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[Biochimie] Dtt

Bonjour, à quoi sert le DTT lorsqu'on mesure l'activité d'une réaction enzymatique.   [...] Ce que je connais du DTT c'est qu'il permet de stabiliser les protéines possédantes des groupements soufrés, son pouvoir réducteur sur les thiols en fait un réactif très utilisé en biochimie pour empêcher l'oxydation des cystéines dans les protéines.  [...]

Devinettes biologiques

Pour recombiner in vitro l'une des composantes essentielles des gens qui ont pour but l'info hereditaire ceci pour pratiquer le genie genetique,on utilise une histone dont la fonction depend de la structure et qui agit dans des conditions compatibles avec la vie.   [...] L'autre origine donne du vinaigre si l'ethanol est abandonnée à l'air.Enfin cet energie peut se regenerer de 3 manières différntes dont l'une utilise la phosphocreatine dont le biocatalyseur est la creatine kinase.   [...]

[Biochimie] Du DTT dans mon buffer de RT-PCR

Dans la cellule eucaryote, l'environnement est plutôt réducteur à cause du glutathion. Pour la formation de ponts disulfures spontanés, il faut être dans des conditions oxydantes. Donc les protéines nécessitant des ponts disulfures pour leur structuration passent par la voie sécrétoire où elles rencontrent dans le RE une enzyme catalysant la formation de ces ponts (je ne me rappelle plus son nom mais c'est assez facile à trouver ).  [...] Wow. Effectivement, la RT qu'on utilise est tirée des retrovirus qui font pratiquement tout dans le milieu cytosolique réducteur de la cellule. Il semble normal que les protéines utilisées par le virus ne peuvent pas avoir de pont disulfure... et donc que le DTT ne l'affectera pas.  [...]

[Biologie Cellulaire] Protéines et liaisons convalentes entre 2 résidus soufrés

Ce QCM porte sur une partie d'un livre qui parle de la conformation des protéines et rapidement de la protéine Prion. or, il n'est inscrit nulle part dans cette partie du livre que les protéines -ou que la protéine Prion- est stabilisée par des liaisons covalentes entre résidus soufrés.  [...] b. et c. Je ne connais rien au Prion mais n'importe quelle protéine peut, potentiellement, posséder des ponts disulfure du moment qu'elle possède des résidus cystéine sur sa séquence. Des protéines autres que le Prion en ont.  [...]

[Biologie Moléculaire] protocole pour rendre des levures compétentes

Par exemple, je sais que le DTT est un agent réducteur et qu'il permet de réduire les ponts disulfure dans les protéines. Mais je ne comprends pas son rôle pour rendre des levures compétentes.  [...] Le sorbitol n'est pas fermentescible par les levures, mais il a un grand pouvoir de fixation pour l'eau. Je suppose qu'on veut éviter une dessiccation cellulaire par fuite des ions lors de l'électroporation. Le sorbitol diffuse peut-être au sein de la levure via les canaux protéiques dénaturés, à moins qu'il ne s'agisse d'inactiver un transporteur d'élimination du sorbitol intracellulaire.  [...]

[Biochimie] Problème de migration de gel

Les pistes 1 à 3 sont des protéines de type salino solubles du blé sans réducteur ni alkylant, les pistes 4 à 6 sont les mêmes protéines réduites et alkkylées.  [...] Il aurait été intéressant de tester la réduction sans l'alkylation sur les protéines salino solubles, afin de savoir si la différence observée entre les pistes 1/3 et 4/6 est due à l'alkylation ou à la réduction. En me basant sur les gliadines de blé je dirai que c'est simplement la réduction.  [...]

[Biotechnologie] [sels] dans un tampon

En chromato d'affinite au metal comme cobalt ou nickel avec TAG histidine, le sel n'influe pas sur la fixation TAG. -. resine, en revanche cela permet de limiter les fixations non specifiques de tes proteines (dues au charges).  [...] Le TCEP est un agent reducteur tout comme le DTT, suivant le pH de tes tampons l'un est preferable a l'autre. Mais les deux sont la pour eviter l'oxidation de tes proteines (notamment des cysteines).  [...]

[Biochimie] Electrophorèse SDS page

En ce qui concerne le matériel, il est neuf, les gels sont achetés coulés.P, j'ai fais des tests avec différents paramètres de migration plus ou moins lents. pas de changements, et j'ai déposé plusieurs concentrations de protéines pour effectuer mes réglages.  [...] Pour les bandes en haut. on s'accorde à dire que ça serait dû à un manque de dénaturation des protéines. tu peux donc augmenter le pouvoir réducteur de ton tampon de charge (augmenter alors la quantité de b-mercapto ou de DTT) et chauffer plus longtemps.  [...]

Acides aminés

Après t'as les deux acides aminés soufrés classiques. la méthionine et la cystéine. La cystéine est très connue pour faire les ponts disulfures au sein des protéines grâce à l'oxydation, entre deux SH. Comme le milieu intracellulaire est réducteur ça se fait à l'extérieur de la cellule.  [...] Et enfin la distinction acides aminés apolaires/polaires. il suffit de regarder la chaine carbonée et s'il y a présence de fonctions OH pour faire des liaisons hydrogène avec l'eau.   [...]

[Biochimie] Caractère réducteur des disaccharides

et la fonction pseudoaldehydique (OH du C1 cyclisé) qui est, si non engagé dans une liaison osidique, responsable du pouvoir reducteur de ton diholoside par exemple.  [...] Je ne pense pas confondre et cette phrase concernant le saccharose et le tréhalose est bien dans mon cours mais je pense que la solution est bien dans cette fonction pseudo aldéhydique qui n'apparaît nul part dans mon poly. Pourquoi dit on que ce OH est pseudo aldéhydique et pourquoi est il réducteur par rapport aux autres OH (position).  [...]