• Forum - Rouge, Protéines

[Biochimie] electrophorèse

Mais d'ailleurs, j'avoue que je ne sais pas exactement comment fonctionne le rouge Ponceau, et je crois que c'est assez consensuel. J'ai demandé à un collègue biochimiste des protéines et il semble que ce ne soit pas vraiment définit.  [...] Personnellement je le laisse 1/2h dans le rouge puis je rince doucement d'abord à l'acide acétique pour enlever le gros puis ensuite doucement à l'eau. Les bandes apparaissent progressivement puis, après une phase où elles sont assez nettes, elles disparaissent.  [...]

[Biologie Cellulaire] Contrôler la pureté des protéines

C'est très pratique pour isoler spécifiquement une protéine car sur une électrophorèse SDS PAGE classique, seule la masse moléculaire est discriminante donc lorsque tu fais une coloration de ta membrane en rouge ponceau, tu observes une multitude de bandes et chaque bande correspond à de nombreuses protéines différentes.  [...] Cependant il est écrit que les auteurs ont produits les protéines. C'est bien que l'on ne parle pas de protéines endogènes. D'où l'intérêt de produire ça dans un lysat de réticulocytes et de faire un gel shift pour tester la capacité des prot à interagir (puisque c'est sur ce point que la demande insistait).  [...]

Le lait bon ou mauvais pour la santé ? - Page 2

Tout d'abord, pour la distinction protéines animales/végétales. il est à savoir que les protéines animales peuvent etre appelées complètes pour donner une image, et les végétales incomplètes... Cependant, les protéines végétales couvrent tres bien nos besoins en protéines, il faut simplement les compléter par des protéines animales (poisson, viande blanche ou rouge, oeufs,  [...] La plupart des produits laitiers sont acides pour le corps. Vous me direz que c'est le cas des sources de protéines animales de manière générale. Et bien, quoi que je n'ai aucune données scientifiques en ma possession, je pense que les produits laitiers sont plus acidifiants que la viande pour le corps.  [...]

[Biologie Moléculaire] Resolubilisation des proteines aprés extraction au trizol

En fait on a ajouté à l'echantillon d'hypophyse 800 µl de Trizol. Aprés homogeinisation, on a incubé pendant 5mn. Ajout de chloroforme (incubation 3mn) et centrifugation à 12 000 tours pendant 15mn à 4°C. On a obtenu une phase aqueuse transparente contenant L'ARN et une phase rouge contenant l'ADN et les proteines.  [...] Après avoir récupéré la phase rouge contenant l'ADN et les protéines, on a ajouté 300µl d'éthanol 100% pour précipiter l'ADN. Après incubation 3mn, on centrifuge à 4600 tours pendant 5 mn. On prélève la phase aqueuse à laquelle on ajoute 1ml d'isopropanol pour précipiter les protéines.  [...]

[Génétique] Le phenotype multifactoriel ?

Case rouge. alimentation riche en graisse bacteries, Proteines.  [...] rep. Nan car, si la lipoproteine a est transportées correctement vers le foie, son lieu d'elimination alors L'individue ne sera pas malade.  [...]

[Biologie Moléculaire] coloration bleu de Coomasie

Pour colorer les protéines sur gels, on utilise le plus souvent le bleu de Coomassie. Mais on utilise également le nitrate d'argent qui a une sensibilité bien plus grande lorsqu'on a du mal à détecter les protéines avec le Coomassie.  [...] Pour colorer les membranes de WB par contre, on utilise plutôt le rouge ponceau ou le noir amido (qui a une sensibilité intermédiaire entre le bleu de Coomassie et le rouge ponceau) pour observer toutes les protéines transférées.  [...]

Problème de séparation - Western blot

La seule chose qui a changé par rapport à d'habitude c'est que j'ai préparé le gel la veille et je l'ai enroulé dans du sopalin humidifié + du film et je l'ai laissé à 4°C (sans le peigne des puits). Cela a déjà été fait par d'autres personnes et ça marchait.   [...] La coloration au rouge ponceau de la membrane a également montré que toutes les protéines étaient en bas.  [...]

Filtration corpuscule rénale

Si je me souviens bien de mon cours de physio rénale, les molécules qui peuvent passer la capsule de Bowmann sont uniquement celles d'un poids inférieur à 65kDa. Donc les protéines (exemple IgG, sérumalbumine) ne passent pas, seulement le glucose, les acides aminés, les ions.  [...] la barrière de corpuscule rénale s'oppose aux macromolécules et les élément figurés ( protéines + globule rouge ) à cause de leur grande taille.  [...]

[Biologie Moléculaire] Vérification transfert W.Blot

L'utilisation d'un marqueur de poids coloré permet aussi de s'assurer immédiatement que le transfert s'est bien déroulé (i.e. que les protéines ont été transférées sur la membrane), mais ne montre pas que le transfert a été homogène sur toute la membrane à l'inverse du rouge ponceau.  [...] Le coomassie permet de révéler toutes les protéines que tu as déposé. C'est une méthode de révélation plus sensible que le rouge ponceau mais en revanche la coloration est irréversible et empêche de faire un immunoblot derrière.  [...]

[Physiologie] Les globules rouges et la pression osmotique

Et il y a un petit point que je n'arrive pas à comprendre, on nous a demandé. tous les globules rouges ont-ils la même résistance à une différence de pression osmotique donnée.  [...] Oui en effet, avec le temps, la déformabilité du globule rouge (assurée par les protéines situées à l'intérieur de la membrane) est diminuée, facilitant ainsi l'hémolyse.  [...]