• Forum - Réplication, ADN, Manipulation

[Génétique] le mécanisme de "compétition" entre l'allèle récessif et l'allèle dominant.

quels sont les enzymes qui entre dans l'expression génétique depuis l'ouverture de la double hélice adnale jusqu'à la création, de la protéine.   [...] une autre question, peut on faire in vitro une réplication de l'ADN si oui un lien qui explique comment de A à Z avec la manipulation de l'appareillage et tout.  [...]

[Biotechnologie] miniprep par lyse alcaline

qq'un peu me donner qqes conseils pour raffiner un peu ma manipulation. on me dit que j'agresse un peu mon ADN.  [...] je demande à ce qu'on me donne des conseils pour affiner ma manipulation.. j'utilise une miniprep maison par lyse alcaline. le protocole est optimisé au sein de l'unité de recherche où j'effectue mon projet. Mais j'arrive pas à obtenir de bons résultats.. j'ai toujours de bandes d'ADN génomique.  [...]

[Divers] Contenu "Matériels et méthodes" - rapport stage M1

J'ai mis mes oligos dans un tableau avec les séquences et commentaires pour dire quel oligo apporte quoi dans l'histoire et j'ai fait un schéma où je les positionne sur les gènes. Le truc est que j'avais séparé mon M&M en 3. Souches bactériennes, plasmides, milieux de culture, Manipulation de l'ADN (tout ce qui est PCR), Construction des plasmides recombinants et je pensais ajouter une 4e partie Séquençage, mais là quand j'y pense, ça me paraît plus logique de le mettre dans Manipulation de l'ADN.  [...] Mais je suis en train de virer des trucs qui font un peu cahier de labo et de remettre des explications plus détaillées sur le crible utilisé par exemple etc. ce que je faisais de manière très succinte avant.   [...]

applications de la PCR

Mais en provoquer, non je ne vois pas. Etant donné que la PCR sert à amplifier un fragment d'ADN, il s'agit simplement d'obtenir à la fin une quantité beaucoup plus grande de l'ADN initial, donc par définition (et en dehors des amplifications parasites et des contaminations), on aura exactement le même ADN qu'au départ.  [...] En faisant allusion à ton premier post, ces techniques de mutagénèse dirigée n'ont pas d'application directe dans le domaine de la santé. Par contre c'est très utilisé en recherche (entre autres pour étudier la fonction de gènes en les mutant...).   [...]

[Biologie Moléculaire] Problème de PCR

Après il est aussi possible que les contaminations observées ne proviennent pas d'un des réactifs mais simplement du fait de la manipulation de l'ADN a proximité du contrôle négatif. Ca peut expliquer pourquoi dans une PCR sans ADN tout soit blanc.  [...] Donc pour que tu vois tes amorces, faut que t'en aies beaucoup. Même beaucoup trop. Ca peut aussi expliquer tes problèmes d'amplification si les amorces ont été mal designées, ou pas faites en ce sens. Il se peut qu'il y ait des dimérisations, cad qu'elles s'hybrident entre elles.   [...]

rats KO

J'ai trouvé ca sur internet en faisant une recherche rapide, ca à l'air d'être un article de vulgarisation, donc à prendre avec des pincettes, mais les faits sont là quand même ^^.   [...] Non pas forcément. Un transgène est un fragment d'ADN que tu insères dans une cellule mais l'ADN en question peut très bien être la copie d'un gène endogène à l'espèce transfectée.  [...]

[Microbiologie] Microorganismes comme modèles expérimentaux

Ben pour les bactéries, l'avantage c'est qu'elles se multiplient rapidement, elles on un ADN unique et circulaire ce qui permet de faciliter l'insertion d'un gène d'intérêt biologique pas exemple.  [...] Pour les levures, elles possèdent une organisation génétique et des stratégies de régulation typique des eucaryotes pour étudier la réplication chez les eucaryotes, tout en possédant également une facilité de manipulation et une vitesse de croissance rapide.  [...]

[Biologie Moléculaire] Mesure de pureté d'une préparation d'ADN aberrante?

L'ADN est issu d'un broyat de foie de rat, il a été purifié par une exctraction phénolique, une précipitation dans de l'éthanol absolu et une resolubilisation dans un tampon d'élution TrisHCL 10mM + EDTA 1 mM à pH 8.  [...] C'est le premier TP où on prépare nous même de l'ADN, d'habitude il nous est donné tout prêt, donc une mauvaise manipulation est plus que probable en effet.  [...]

[Biologie végétale] Expériences

J'ai juste parcouru le site, beaucoup sont des formulations de ce que j'ai décrit plus haut mais tu as quelques nouveautés qui peuvent t'intéresser.   [...] Il me vient à l'idée une autre manipulation simple et réalisable chez toi, c'est l'extraction de l'ADN d'une plante avec du sel et du liquide vaisselle.  [...]

[Microbiologie] extraction d'ADN

j'ai fait l'extraction d'ADN au phénol chloroforme je me suis rendue compte à la fin de la manipulation que le culot est chargé également en protéines pourrais je me rattraper.  [...] et pr la SDS page c est une electrophorese qui fait denaturer tn adn. c est un long mecanisme mais facile a appliquer, l essetiel c est qur tn adn denaturé va migrer et pour la revelation t utulise le.bleu de comassie, et dans un des puits tu dois aussi mettre des marqueurs de taille finilamnt t recupere tn gel et tu verifie tes bandes. j espere que je ne me trompe pas.  [...]