• Forum - Sac, Dialyse, Diffusion

[Biochimie] Dialyse

Mon cours dit que l'on doit placer les extraits de membrane solubilisées dans un sac semi perméable. lorsque ce sac est placé dans un milieu dépourvu de détergent, celui ci sort du sac de dialyse par diffusion.  [...] Après plusieurs bains on peut progressivement eliminer le détergent du sac, la concentration du détergent devient inférieur a la concentration micellaire critique. Les lipides reconstituent alors spontanément une bicouche.  [...]

[Biochimie] Qu'est-ce qu'un sac à dyalise ?

Ben simplement, un sac à dialyse c'est un sac particulier qu'on utilise en laboratoire pour faire des dialyses... On y inserre notre solution protéique, on ferme et on met le tout sous agitation dans un grand volume de tampon de dialyse.  [...] Afin de diluer au maximum ces molécules de taille inférieure, on place le sac de dialyse dans un grand volume d'eau distillée (un seau d'eau). Et au bout de quelques heures, on remplace l'intégralité de l'eau distillée par de l'eau distillée pure. Ainsi de suite, de telle sorte qu'au bout d'un grand nombre de changements d'eau, on aura éliminé la quasi-totalité des molécules de petite taille du sac de dialyse, alors que les molécules de taille supérieure à la porosité de la membrane n'auront pas bougé.  [...]

[Biochimie] Principe de la dialyse

La question 2 est plutôt orientée dans le sens mécanisme de la dialyse, c'est à dire que ce passe t-il au niveau des electrolytes (rôle de la membrane, principe de la diffusion etc...).  [...] Le soluté S traverse et diffuse à travers la membrane semi perméable du sac du dialyse dans le sens de gradient de concentration.  [...]

[Biologie Cellulaire] Question qcm avant exam

- se comporte comme la bicouche ( la bicouche et la menbrane de dialyse sont toutes les 2 des s à perméabilité sélective, de plus elle est présente dans le rein donc oui).  [...] Pour la 4 je dirais non car la membrane cellulaire ne laisse pas passer les ions.Elle ne laisse pas passer le NaCl par diffusion car c'est une molécule chargée. Il passe par une protéine, un canal, le Na K Atpase. Idem pour le saccharose je pense alors que dans la membrane de dialyse ils passent tout les 2 par diffusion.  [...]

Questions Biologie !

1-Comment fonctione la machine qui fait la dialyse (coté chimique et phsiqiue).  [...] 1- La dialyse reprend le principe de fonctionnement normal du rein, c'est à dire que tu as des echanges de substances par osmose. Dans le cas de la dialyse, tes échanges se font en flux inversés (un peu comme la diffusion à contre courant dans les branchies des poissons).  [...]

[Biochimie] dialyse-protéines

j aimerai savoir si lors d une dialyse des protéines les sacs de dialyse se gonflent ou gardent leur volume de départ.  [...] Si tu as compris en quoi correspond une dialyse, alors, tu devrais toi même savoir pourquoi le boudin gonfle.  [...]

[Biotechnologie] Gel filtration

Tout d'abord merci de la réponse rapide, mais je posait plus la question pour savoir l'utilité, car dans mon protocole je sors d'une chromatographie d'affinité au cobalt, ensuite je clive le tag histidine de mes protéines, dialyse toute la nuit, ensuite je repasse sur du cobalt pour eliminer les prot non clivées, et la je fais la GF, et j'avoue trouver ça étrange sachant qu'on viens juste de purifier la prot, et qu'on l'a nettoyé de l'imidazole (dialyse).  [...] La gel filtration a aussi l avantage de pouvoir utiliser le tampon que l'on veut en fin de purification differente concentration en NaCl (tres utile apres une echangeuse d ion), et dans ton cas, meme apres dialyse c'est une facon d etre sur de ne plus avoir d imidazole.  [...]

[Biologie Moléculaire] purif des proteines recombinantes apres coupure au facteur X

Non pas de meilleure idée. Un centricon YM20 me semble bien pour éliminer l'imidazole. Si vous voulez bien tout éliminer il suffira de compéter en buffer quelques fois avant de récupérer votre fraction (sans assecher la colonne bien entendu). J'imagine que l'on peut aussi faire ça en dialyse mais je ne l'ai jamais fais en pratique, je ne vous le conseillerai donc pas.  [...] Tu as toujours un peu de perte en dialyse certes mais si tu utilises un boudin avec un cut-off de 10 000 Da y aura pas de problème.  [...]

[Biochimie] Concentré une protéine recombinante

Je vais peut-être dire une bêtise mais on sait jamais. Ca pourrait pas marcher en faisant une sorte de dialyse avec un boudin de dialyse.  [...] Que je sache, la dialyse ne permet pas de concentrer mais plutôt d'enrichir un échantillon en macromolécules de taille supérieure à la porosité de la membrane...L'enrichissement doit plutôt être vu comme une augmentation du rapport [macromolécule d'intérêt]/[solutés] alors que [macromolécules d'intérêt] ne varie pas.  [...]

[Biochimie] Dialyse et réactions colorées des protéines

Pourquoi as-tu réalisé une dialyse Pour désaler ta solution de protéine.  [...] alors je pense que ton résultat est normal. tu as montré que les protéines restent à l'intérieur du boudin de dialyse et que seuls les sels sortent (et autres petites molécules).  [...]