• Forum - Séquençage, Detection, Mutations

[Biologie Moléculaire] Séquençage bidirectionnel

J'aimerais avoir vos éclairages sur une technique particulière de séquençage, le séquençage bidirectionnel.  [...] De ce que j'ai pu lire, cette méthode de séquençage est particulièrement employée pour la détection des mutations (type facteur V leiden). Est-ce exact.  [...]

[Biologie Moléculaire] Meilleur technique de séquençage

concernant le pyrosequençage je crois que tu es limité au max à 200 paire de bases et cette technique sert sourtout pour identifié de point de mutation precis sur ta séquence.  [...] - Séquençage par hybridation/ligation (système automatisé SOLiD), adapté au re-séquençage, à la détection de SNP et à l'étude de l'organisation des génomes.  [...]

[Evolution] [évolution] La probabilité des mutations "favorables"?

Chez la plus part des eucaryotes et l'homme en particulier, la détection des mutations germinales et l'estimation de leur taux est confronté au problème de la diploïdie. La plupart des mutations sont récessives et non décelables jusqu'à la formation d'une cellule-oeuf homozygote.  [...] je n'ai pas assez de temps pour repondre point par point mais j'ai l'impression que tu melanges un peu les causes et les consequences. et que tu oublies (comme la bien rappele je ne sais plus qui) que les mutations sont aleatoires et que c'est l'environement qui selectionne ENSUITE.  [...]

[Génétique] Cancers et mutations

Comme le titre l'indique je me pose une question concernant les mutations et leurs détection par la cellule... à savoir est-ce qu'une cellule a la possibilité de détecter des modifications autre que les mésappariements et les lésions Plus précisément peuvent-elles détecter la modification d'une paire de base (mutations faux sens/non-sens ou anti-sens) J'ai cherché mais je n'ai rien trouvé.  [...] .. hors, dans les cours sur le cancer on parle de détection et de réparation de MUTATIONS. ensuite quand on rentre dans les détails des systèmes de réparations, les exemples sont basés sur des mésappariements, des lésions ou encore des dommages de l'ADN causés par exemple par le benzopyrène.  [...]

[Biologie Moléculaire] comment detecter les mutation d'un gène trop long??

je veut detecter les mutations qui peuvent figurer sur les exons d'un gène eucaryote de 28 exons qui sont trops distancés les uns par rapport aux autres (car les introns sont trop longs). à votre avis quelle est la méthode la plus simple, la plus courte et la moins coûteuse qui permettra la detection des mutations.  [...] . ADNc.. PCR.. séquençage de 4 ou 5 fragments et faisable ou il y a mieux y a-t-il quelqu'un qui l'a déja effectué j'attend vos idées, vos experiences, vos suggstions...et merci d'avance.  [...]

Beljanski et la transcriptase inverse

Rappelons que les tests en usage pour la détection du potentiel carcinogénique d'une substance reposent sur la mutagénicité des substances testées. Or, il faut bien reconnaître que de 30 à 40 % des substances qui causent le cancer ne provoquent pas de mutations.  [...] Il y a différentes façons de détecter le potentiel carcinogénique d'une substance, et toutes ne reposent pas sur la recherche de mutations dans l'ADN. Les études épidémiologiques ou celles où on soummet un organisme ou des cellules à une substance donnée ne recherchent pas les mutations elles-même mais bien l'apparition de cellules cancéreuses.  [...]

optimisation pcr

je fais mon projet de recherche sur la detection des mutations d'un virus ( hépatite B), j essaie d amplifier un géne de ce virus mais j ai un probléme avec le pcr, je trouve toujours des bandes non spécifiques. est ce qu il ya qqn qui peut m aider a resoudre ce probléme.  [...] Ensuite vous pouvez faire varier la T° de la phase d'hybridation. C'est tres important pour la PCR de bien utiliser une bonne température. Faites des essais entre 55°C et 65°C. Vous pourrez sans doute faire disparaitre des bandes aspécifiques.   [...]

Épigénétique

Génétique car les mécanismes épigénétiques sont eux-mêmes mis en place par des protéines codées par des gènes et la détection de mutations provoque la mise en place de système de réparation qui nécessite une augmentation de l'expression de protéines réparatrices (ce n'est qu'un exemple parmi tant d'autres).  [...] Je trouve l'ensemble de ces évènements suscitant une adaptation épigénétique au moins autant hasardeux que les mutations... Une adaptation épigénétique conférant un avantage sélectif peut être sélectionnée par la sélection naturelle. Par exemple, une équipe a montré que l'inactivation d'un corépresseur (NCoR1) permet au nématode et à la souris d'avoir des capacités musculaires accrues http.  [...]

[Génétique] protocole experimental?

la transcriptase inverse - qui permet au VIH de se répliquer - est une enzyme ne possédant pas de mécanisme de détection des erreurs de transcription. Les erreurs sont donc fréquentes et ont été estimées à une tous les 1 700 à 10 000 nucléotides produits. Comme le génome du VIH est composé d'un peu moins de 10 000 nucléotides, il y a approximativement entre une et 10 mutations à chaque cycle viral.  [...] question de s acharner pour faire stopper les mutations. c est normal quoi. on creerait un certains nombre de vecteurs. bon j arrete de baratiner et je vais aller etudier. en quebecois on dit gausser sur un sujet.  [...]

Utilité de la PCR en médecine ?

Ensuite si ton échantillon n'est pas assez concentré en ADN à séquencer tu ne pourras pas le séquencer de manière fiable, d'une part parce que les séquenceurs utilisés en routine pour ce genre de manip ont un certain seuil de détection et qu'une seule molécule ne suffit pas, et d'autre part parce que tu veux que ta molécule soit séquencée plusieurs fois pour avoir une certaine profondeur de séquençage te permettant d'affirmer que la séquence que tu as est bien celle que tu avais dans ton échantillon au départ.  [...] Dans ce cas, à quoi sert concrètement le séquençage par la suite (Méthode de Sanger notamment) Si on connaît déjà la séquence de la mutation lors de la PCR, quel interet de rechercher cette séquence à l'aide des didésoxynucléosides et tout le reste.  [...]