• Forum - Sandwich, Autre marque, Enzyme

Anticorps polyclonaux pour ELISA

Je dois réaliser un ELISA en sandwich pour doser un antigène. Mon Ag sera pris en sandwich entre un Ac non marqué et un autre marqué par une enzyme.  [...] Vais je avoir une compétition entre mes deux anticorps mon dosage va t-il être spécifique de mon antigène.   [...]

[Biochimie] Méthode de sandwich

Est ce que quelqu'un peut m'expliquer en quoi consiste la méthode de sandwich INDIRECT,en utilisant 3 anticorps,le 1er est fixé sur le tube sur lequel vient se fixer l'antigène et les deux autres sont de l'autre coté(le 2ème est fixé sur l'antigène du coté libre et le 3ème est fixé sur le 2ème ac tt en portant une enzyme).  [...] Voici quelques liens qui j'espère pourront répondre à ta question.   [...]

immunofluorescence

les 3 techniques sont bien utilisées toutes les 3 en elisa. celle en sandwich consiste a coaté une plaque avec un anticorps. ensuite tu rajoute ton antigène qui va se fixer a ton anticorps. tu rajoute ensuite un autre anticorps marqué avec un marqueur fluorescent qui va se fixer sur un autre épitope de ton antigène. tu n'as plus qu'à lire les résultats.  [...] En sandwich peut également être pour faire de l'immunolocation avec un anticorps fluorescent couplé a le GFP en N-terminal et DsRED en C-terminal par exemple... le tout pour étudier une protéine qui subit un clivage, exemple. la nucléoline... et ainsi suivre dans quel partie de la cellule elle est clivée (Noyau, nucleole, mitochondire ou autre.  [...]

[Biologie Moléculaire] Methode sandwich ACTH

Bonjour, Elisa sandwich est une méthode qui permet la détection d'antigènes par des anticorps monoclonaux. tout d'abords il ya fixation d'Ac sur un support solide, puis on ajoute l'échantillon, s'il contient l'antigène, il sera fixé spécifiquement par les Ac, on fait un lavage pour éliminer l'excès, et on ajoute un 2ème Ac spécifique de l'antigène et qui est couplé à une enzyme.  [...] Ainsi, l'antigène s'il est présent, sera fixé entre 2 Ac comme un sandwich, la révélation se fait en ajoutant le substrat de l'enzyme qui va donner un produit coloré.  [...]

[Immunologie] les technique immunologique

En marquant les anticorps avec des molécules fluorescentes, on arrive à l'immunofluorescence. On utilise ainsi un fluorophrome dont on détecte l 'émission de lumière. Les principaux colorants utilisés sont la fluorescine et la rhodamine. Le maruage peut être direct ou indirect.  [...] L'ELISA quant à lui dépend d'une enzyme conjuguée.a un anticorps et qui réagit avec un substrat incolore pour produire une réaction colorés. On distingue l'ELISA indirect, sandwich et compétitif. Tu peux donc utiliser les mots clés que je t'ai proposé et effectuer une recherche plus approfondie.  [...]

[Immunologie] Elisa

le test en sandwich. d'abord tu coat ta plaque avec un anticorp par ex, ensuite tu rajoute ton antigène, puis enfin tu rajoute un autre anticorps qui va se fixer sur un autre épitope de ton antigène. le signal corespon a la concentration de ton antigène.  [...] le test par comptition. tu as coaté ta plaque avec un anticorps, mai la tu rajoute 2 antigène qui vont etre en compétition avec ton anticorps. sur l'un de tes Ag il y en aura un de concentration connu et marqué et l'autre sera celui recherché X. plus il y a de signal moin il y a d'AgX recherché.  [...]

[Immunologie] Cytokine multiplexing

Je crois que c'est lorsque tu veux détecter voir quantifier plusieurs cytokines d'un même surnageant. Il y'à deux techniques, l'une ELISA en sandwich et l'autre avec des billes d'après se que je viens de voir sur le net.  [...] C'est pour ma thèse et je dois mettre des noms en français sur les figures légendées en anglais.   [...]

[Biologie Moléculaire] Concentration d'une hormone dans une prise de sang

Parce que c'est bien beau de donner un prélèvement de sang et d'avoir les résultats, mais qu'est-ce qu'il se passe entre les deux.   [...] Il me semble que la technique utilisé est un ELISA en double sandwich ou indirect (ou peut être une autre mais il faut une technique très sensible après une étape de purification sur colonne d'affinité ).  [...]

[Evolution] Evolutions diverses et variées

En gros, le sujet d'actualité est le réchauffement de la planète. Certains diront que c'est l'Homme, d'autre que c'est un cycle naturelle et d'autre que c'est l'effet des sandwich cornichon-moutarde-chocolat, bref... En fait, j'avais (et d'autres l'ont fait aussi) progressé par une méthode simple, je regarde et je tente d'expliquer avec des choses à mon échelle.  [...] Cependant je trouve plutôt intéressante cette idée générale de voir que les mécanismes qui sont à l'oeuvre à petites échelles le sont aussi à grande échelle, que les lois de la nature peuvent s'appliquées aux différentes échelles. Mais sans anthropomorphiser ( il est moche ce mot mais j'en ai pas d'autre )la chose comme avec cette histoire de virus.  [...]

[Immunologie] Anticorps et pH

4. incubation de l'Ac-Anti IgG marqué. Jusque là, aucun problème, ça marche du tonnerre. Mais je voudrais réduire ces étapes au nombre de 3 en 'coatant' les puits directement avec mon AcX en ayant les région Fab qui se lient à la plaque (contrairement à un ELISA sandwich où l'Ac est lié à la plaque via la région Fc) et ensuite avoir les étapes de saturation et puis d'incubation avec l'Ac-Anti IgG.  [...] 1. Est-ce que cela est possible Si oui (et j'imagine que oui), faut-il que je change le pH Et du coup, à quel pH faudrait-il travailler Cela ne risquerait-il pas de diminuer l'affinité de mon anticorps anti-IgG pour la région Fc de mon AcX.   [...]