• Forum - Résistance, Promoteur, Plasmide

[Biotechnologie] Construction plasmidique

En ce qui concerne mon plasmide, il doit contenir. Un Promoteur, une Origine de Réplication, et des gènes de résistance ou de levé d'auxotrophie selon l'organisme.  [...] Mon cour traite en fait des différents plasmides, et des éléments qui le compose ( promoteur fort ou non, adn polymérase, gène de resistance etc...) ainsi que les transformation génétique chez les levures et bactéries.  [...]

[biologie moléculaire] Numérotation d'un plasmide

Les genes de resistance sont sous le controle de quel type de promoteur tu peux me donner un exemple parceque souvent sur une carte de plasmide le promoteur du gène de resistance n'est pas placé du coup parfois même je me demande comment sa marche.  [...] s'agissant des gènes de résistance, il s'agit souvent du promoteur PGK ou SV40 pour les gènes mammifères. L'ampiciline possède son propre promoteur cloné avec l'ORF.  [...]

[Génétique] vecteur de plasmide

Dans ce cas pour différencier ces bactéries de celles qui ont le plasmide recombinant avec ton insert, on fait ce que l'on appelle le test blanc-bleu. Dans ton plasmide tu as un gène de résistance, un gène lacz avec son promoteur et d'autre partie encore.  [...] Quand tu insères ton ADN tu vas l'inséré au milieu du gène lacZ sous la dépendance de son promoteur. De ce fait en rajoutant du X-gal dans ton milieu (contenant un antibiotique correspondant au gène de résistance) au moment de l'ensemence tu obtiendra 2 types de colonies.  [...]

[Biologie Moléculaire] Promoteurs, gènes et plasmides

dc bien que jai une petite etape de selection dans des cellules bacteriennes (liee au fait que mon plasmide a une resistance AB), mon promoteur doit etre eucaryote.  [...] Apres avoir extrait mes plasmides (qui contiennent X) je les fais rentrer dans les cellules animales par transfection. et je pense que c'est a ce moment la que le promoteur entre en action.  [...]

Insertion d'un promoteur sur un vecteur plasmidique

Je m'interroge quant à savoir la technique qui pourrait être employée afin d'insérer un promoteur viral afin de permettre l'expression d'un gène de résistance dans une cellule eucaryote. Il est clair que sa présence est indispensable, mais comment l'isoler et l'ajouter (sites de restriction).  [...] Il y a beaucoup plus simple. Tu choisis un plamside qui possède déjà le promoteur. les catalogues des fournisseurs sont remplis de plasmides avec le promoteur de ton choix, le gène de résistance, les terminateurs, etc... Toutes les combinaisons sont possibles.  [...]

[Biologie Moléculaire] Séquence du promoteur du gène résistance à l'ampicilline

Ton gène est sous la dépendance de quel promoteur Son propre promoteur (P bla ) Si tu regardes la séquence de ton plasmide, tu risques d'y troruver quelques infos utiles.  [...] Vous avez la séquence du plasmide. J'imagine que sur la carte vous devez avoir les limites de votre cassette ampi (promoteur et séquence codante). Y a qu'a compter pour trouver la séquence de votre promoteur sur votre plasmide.  [...]

[Biotechnologie] Plasmide recombinant

4) Tous les plasmides possèdent donc un promoteur, une séquence de terminaison ainsi q'une séquence de liaison au ribosomes, un codon START et STOP pour chaque gène (même pour les gènes de résistance).  [...] 7) Lors de l'utilisation d'agrobacterium tuméfaciens, on crée un plasmide contenant un gène de résistance pour E.Coli et pour la plante, une origine de réplication E.Coli, une origine pour Agrobacterium, et puis deux séquence front gauche et front droit dans lequel on retrouve le gène d'intérêt ainsi qu'un gène de sélection pour la plante.  [...]

[Biologie Moléculaire] Amplification et purification de plasmide

Il y a forcément un promoteur procaryote puisque le gène de résistance à l'antibio est exprimé mais je ne sais pas si il peut permettre aussi l'expression de la GFP.  [...] Pour ce qui est de la GFP je me disais juste que si mes bactéries sont vertes c'est qu'elles ont bien intégré le plasmide mais vu qu'elles poussent en présence d'antibio c'est que c'est bon. Comme elles ne sont pas vertes je pense que c'est juste qu'il n'y a pas de promoteur procaryote pour la GFP dans mon plasmide.  [...]

[Biologie Moléculaire] Deux questions d'annales PCEM1

Pour cela, vous devez isoler une région spécifique du long transcrit que vous allez pouvoir insérer en anti sens dans un plasmide afin de produire votre ARN anti sens.  [...] Il vous faut l'insérer en sens inverse par rapport au promoteur, il vous faut donc un plasmide. promoteur-BamH1-Pst1. C'est le plasmide P1.  [...]

[Biochimie] pBluescript II KS

Bonjour, j'aimerais savoir que signifie le KS à la fin de PBluescript II KS.   [...] Le plasmide KS a le site de restriction pour KpnI proche du promoteur LacZ alors que le plasmide SK a le site pour SacI proche du promoteur.  [...]