• Forum - Séquence, ADN, Enzyme, Restriction

[Biotechnologie] Enzyme de restriction

2.maintenant si une enzyme de type deux ce met sur un fragment methylé elle ne coupe pas ma question c est d ou est venu la methylation de l adn vu que c est l enzyme de restriction qui est aussi methylase.  [...] pour la 4 je sais. les enzyme de restriction son specifique a un palindrome (sequence d'adn invariante reconnu par l'enzyme de restriction) donc si il ya mutation au niveau de ce palindrome specifique l'ensyme de restriction ne coupera plus a cette endroit de l'adn.  [...]

[Biologie Moléculaire] carte de restriction?

C'est la position des sites de restriction d'une enzyme sur la séquence d'ADN digéré.  [...] Sara789, aurais-tu oublié les règles basiques de politesse.   [...]

[Génétique] Question qui me tracasse beaucoup ( information génétique )

Quand on parle d'ADN recombinant, c'est en gros quand on mets une séquence, en l'occurrence un allèle qui nous intéresse ( yeux rouges par exemple ), d'un ADN étranger dans le plasmide d'une bactérie par exemple.  [...] Il n'y a pas d'incohérence puisque le gène recombinant est obtenu grâce à la même enzyme de restriction que celle qui sert à ouvrir le plasmide. La séquence ADN d'intérêt s'insère donc dans celle du plasmide par complémentarité de ses extrémités avec celles du plasmide.  [...]

[Biologie Moléculaire] Choisir le bon vecteur?

il faut couper le vecteurs par un enzyme de restriction ensuite il faut inserer les meme sites de restriction autour de la sequence d'adn qu'on veut afin qu'on integre la sequence dans le vecteur.  [...] la séquence de ton ADN doit être coupée des deux bords avec la même enzyme que tu utilise pour linéariser le vecteur..de plus, ton site de restriction doit être localisé sur un marqueur de séléction.  [...]

[Biologie Moléculaire] Technique GST-Pull Down

c'est ça. Le truc c'est qu'il n'existe pas toujours d'anticorps dirigés contre les protéines d'intérêt ou d'anticorps bien spécifiques alors que ceux qui reconnaissent la GST le sont. Il existe aussi des techniques pour récupérer la protéine sans le tag à la fin, par exemple en clonant un site de restriction SapI entre le cDNA de la prot et celui de la GST.  [...] L'enzyme de restriction SapI coupe la séquence d'ADN SapI et une protéase (dont j'ai oublié le nom) coupe cette même séquence une fois traduite.  [...]

ADN de séquence inconnue, choix des enzymes de restriction.

Supposons que l'on veuille insérer un brin d'ADN de séquence inconnue dans un vecteur, comment fait-on pour choisir les enzymes de restriction idoines pour couper ce brin d'ADN au bon endroit (c'est à dire à ces deux extrémités, pour pouvoir cloner le brin d'ADN dans son intégralité).  [...] Grosso modo, vous avez un fragment d'ADN que vous souhaitez faire rentrer dans un plasmide. Vous ne savez pas comment il a été obtenu, vous ne connaissez pas son état. Pour le faire entrer dans un plasmide, il va vous falloir ouvrir le plasmide en utilisant une enzyme de restriction dont il existe deux types.  [...]

[Biologie Moléculaire] Identification d'un gène déterminé

j'imagine qu'il faut découpé ce gène dans la bactérie 1, à l'aide d'enzyme de restriction, puis dans le PCR ajoutez ajouté des. ddatp, ddttp, ddctp, ddgtp fluorescent afin de pouvoir avoir une séquence de ce gène contenue dans la bactérie 2, si la bactérie 2 à ce gène.  [...] On veut vérifier si cette séquence se trouve dans ADN 2 donc, il faut que cette séquence soit le primer de l'ADN 2 lors du PCR à l'aide d'enzyme de restriction on va découper ce qu'il y'a autour pour n'avoir que la séquence ( je ne sais pas si il existe des enzymes de restrictions qui peuvent découper cette suite, mais là ce n'est qu'un exemple).  [...]

recherche d'un contact par mail avec un laborantin

Faire une électrophorèse seule ne permet pas de différencier un ADN A d'un ADN B (même si c'est l'ADN humain et l'ADN d'une fougère...). il faut soit digérer l'ADN à l'aide d'enzyme de restriction (comme l'a dit noir-ecaille), soit utilisé la PCR pour amplifier certaine séquence (comme l'a dit TanguyE).  [...] Généralement, lorsque l'on utilise une enzyme de restriction commune, on ne parle pas d'où elle coupe (car elle peut aussi des fois ce tromper) mais à quelle fréquences elle coupe en moyenne. Tout les 200pb Ou toute les 4000pb C'est surtout ceci qui est regardé.  [...]

[Biologie Cellulaire] enzyme de restriction

On prélève l'insert (le gène à cloner) grace a une enzyme de restriction qui va cliver l'ADN sur des sites de restriction spécifique (c'est une séquence palindromique). On peut ensuite amplifier l'insert par PCR. puis l'insérer dans le polylinker avec une ligase.  [...] ce n'est pas qu'une question de quantité... mais imagine ce que tu vas avoir si tu coupes ton ADNg par une enzyme de restriction genre EcoRI.  [...]

[Biologie Moléculaire] electophorese des fragements d'ADN

Attention, on ne dit pas qu'une molécule a une enzyme de restriction, mais qu'elle possède un site / une séquence cible de restriction pour l'enzyme en question.  [...] dans le profil 1 on a migration de 2 fragement de gene B ça veut dire on a déja subit l'ADN a une enzyme de restriction qui a coupé B mais pas A (alors que ça n'est pas indiqué dans l'exercice).  [...]