• Forum - Risque, Dégradation, ADN, Enzymes

[Biotechnologie] Fragilisation d'une paroi de champignon

j'essaie d'extraire l'ADN des spores de ma petite bete mais rien y fait donc s'il y a des gens qui pourrait me donner des pistes plutot enzymatiques pour fragiliser voir détruire la paroi d'une spore de champignons je suis préneuse.  [...] en effet ça serais plus simple mais cette souche est difficile à faire germer il faut environ 2 à 3 mois pour qu'elle germe d'où l'intéret de pouvoir récuperer son ADN avant qu'elle germe. Je sais bien que le risque de dégradation de l'ADN est important en utilisant des enzymes mais je pense que c'est une bonne solution.  [...]

ADN-Cytosol

Chez les eucaryotes, jamais l'ADN ne quitte le noyau... trop de risque de mutation / dégradation. C'est pour cela le noyau, minimiser le contact de l'ADN avec l'extérieure.  [...] Normalement, l'ADN cellulaire eucaryote reste dans le noyau, celui de la mitochodrie dans la mitochondrie. Le seul moyen de trouver de l'ADN (hors exception) est de trouver de l'ADN viral (phase de transition avant de passer dans le noyau ou réplication virale).  [...]

[Microbiologie] Passage dans le noyau de l'ADN ou ARN viral. - Page 2

On pourrait même imaginer que se sont les virus eux même qui ont inventé les premiers génomes ADN. Pour quelle raison Peut etre pour se protéger des enzymes de restriction ARN-dépendante des cellules.  [...] Les bacteries aussi utilisent ce meme mechanisme (souvent sous forme de methylation) pour proteger leur ADN genomique de la degradation par les enzymes endogenes.  [...]

[Biochimie] Extraction ADN

-Pour finir l'usage d'un détergent a été mentioné par mon prof de physique mais impossible d'en tirer une information à ce sujet.   [...] Salut, le détergent sert à fractionner les membranes des cellules. Le phénol et le chloroforme servent à séparer l'ADN des protéines qui se retrouvent ainsi dans deux phases différentes. Le phénol a une action inhibitrice sur les enzymes d'une manière générale, ce qui évite la dégradation de l'ADN par les DNases (spécialisées dans la destruction de l'ADN).  [...]

Indicateur biologique du cuivre?

Par exemple une plante dont la croissance serait particulièrement influencé par la concentration en cuivre du milieu.   [...] Il faut un minimum de cuivre (ou d'ion métallique divalent) pour faire fonctionner la plupart des enzymes (bactérienne ou humaine). D'ailleurs, l'EDTA, qui chélate (capture) ces ions, permet de conserver des échantillons de protéines/ADN/ARN de la dégradation enzymatique (en partie du moins).  [...]

[Génétique] Questions à propos de la thérapie génique

Le vecteur peut être intégré en même temps que le gène qu'il porte. C'est le cas des vecteurs basés sur le VIH notamment, sauf erreur de ma part. Dans les cas où seul le gène d'intérêt est intégré, le reste est tout simplement dégradé par les DNases (les enzymes responsables de la dégradation de l'ADN).  [...] Concernant les sites de restriction, ce sont des séquences d'ADN double brin qui sont reconnues et clivées par des enzymes bactériennes.  [...]

besoin d info sur la transfo des levure au PEG

Les levures possedent une paroie pour maintenir leur forme, on fait souvent des digestions des paroies des levures pour des manips tels que extraction adn genomique ou dans les techniques de microscopie. Ca depend donc si tu digere ta paroie avant des transformer tes levures ce que je ne fait jamais (les enzymes necessaires a la degradation de la paroie sont cheres).  [...] L acetate de Lithium agit en permeabilisant la menbrane afin de faciliter l entree du plasmide. Le plasmide est melangé avec un ADN entraineur (carrier) qui facilite egalement l entree du plasmide. Les Peg par sa viscosite garde les cellules encontact avec l adn et facilite l adsorption.  [...]

[Biologie Moléculaire] Principe des banque génomique/cDNA

On ne parle pas de dégradation par des enzymes de restriction, mais de digestion. La différence est quand même notable. avec le terme dégradation je signifie le fait que je pars d'une macromolécule (ADN) pour me retrouver avec des nucléotides à la fin. Alors que le terme digestion signifie que je vais couper à certains endroits pour me retrouver avec des fragments de tailles différentes.  [...] C'est la révélation. Par ailleurs, je ne suis pas d'accord avec cette notion de par chance. quand on fait une banque, on s'arrange que la quantité de bouts soit telle que chaque bout soit représenté environ 5 fois en excès... Donc, il se trouvera forcément dans un vecteur.   [...]

urgent: recombinaison chez les bactéries

salut, pour les recombinaisons homologues ches les bactéries, elles sont basées sur l'homologie des séquences entre l'ADN exogène et l'ADN de la bactérie receptrice, c'est des régions d'environ 200pb similaire entre les deux ADN, c'est une sorte de reconnaissance, un prérecquis pour la recombinaison et l'introduction d'une molécule d'ADN exogène.  [...] pour les gram + l'ADN exogène passe un des deux brins dans la cellule avec dégradation enzymatique (nucléase) de l'autre brin. l'adn est donc entré dans la cellule sous la forme mononbrin.  [...]

empreinte à la DNase I

Sinon en général a 15 la DNase marche bcp moins bien qu'a 30°c si le complexe et faiblement attaché a l'ADN (donc ne le protege que aprtiellement) alors on aurait eut une différence, si ce n'est pas le cas, ca signifie que le complexe est fortement lié a la DNAse et protege efficacement l'ADN de la degradation.  [...] et d'ailleurs c'est pas plutot le complexe qui est fortement lié à l'ADN et pas la DNase qui est selon moi juste l'enzyme qui assure la dégradation de l'ADN non protégé.  [...]