• Forum - Restriction, Fragments, ADN

[Génétique] Thérapie génique: synthétiser le gène correcteur

Et le nombre et la taille des fragments d'ADN obtenus avec une enzymes de restriction dépendent du nombre de fois où la séquence reconnue par l'enzyme est répétée au sein de la molécule d'ADN. Et donc le choix d'une enzyme de restriction dépend de la taille des fragments que l'on désire.  [...] En bref l'enzyme de restriction va permettre le clivage de l'ADN par rapport au site de restriction. Ensuite les fragments d'ADN sont séparés (ou différenciés) par électrophorèse.  [...]

[Biologie Moléculaire] marqueurs moleculaires

Alors dire polymorphisme RFLP c'est redondant car dans RFLP il ya déjà écrit polymorphisme (Restriction fragment length polymorphism=Polymorphisme de longueur des fragments de restriction).  [...] De l'ADN est coupé en fragments par une enzyme de restriction, cette dernière coupant l'ADN au niveau d'une séquence qui lui est spécifique (site de restriction). Les fragments d'ADN ainsi obtenus, nommés fragments de restriction, sont ensuite séparés selon leur longueur par électrophorèse sur gel d'agarose, on obtient un profil.  [...]

[Génétique] Rflp

3) Un profil de restriction est ce qu'on obtient apres avoir digéré de l'ADN par des enzymes de restriction et l'avoir fait migrer sur gel. On obtient des bandes qui correspondent a des fragments de restriction. pour détecter les différences alléliques par cette méthode, il faut bien sur que la différence cause une modification, une apparition ou une disparition d'un site de restriction.  [...] Le principe est alors de digérer l'ADN, afin d'obtenir des fragments puis de les faire migrer. Si il y a une différence, elle se manifestera par la modification de la longueur d'un fragment, ou bien un fragment supplémentaire, ou bien un en moins, en tout cas une modification du profil de restriction.  [...]

[Microbiologie] enzyme de restriction

qu'elle est le but d'utilisé une enzyme de restriction qui donne des fragments d'ADN de grande taille (afin de réaliser l'electrophorse en champ pulsè ).  [...] La réponse est presque dans la question. Le but d'une électrophorèse en champ pulsé est justement de séparer des molécules d'ADN de haut poids moléculaire, donc plutôt longue. Utiliser des enzymes de restriction reconnaissant peu de sites de coupure va te permettre d'obtenir des fragments d'ADN de grande taille que tu pourras faire migrer pour étudier le génome sur une large étendue.  [...]

Mémoire en génétique : questions diverses

Ces derniers jours, j'étudie les empreintes génétiques, notamment le polymorphisme de l'ADN, les SNP et les séquences répétées en tandem. Je souhaite parler du polymorphisme de longueur des fragments de restriction, mais j'ai beau faire des recherches, je ne comprends absolument pas de quoi il s'agit.  [...] Après de nombreuses recherches, voilà ce que j'ai compris. les enzymes de restriction ont la faculté de couper la molécule d'ADN à des endroits spécifiques. Par exemple, une enzyme va couper entre G et A, c'est le site de restriction. Si on prend deux fragments de molécule d'ADN de deux individus différents.  [...]

[Biologie Moléculaire] Questions relatives à la PCR

Les séquences Alu sont des fragments d'ADN d'environ 300 pb qui sont mobiles dans le génome humain. On y retrouve un site de restriction Alul (d'où leur nom). Certaines personnes possèdent la séquence Alu. d'autres non. L'expérience en question impliquait que plusieurs personnes effectuaient un rincage de leur bouche (pour aller recueillir de l'ADN) avec de l'eau saline et crachait dans un tube qui était ensuite centrifuger.  [...] Les séquences Alu sont des fragments d'ADN d'environ 300 pb qui sont mobiles dans le génome humain. On y retrouve un site de restriction Alul (d'où leur nom). Certaines personnes possèdent la séquence Alu. d'autres non.  [...]

Extraction d'ADN

Notre laboratoire travaille entre autre sur de l'extraction d'ADN issu de valves cardiaques de patients. Nous utilisons pour ca le kit Qiagen (attention, il existe des kits d'extraction d'ARN et d'ADN). Je crois ne pas me tromper en disant qu'il existe plusieurs kit pour l'ADN.  [...] Cet ADN obtenu ainsi est suffisamment pur pour l'analyse de restriction et le clonage des fragments d'ADNmt.  [...]

Carte de restriction ( génétique)

Un ADN est digéré par trois enzymes (EcoRI, PstI, SmaI) afin de réaliser une carte de restriction. Après électrophorèse sur gel d'agarose, les résultats obtenus sont les suivants*(taille des fragments observés).  [...] Déterminer la carte de restriction de cet ADN en expliquant clairement et précisément vos choix. Chacun des trois enzymes utilisés reconnaît une séquence spécifique et distincte des deux autres.  [...]

[Biologie Moléculaire] TP digestion ADN par enzymes de restriction par électrophorèse sur gel d'agarose

J'ai fais une extraction d'ADN puis je l'ai mis en présence d'enzyme de restriction ( c'est le TP basique avec les enzymes BamHI, EcoRI, HindIII) c'est de l'ADN de phage lambda cependant comment savoir si l'ADN a été digéré par élélectrophorèse sur gel d'agarose car j'observe plusieurs fragments mais je comprends pas trop si quelqu'un peut m'éclairer merci infiniment.  [...] Bonjour, merci. Oui bien entendu je sais ce qu'est une enzyme de restriction. Une enzyme de restriction reconnait un site de restriction généralement palindromique sur l'ADN une fois reconnu elle clive. Alors j'utilise un ADN de phage lambda c'est de l'ADN circulaire il me semble mais qu'elle est le rapport avec la migration et oui je sais aussi c'est quoi l'électrophorèse sur gel d'agarose c'est la migration de fragments d'ADN ( dans mon cas) du fait qu'on exerce un champs électrique l'ADN étant chargé négativement va migré du coté positive au niveau de la matrice d'agarose les fragments les plus courts migreront plus vite et plus rapidement mais sa m'aide pas pour l'analyse car on a des bandes linéaire et non pas circulaire.  [...]

[Biologie Moléculaire] plasmide recombinant et ADN ligase

comment recirculariser ton gros fragment pour former un nouveau plasmide. D'un côté tu as une partie du site de restriction AgeI, et de l'autre tu as une partie du site de restriction de EcoRV. Tes bouts sont entiers... (tu n'as pas de sticky ends ) Alors, quelle enzyme catalyse la ligation de deux fragments d'ADN.  [...] Enfin, tu veux que ton fragment se recircularise, c'est à dire que l'un de ses bouts se lie avec son autre bout... Autrement dit, tu veux favoriser une réaction intramoléculaire. Dans quelle condition cela est favorisé Il faut que tu choisisses une concentration optimale en ADN. élevée ou faible.  [...]