• Forum - Sonde, ADN, Intérêt, Complémentaires

[Biologie Moléculaire] révélation RFLP

SI c'est une simple RFLP, je ne vois pas l'intérêt de la sonde. Une fois la digestion par l'enzyme effectuée, une simple migration sur gel d'agarose avec un argent marquant l'ADN devrait suffire à visualiser les fragments et à donner une bonne idée de leur taille.  [...] En fait, tout dépend de ce que tu veux faire avec ta RFLP, si c'est visualiser une différence de nombre de fragments ou de taille de fragment (différence de taille de l'ordre de quelques dizaines de paires de base, en-dessous ça devient peut-être plus délicat) ce que j'énonce doit fonctionner.   [...]

[Biologie Moléculaire] l'hybridation d'une sonde

est ce que l'hybridation veut dire l'association d'un ADN avec un autre ADN ou meme avec un ARN par complémentarité de bases.  [...] Il s'agit de la propriété que présente une molécule d'ADN mono-brin de s'associer spontanément et de façon spécifique et réversible à une autre molécule mono-brin si celle-ci lui est complémentaire. L'hybridation moléculaire est permise par les liaisons hydrogènes que peuvent établir les bases puriques et pyrimidiques constituant l'ADN.  [...]

[Biologie Moléculaire] Southern blot !!!

Mais si la sonde, qui est en quantité saturante je crois, rencontre un ADN de saumon à peu près complémentaire, pourquoi irait-elle voir ailleurs s'il n'y a pas un ADN qui lui correspond mieux.  [...] Par ailleurs, ne peut-on pas imaginer que lorsque l'on utilise des sondes courtes, on puisse trouver aussi des séquences exactement complémentaire de la sonde avec une probabilité élevée.  [...]

[Immunologie] [Cyto"gramme"] abs & ordonnée?

Arf, en fait je crois que je commence à comprendre l'intérêt de la manoeuvre. c'est nous faire toucher du doigt ce cycle cellulaire justement.. (que je ne comprends pas très bien, même s'il nous dit sans cesse que c'est élémentaire).  [...] Si je comprends bien c'est que la BrdU s'insère dans la double hélice en phase S, par l'intermédiaire d'une sonde, qui est une portion d'ADN... Et cette portion d'ADN-sonde qu'on a greffé en quelque sorte sur les ADNs natifs, on peut y adjoindre un des fluorochromes (via anticorps sur brome), avec par exemple en l'occurrence du FITC... (coloration verte.).  [...]

[Biologie Cellulaire] Contrôler la pureté des protéines

L'argent n'est pas quantitatif, d'où l'utilisation du bleu colloïdal et pour la spectro de masse je ne comprends pas trop ta remarque. ce sont 2 méthodes qui sont complèmentaires et qui apportent des data différentes.  [...] Un gel shift Je pensais que ça n'était utilisé que pour les interactions ADN-protéine, puisque c'est la sonde ADN marquée qu'on visaualise.  [...]

[bio mol] pUC et LacZ

Juste quelques precisions, LacZ degrade le lactose et non le glucose, et dans cette methode particuliere, le gene lacZ est incomplet, et ne peut pas par lui meme degrader le lactose. Il va complementer un autre bout du gene lacZ qui est present sur le chromosome.  [...] Quant à moi je nage un peu car si vos explications sur le gène lacZ me semblaient claires, je ne comprends plus rien de l'experience réalisée dans un article ( http.//dev.biologists.org/cgi/reprint/131/4/933.pdf ), ou lacZ est inséré en plein milieu du gène d'interet et non l'inverse.  [...]

gel shift : hhhheeeeelllp !!!!!!!

je suis en thèse et je travaille sur une proteine dont on voudrait confirmer l'interaction avec un promoteur d'un géne... je dois faire du gel shift mais dans mon labo on ne peut pas utiliser de radioactivité... j'ai vu qu'il existe des kits qui ne necessitent pas de radioactivité, il y en a même un ou il n'y a meme pas besoin de marquer la sonde d'ADN, il suffit de colorer le gel apres migration avec du SYbr green et du Sypro, cela a l'air tres pratique.  [...] je pose cette question car dans le cas de l'utilisation du kit dont je parlais la derneiere fois, on ne peut pas réaliser d'expérineces de compétition car c le gel qui est coloré apres l'electrophorese et il n'y a pas de marquage de sonde d'ADN, donc je ne vois pas pourquoi l'interaction ADN/prot serait non spécifique dans ce cas.  [...]

[Biologie Moléculaire] Sperme de saumon

Ca dépend de ta séquence et de ta sonde, si il n'y a pas une extreme complémentarité... mais bon, je pense qu'il y a sur le forum des personnes plus aptes à répondre.  [...] C'est bien la raison pour laquelle les acides nucléiques cibles se fixent sur la membrane (northern ou southern), on peut donc consevoir que de la même manière la sonde peut aussi se fixer sur la membrane, et pas uniquement sur les acides nucléiques complémentaires.  [...]

Expériences en génétique…

Et la je ne suis pas vraiment d'accord. en general pour trouver un gene specifique, on utilise plutot une sonde radioactive (adn (ou arn) complementaire du gene à identifier, marqué radioactivement, par exemple, au phosphore 32). Pour cette methode, il faut denaturer l'adn apres la migration, en general, par la soude.  [...] Piwi parlait probablement des tecnhiques de northern ou southern blot, qui te permet d'identifier un fragment contenant ton gel d'interet apres hybridation de la sonde radioactive.  [...]

[Biochimie] Différence entre puce à ADN et sonde à ADN !

Quelle est la différence entre une puce à ADN et sonde à ADN.  [...] Re. Différence entre puce à ADN et sonde à ADN.  [...]