• Forum - Séquences, Expression, Bactérie

[Biologie Moléculaire] pcr/clonage

Est ce qu'on fait la PCR apres avoir inseré les fragments d'intérets dans les vecteurs,ou est ce qu'on amplifie par PCR les fragments d'intérets qu'on insere ensuite dans le vecteurPour moi la PCR est une technique de clonage,donc si on connait la séquence qu'on veut cloner,une PCR est suffisante,il n'y a pas besoin d'utiliser de vecteurs apres.  [...] Il faut donc un promoteur en amont du fragment pour qu'il soit transcrit, il faut des séquences d'initiation de la transcription pour l'expression chez une bactérie, une séquence ori qui permet la réplication du vecteur et de son insert. Tout ceci se trouve dans un vecteur et est indispensable à l'utilisation du fragment isolé.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème transfo...

Non, l'une des extrémités est coupée par BamHI, l'autre par NcoI. Ceci n'explique d'ailleurs toujours pas l'histoire du plasmide fantôme... Pour moi, c'est une contamination. mes bactéries ont choppé une MST.  [...] Par contre bacillus est un gram+, donc un %GC plus faible que E. coli. Quand je bossais sur une bacterie a faible %GC, j'avais souvent des problemes d'expression (les sequences a haut taux de AT sont souvent reconnues a tort par coli comme etant des promoteurs), voire de mutations, ou de duplications (les ADN/ARN pol de coli n'aiment pas les succession A/T).  [...]

[Génétique] Qu'est-ce qu'un clone provenant d'un YAC?

Je te rassure, je n'ai pas plus compris que toi le principe du YAC, je crois que l'essentiel est de le voir comme un plasmide ( attention, je n'ai pas dit que c'était un plasmide, je dis juste que pour la compréhension, c'est plus simple ) qui apporte l'insert en question, le gene que tu souhaites cloner.   [...] Oui exactement, les Yacs fournissent une alternative aux systèmes bactériens pour le clonage ou l'expression de gènes eucaryotes. Ils peuvent véhiculer de grands gènes eucaryotes, avec promoteur(s) et séquences de contrôle, et conviennent donc pour étudier les fonctions des gènes.  [...]

Ecologie fondamentale: "Climax" l'emploi du concept de stabilité pour un écosystème

L'épigénétique est le domaine qui étudie comment l'environnement et l'histoire individuelle influent sur l'expression des gènes, et plus précisément l'ensemble des modifications transmissibles d'une génération à l'autre et réversibles de l'expression génique sans altération des séquences nucléotidiques.  [...] Vu dans le temps, ceci peut donner l'impression (au niveau des chiffres) que l'espèce ne se préoccupe pas du milieu, or si on se penche sur le détail on se rend compte que c'est partiellement faux. Les individus sont selectionnées dans leur capacité à exprimer leur capacité à s'adapter, mais la population parait stable.   [...]

[Biologie Moléculaire] De la chenille au papillon, serait ce une insuffisance de l'ADN?

bon sujet de reflexion, en fait l'explication réside dans l'expression différenciée du géne. Tout le patrimoine genetique est dans la chenille dans l'oeuf et le papillon mais les séquences d'expression des genes attendent des déclencheurs hormonaux ou de l''envirronnement.  [...] j'ai comme l'impression que l'on a trois infos genetique qui à chaque etape presente une certaine particularite...et aussi qu'elle est le veritable role de l'info genetique presente dans l'oeuf ici.   [...]

Enzymes de restriction

Parce que l'ADN de la bactérie est méthylée au niveau de certaines séquences bien spécifiques (plus particulièrement sur les adénines et les cytosines), ce qui permet aux enzymes de restriction de reconnaître l'ADN bactérien et donc de ne pas le couper.  [...] ..Après il y a aussi de la réparation, donc à partir du moment ou la séquence cible de l'enzyme est présente en peu d'exemplaires, il n'y a peut-être pas de grand danger pour la bactérie...faudrait voir ou se trouvent ces séquences exactement.  [...]

sequence de regulation des gènes

De plus, est ce que les sequences de regulations d'un gene controlent l'expression des ARNs.  [...] Certaines régions régulatrices (promoteur, enhancer/silencer, liaisons à un facteur de transcription,...) jouent sur le niveau transcriptionel, i.e. sur la quantité d'ARNm produit.   [...]

[Evolution] Transmission de caractères acquis

C'est, selon certains, l'ensemble des modifications transmissibles d'une génération à l'autre et réversibles de l'expression génique sans altération des séquences nucléotidiques. En bref, c'est l'utilisation de tel ou tel gène, l'expression de telle compétence déjà inscrite dans les gènes, et non l'acquisition d'un gène, la transmission de capacités.  [...] L'acquisition de compétences qui se transmettraient en passant dans les gènes est un mythe, il faut déjà avoir les gènes et favoriser leur expression.  [...]

Notion de gène

L'image de la cassette que tu lis est une bonne image oui. Concernant les gènes chevauchants, effectivement ca existe mais les systèmes d'epissages font que seul le gène qui doit être exprimé le sera.   [...] Bien sur que ca existe et ca représente une grande partie de notre génome. Chez l'Homme, on compte environ 30.000 gènes seulement ce qui n'est pas grand chose comparé à la taille de notre génome. Parmi les séquences non codantes, on trouve entre autre les séquences régulatrices de l'expression d'autres gènes (par exemple).  [...]

[Génétique] épigénétique bactérienne.

comment est régulée l'expression génétique bactérienne ou l'épigénétique d'une bactérie je sais avant que vous ne m'envoyez vers google scholar j'y vais tout de suite, mais ça serais intéressant de créer un débat ici sur ça.  [...] L'expression des gènes est contrôlée par des facteurs de transcription qui se fixent sur des séquences promotrices.  [...]