFLP, si c'est visualiser une différence de nombre de fragments ou de taille de fragment (différence de taille de l'ordre de quelques dizaines de paires de base, en-dessous ça devient peut-être plus délicat) ce que j'énonce doit fonctionner.   [...]

[Biologie Moléculaire] Rflp

Pour la technique RFLP, tu utilise des enzymes de restrictions,ça marche dans le cas ou tu as des rflp,c'est à dire des SNP(single nucleotide polymorphism) qui sont dans un site de restriction.ainsi, selon l'allèle, l'enzime clivera ou pas son site, ce que l'on observe par migration sur gel.  [...] D'accord merci donc si je comprend bien la technique du southern blot ne demande pas forcément de cliver les brins par une enzyme de restriction. La sonde peut hybrider directement les brins d'adn dans ce cas.  [...]

[Génétique] Obtention de sonde plasmide

2) Je ne trouve aucun enzyme de restriction qui corresponde entre mon ARNm et les différents vecteur de clonage disponible sur le marché. Comment faire Selon mon prof c'est très simple (pour lui tout est simple) il suffit juste de choisir un plasmide et deux enzymes de restriction au pif, et de rajouter les nucleotides correspondant aux 2 bout de ma sonde. Comment je fais ca moi.  [...] 2. TA ou GC cloning ne nécessitent pas d'avoir des sites de restrictions interessants dans l'insert. Si vous ne voulez pas utiliser ces solutions, pensez à la PCR.  [...]

Raccourcissement des télomères

Bonjour à tous, j'aimerais savoir si il est possible facilement de trouver une experience qui mettrait en evidence le raccourcissement des télomères au fur et a mesure des divisions cellulaires. J'ai un Microscope électronique a balayage a ma disposition, pas de Microscope electronique a transmission et je peux commander des produits simplement je ne trouve d'experience réalisable pour un non-chercheur comme moi.   [...] Ton microscope ne te sert à rien, il te faut un peu d'enzyme de restriction, faire migrer un gel d'agarose, et terminer par un southern blot. Il te faudras aussi prpérare ta sonde (radioactive) donc c'est pas trop possible à la maison.  [...]

[biologie moléculaire] Southern blot

pardon je fait des essai sur des bacteries. Donc je digere l'adn génomique avec une enzyme de restriction. Je fait migrer sur agarose et je transfert.  [...] Etant donné que j'essayé de trouver les conditions optimal de ma sonde je travail sur un adn connu. J'ai donc choisi mon enzyme de restriction de facon a ce qu'elle ne coupe pas mon gene. En plus j'ai 3 copie du genes qui sont legerement differente... Vous comprenez pourquoi je suis autant desespéré.  [...]

Problème en biologie moléculaire

Mais ce qui reste efficace est le criblage de banques informatiques. Si tu connais la séquence de ta sonde, tu crible des banques informatiques d'angiospermes et d'oiseaux et tu vois si le pourcentage d'homologie est correct (je pense que ce pourcentage doit être supérieur à 80% pour qu'il y ait une bonne homologie).  [...] Pour le southern, il faudrait que tu coupe les génomes voulus avec une enzyme de restriction qui coupe rarement (reconnaissant des séquences palindromiques de 8 bases), tu fais un southern en criblant avec ta sonde et selon l'intensité de coloration, tu en déduiras la plus ou moins forte homologie et de là si le gène est présent ou pas chez ces espèces.  [...]

[Biologie Moléculaire] Détection adn proviral par southern blot

pour le nombre de copie je supose qu'il y a quelque chose a voir avec l'intensité de fluorescence de la sonde apres electrophorese mais alors ca implique que 'lon connais l'entièreté de la sequence du génome du virus aussi non on risque de couper cette sequence avec nos enzymes de restriction.  [...] je n'ai pas vraiment d'énoncé c'est un exemple de question que le prof nous a posé quand on parlais de la detection d'ADN etrangé dans les applications du southern donc je suppose qu'il veut que l'on réponde en utilisant cette technique. il y a un autre moyen.   [...]

[Génétique] Dm sur la myopathie de Duchenne

La recombinaison de l'ADN grâce à une injection du virus vecteur du gène de la dystrophyne pourrait être une grande évolution en thérapie génique et sur les traitements humains.   [...] Imagine que ton enzyme reconnaissent la séquence. ATTGTT, que l'on trouve dans un allèle 1. Si l'allèle 2 est muté et possède à la place ATTCTT, l'enzyme ne coupera pas à cet endroit, alors l'enzyme permettra d'obtenir des fragments d'ADN de taille différente selon que l'allèle possédé par l'individu.  [...]