• Forum - Sang, Humain, ADN

[Biologie Moléculaire] Meilleure technique d'extraction ?

bonjour, j'ai recueillis du sang total humain en présence d'EDTA, j'ai commis une faute en conservant ce sang à -80°C ce qui provoquera une hémolyse, est ce que je peux, comme même, extraire l'ADN à partir ce sang congelé SVP il n'ya pas une solution j'ai besoin d'aide.  [...] aucun probleme a mon avis. Je connais des gens qui récupèrent de l'ADN de sang congelé. Je te propose de chercher des protocoles sur internet, il y a pas mal de solutions. Par exemple. http.//www.protocol-online.org/prot/...ood/index.html.  [...]

Utilité de la PCR en médecine ?

La PCR permet d'amplifier certaines séquences bien précises. Si par exemple on prélève du sang à quelqu'un et qu'on en extrait l'ADN, cet ADN appartient potentiellement à plusieurs individus. l'humain qu'on a prélevé ainsi que des parasites éventuels circulant dans son sang.  [...] Si on veut savoir si cet individu est porteur d'un virus du sang, on va utiliser des amorces spécifiques d'une séquence du virus en question, et la PCR amplifiera cette séquence et cette séquence seulement, au détriment de tout le reste de l'ADN, qui était beaucoup plus abondant au départ (puisque le génome humain est beaucoup plus long que celui du virus).  [...]

extraction d'ADN

je fais des extractions d'ADN à partir de sang humain et j'aimerai savoir si je peut remplacer la protéinase K par une autre enzyme moins cher.  [...] Juste comme ca, quel type d'ADN on peut recuperer dans le sang, je croyais que les hemacies etaient anuclees Cellules immunitaires.  [...]

[Biochimie] estimation de le concentration d'ADN aprés spectrophotometrie

Bonsoir, au cours de mon stage à la faculté, j'ai fais des extractions d'ADN à partir de sang humain, et aujourd'hui j'ai dosé mes echantillon par spectrophotometrie (ADN dilué au 1/100 dans du TE). Je voudrais calculer la concentration de mon ADN dans chaque echantillon, comment puis je faire à part la regle de. 1 DO correspond à 50 µg/ml.  [...] Je voudrais appliquer la formule de yumyum (plus haut) sur 2 µl d'ADN dilué dans 998µl d'eau distillé (le tout donne 1000µl), comment doit-je appliquer la règle précédemment cité si je veux trouver la concentration de ma solution en ADN.  [...]

[Biochimie] Definitions et propriétés

Mais sache également que le phénomène inverse existe salting in. Pour faire précipiter ou cristalliser une protéine, on peut abaisser de façon drastique la concentration en NaCl.   [...] salut fabien, moi je fais l'xtraction de l'ADN à partir du sang (entre 8 et 10 ml) humain avec la technique salting out, pour la précipitation des protéines j'utilise 1 à 1, 2 ml de NaCl 6x molaire.  [...]

[Biologie Moléculaire] Concentration ADN plus élevé au picogreen qu'aux UV (spectrométrie)

J'ai fait plusieurs quantifications d'ADN et voilà que la concentration de mes échantillons est plus élevée au picogreen qu'aux UV. Voici comment je procède.  [...] Ce sont des échantillons d'ADN humain provenant de Buffy Coat (couche de cellules blanches du sang). Je prends 4 ul d'ADN que je dilue dans 196 ul de TE 1X (donc une dilution 1.50). Je lis ensuite la plaque dans le lecteur absorbance (UV) ce qui me permet de déterminer la concentration ainsi que la pureté.  [...]

l'extraction de l'adn à partir du sang

S'il vous plait je veux savoir la qualité du sang humain à partir duquel je peux extraire l'adn càd est ce que je peux le conserver puis je l'utilise par la suite ou non,si non dites moi s'il vous plait pourquoi.  [...]

[Biologie Moléculaire] un protocole fiable pou extraire l'ADN

je fais des extraction d'ADN à partir de sang humain atteint par le VIH,j'ai pas réussi a avoir un protocole convenable surtout pour la lyse des globules blancs.j'aimerais bien avoir une technique convenable et surtout fiable parce que mes ADN sont fragmentés et de mauvaise qualité(avec le détail des quantités de chaque réactif dans chaque solution ou bien simplement avoir la gentillesse de m'envoyer des sites ou des liens qui peuvent m'aider)merci infiniment.  [...] je suis nouvelle sur le site et c ma première visite..je vais finir par m'y habituer et désormais vous n'aurez pas 3000 discussions.   [...]

[Biologie Moléculaire] Problème de PCR

se sont des ADN extraits à partir du sang total humain. non je ne pense pas que c'est une mutation parceque certains de ceux qui n'ont pas marché la 1ère fois, ils ont marché dans le 2ème essai d'autre part la mutation ne peut pas exister au niveau de plusieurs exons.  [...] -mon ADN n'était pas propre comme le tien, il y a sans doute des inhibiteurs, et plus ton amplicon est long et moins il y a de chance que la PCR fonctionne. est ce que les amplicons, pour les PCR qui fonctionnent sur ces 2 adn, sont moins longs qui ceux qui ne marchent pas.  [...]

[Biologie Moléculaire] osmose hématies et leucocytes

Dans le but de faire une extraction d'ADN à partir de sang, j'ai recherché des protocoles m'indiquant qu'il fallait faire éclater les hématies par choc osmotique...J'imagine donc qu'il faut ajouter une solution mois concentré (comme de l'eau distillée je pense) mais comment faire pour que seul les hématies éclatent et non pas les leucocytes.  [...] Je ne vais pas travailler avec du sang humain mais le résultat serait le même. Effectivement les hématies n'ont pas ne noyau donc peut d'ADN c'est pour cela que je veux les faire éclater. Je vais donc garder les leucocytes intacts pour les récupérer après centrifugation ce qui me permettras une fois les leucocytes récupérés de faire une extraction efficace.  [...]