• Forum - Rendement, Bonne qualité, ADN

Extraction d'ADN bactéries lactiques

Je cherche un bon protocole d'extraction de l'ADN total des bactéries lactiques. je voudrais savoir aussi par quelle technique obtient-on un bon rendement et une bonne qualité d'ADN.  [...] l'ancien protocole (lyse enzymatique) me semble très long, mais est il efficace ou l'utilisation des kits est meilleure.   [...]

[Divers] L'extraction d'ADN

Petite précision supplémentaire. les extractions réalisées à partir de traces ont toujours un plus faible rendement. En cause. la faible quantité d'ADN et une plus ou moins bonne qualité (dégradation, mélanges, inhibiteurs de PCR, etc).  [...] Cette méthode est également employée pour les tests de paternité où les allèles de l'enfant et de la mère sont comparés avec celui du père présumé. Après analyse on conclu d'une probabilité x% que le père soit bien celui de l'enfant.   [...]

[Biochimie] TPE sur l'ADN

- l'extraction totale d'ADN. C'est celle que l'on effectue, par exemple, sur des prélèvements de sang ou des cellules de l'épithélium buccal).  [...] Je rajoute une petite précision sur ces extractions. elles sont souvent réalisées à partir de traces et ont donc un plus faible rendement. En cause. la faible quantité d'ADN et une plus ou moins bonne qualité (dégradation, mélanges, inhibiteurs de PCR, etc).  [...]

[Biologie Moléculaire] casse tête extraction ARN

A l'experion (High Sens) les tubes a 1000 ont l'air de meilleur qualité, les 500 on a électrophoregramme quasi plat...et des pics 18S et 25S quasi plat (le gel virtuel donne un smear).  [...] Alors l'an passé, on faisait 3 x 500 cellules dans lequel on mettait dans chaque tube 50 uL de tampon RLT et on poolait les 3. On ne broyait pas, et le rendement était correct (dans mes souvenirs entre 10 et 20 ng/uL pour 14 uL récupérer au final) mais avec le kit RNeasy micro (pas le RNeasy micro plus). Bonne qualité.  [...]

[Biologie Moléculaire] Qiagen RNeasy trizol

Je confirme, en ce qui me concerne l'extraction au Trizol a toujours fonctionné même en changeant de tissus (j'ai travaillé sur des tissus d'animaux, plantes et champignons...) sachant que j'avais pas recours à des kit et j'arrive à visualiser des RNA nickels.   [...] Ceci dit, avec le trizol, on peut aussi avoir de bon qualité en purifiant les RNA sur colonne après extraction par le trizol (si la propreté n'est pas suffisante).  [...]

[Biologie Moléculaire] Précipitation d'ADN linéaire

J'ai effectué une précipitation d'ADN linéaire et malgré mon application, mon rendement était de seulement 38%. Je voudrais simplement avoir des raisons plausibles qui pourraient expliquer un mauvais rendement, autre que des erreurs de manipulation basiques.  [...] Je manque un peu de détails pour faire un diagnostic mais en général les problèmes de rendement d'un précipitation d'ADN sont dus à deux facteurs.  [...]

la bonne Température d'anneling, PCR microsatellites

- pour une PCR avec Ta. Tm, les amorces lorsqu'elles se fixent (car Température où il y a + de brins qui tendent à être monocaténaires que bicaténaires), s'hybrident avec + de spécificité, en particulier avec leur site spécifique de fixation de l'ADN-. du coup, plus de spécificité mais moins de rendement.  [...] donc moins de rendement pour une PCR à Ta=56°C mais au moins, la bonne bande amplifiée, et de l'amplif non spé à Ta=52°C même si le rendement est pas trop mal.  [...]

extraction phénol chloroforme

Les méthodes manuelles prennent du temps, on généralement un bon rendement, la qualité est celle que l'on souhaite en fonction des étapes que l'on met en oeuvre, entierement configurables, peu honéreuses, la fiabilité et l'efficacité peuvent dépendre de l'expérimentateur (feeling).  [...] Personnellement pour mes minipreps j'utilise le kit wizard+ qui marche tres bien et me donne un ADN de qualité sufisante pour faire du sequençage automatique derriere. Le prix est d'environ 1euro par miniprep ce qui n'est pas si cher que ca.  [...]

[Biologie Moléculaire] Calcul de rendement

Bonjour. Voilà en ce moment je réalise des TP de biomoléculaire. On me demande de réaliser un calcul de rendement de purification des fragments obtenus lors d'une digestion. pCR-GAI digéré avec BamH1 et Hind III, 2 sites de restriction pour chaque enzyme.  [...] On obtient 4 fragments, on désire obtenir un fragment de 704 pb (la moitié 5' du gène), qu'on liera sur un autre plasmide pSK lui aussi coupé par ces deux enzymes (pour avoir les bonnes extrémités). Ce plasmide pCR fait 5484 pb.  [...]

Je veux grossir !!!

Faux. manger beaucoup le soir ne fera pas forcément grossir, cela peut même empêcher une bonne qualité de sommeil. Hormis cela, manger trop n'amène pas forcément à grossir chez tous les sujets. on peut développer des crises de foie, un tégument (peau et cheveux) plus gras, du cholestérol.  [...] manger beaucoup le soir ne fera pas forcément grossir, cela peut même empêcher une bonne qualité de sommeil. Hormis cela, manger trop n'amène pas forcément à grossir chez tous les sujets. on peut développer des crises de foie moi j'ai dis ça pour nos lecteur français, la preuve que vous avez bien tout lu.  [...]