• Forum - Récolte, Plasmide, Longueur, ADN

extraction de gel

Le concept est tres simple dans ton tube ou tu récolte ton plasmide il peut y avoir plusieurs longueur d'ADN (ton plasmide avec insert, mais pourquoi pas ton plasmide vide, ou autre...) ducoup tu dois séléctionner uniquement ce qui t'interesse, tu les sépare donc par electrophorèse sur gel, et ensuite puisque tu visualise ou se trouve ton ADN sur ton gel, il suffit d'extraire (physiquement, avec une lame de rasoir par exemple)le petit carré ou se trouve la bande d'ADN qui t'interesse, ensuite le gel va etre fondu et purifié afin de retirer l'agarose et ne récupérer que l'ADN.  [...] oui j ai lu le protocole du kit et tout mais se que je veux savoir c est l utilite de re extraire le plasmide sur gel comme on la extre et digere deja.  [...]

[Biotechnologie] Problèmes sur les notions/calculs de plasmide

Un chercheur dispose d'un vecteur de clonage, le plasmide pLLAGRE, dont il cherhe à déterminer la carte. Pour ce faire, il réalise des digestions à l'aide des enzymes de restriction Hind3 et BsP1 et obtient les fragments suivants.  [...] Il choisit de faire pousser un certain nombre de colonoes bactériennes sélectionnées afin d'amplifier son plasmide et ainsi disposer d'une grosse quantité de son insert NIACUSE pour le séquencer et vérifier son intégrité. Il récolte les plasmides après lyse alcaline des bactéries et extraction de l'ADN au phénol/chloroforme.  [...]

[Biologie Cellulaire] transfection

Classiquement, les mini sont purifiés à l'aide de billes, qui vont retenir les charges négatives de l'ADN plasmidique. Cependant, cette purification est loin d'être parfaite, et il restera probablement des protéines, dont du LPS (à petite dos, ça va pour les cellules, à haute, cela induit un stress =.  [...] pas top). De plus, le plasmide n'est généralement pas très concentré. enfin, tu peux vérifier tout ces paramètres en dosant au nanodrop (ou lecture de l'absorbance dans l'UV et proche UV) avec le rapport 260/280 (protéine/ADN).  [...]

Un os ; mais de quoi?

mon impression est que c'est un fémur humain. Le morceau que tu as récolté mesure un peu plus de 30cm, mettons que complet il mesurerait 35cm. Cette longueur exclut le chien, les ovins et caprins. Il reste. l'homme, le cheval et l'âne, le boeuf et les grands cervidés.  [...] Mais seul l'homme a un fémur aussi fin ( gracile comme on dit). Si tu regardes un fémur de boeuf, il a à peu près la même longueur mais est quatre à cinq fois plus large. Idem pour le cheval. Je m'y connais moins en cervidés mais je pense que c'est plus court et plus large, sauf peut-être l'élan mais bon, un élan en Bretagne.  [...]

[Biologie végétale] Extraction de l'ADN d'un mélange de plantules

[Biologie végétale] Extraction de l'ADN d'un mélange de plantules.  [...] On fait un mélange de graines préparées à partir de 50 plantes. On les sème et on récolte les plantules avant d'extraire l'ADN du mélange.  [...]

[Génétique] Fiabilité d'un test ADN pour trouver ses origines ?

Ainsi, il ne faut surtout pas prendre les pourcentages au pied de la lettre. La phrase récurrente dans les videos youtube lorsque la personne découvre ses résultats c'est. Je suis... La faute à ces labos qui sous-entendent que leur technique est la meilleure.   [...] je résume. un violeur en série américain dont l'ADN avait été récolté a été identifié par la police grâce à l'exploitation des bases de données d'une de ces sociétés de séquençage du génome. Le violeur en question n'avait pas lui-même fait séquencer son génome mais on a trouvé des proches parents et ensuite l'enquête a permis de l'identifier.  [...]

[Biologie Moléculaire] Maxi-prep avec rendement très faible

Je viens à vous car depuis pas mal de temps je suis confronté à un problème assez embêtant. il se trouve que de nombreuses maxi-prep que j'effectue ont un rendement très faible (masse finale de 40ug). J'ai pu remarquer que je n'obtiens ces rendements que pour des bactéries possédant le plasmide pCDNA3 (indépendemment de l'insert).  [...] Je m'auo réponds. en fait mon plasmide possède une origine de réplication pbr322 en faisant un plasmide a faible copie dans chaque bactérie. donc je dois suivre les protocoles pour les plasmides low copy, ce que je ne faisais pas.  [...]

O = donneur universel ???

Il s'agit simplement d'antigène de surface reconnu comme étant soi ou non soi par le système immunitaire. Dans le cas de l'antigène O des hématies, il s'agit en réalité d'une absence d'antigène (on n'a que le présentoir). De fait, en dehors du facteur rhésus (un marqueur du plasma sanguin) pouvant incidemment se déposer à la surface de la cellule, l'hématie arbore à l'extérieur de sa membrane des sortes de drapeaux ou antigènes pour se signaler aux cellules immunitaires comme étant du soi.  [...] J'oubliais une donnée importante. lors d'un don du sang, on récolte du sang entier. Ce dernier va ensuite subir divers séparations-épuration plasma, plaquettes, globules blancs, hématies.  [...]

[Biologie Moléculaire] Comparaison génome procaryote-eucaryote

Ce que tu peux dire concernant les plasmides, c'est que ce sont des entités autoréplicatifs (possèdent une ORI), qu'ils portent souvent des gènes de résistances à des antibiotiques (et à des métaux lourds, si je ne m'abuse) et qu'ils sont une particularité du monde bactérien (le seul Eucaryote qui en a c'est S. cerevisiae et elle a le plasmide 2µ).  [...] - Pour les plasmides je suis tout à faire d'accord avec ce que tu as marqué, j'avais d'ailleurs récolté quelques informations à ce sujet. Il existe en effet, des plasmides R (de résistance comme tu l'as dis), F (conjuguatifs), métaboliques, virulents,  [...]

Sélectionner 1 embryon par diagnostic génétique préimplantatoire est-ce de l’eugénism - Page 4

La parent pour une récolte F1 ne peut exister dans une maladie récessive vue quel est composé du produit de deux parties Homozygotes. Une maladie récessive ne doit sans doute aucunement par ses gènes être homozygote. La maladie récessive, fait devenir le produit homogène, hétérogène.  [...] Reste que la formulation est pour le moins malheureuse. Pensez vous réellement que je n'ai pas cherché à partager mes connaissances Depuis combien de semaines discutons nous Connaissez vous beaucoup d'endroit où des personnes ayant étudié médecine et biologie pendant de longues années acceptent de vous consacrer autant de temps J'ai peut être passé plus de temps avec vous seul qu'avec mes étudiants dont je m'apprête à corriger les copies.  [...]