• Forum - Récepteurs, Membrane plasmique, Primaires

appareil de golgi, lysosome

Pour résumer, les lysosomes primaires sont de petites vésicules acidifiées par une pompe à protons et qui contient de quoi dégrader à peu près n'importe quoi. Les lysosomes primaires fusionnent petit à petit avec les endosomes récemment endocytés. Les molécules contenues dans les endosomes sont alors détruites et certaines sont recyclées (certains récepteurs membranaires par exemple).  [...] les endosomes possedent des hydrolaxes qui fonctionnent a ph acide qui est generé grace a une pompe a protons ce qui va detacher les ligans des recepeturs.. les recepteurs seront reenvoyes a la membrane plasmique et les ligands vers les lysosomes primaires.  [...]

[Biologie Cellulaire] lysosomes et membrane

A ma connaissance, le recyclage de récepteurs membranaires se fait au niveau de l'endosome précoce mais je ne connais pas le système de désolidarisation du ligand avec son récepteur. A partir du moment où le lysosome fusionne avec l'endosome, je donne peu de chance à un récepteur pour être encore fonctionnel avec l'action du pH et des hydrolases.  [...] les lysosomes primaires sont de petites vésicules acidifiées par une pompe à protons et qui contient de quoi dégrader à peu près n'importe quoi. Les lysosomes primaires fusionnent petit à petit avec les endosomes récemment endocytés. Les molécules contenues dans les endosomes sont alors détruites et certaines sont recyclées (certains récepteurs membranaires par exemple).  [...]

[Biologie Moléculaire] Western Blot avec membrane PVDF

Je transférais mes protéines sur une membrane de nitrocellulose (transfert semi-sec avec Trans Blot Turbo System de Bio-rad) mais j'ai testé depuis peu la membrane de PVDF (même méthode de transfert). J'ai incubé mes membranes avec plusieurs anticorps primaires (toujours les même anticorps et 1 anticorps primaire/membrane).  [...] Etant dans l'incapacité d'utiliser à nouveau des membranes de nitrocellulose pour le moment, est ce que ce signal aspécifique peut provenir de la membrane de PVDF.  [...]

[Divers] Follicules

- la zone pellucide apparait au stade des follicules primaires ( diamètre de 60 à 80 microns).Une membrane hyaline fine qui entour l'ovocyte 1,qui a augmenté de diamètre.On distingue aussi une couche de cellules cubiques et la membrane de Slavjanski.  [...] Oui okay merci c'est a peu prés ce que j'avais par contre pour la membrane de slavjanski pour moi ce serait plutôt au stade de follicule II.  [...]

[Biologie Cellulaire] récepteur FSH

A chaque cycle, une 20taine de follicules primordiaux se développent pour devenir des follicules primaires. Puis les follicules se développent en follicules pré-antraux avec l'apparition de la granulosa. Au niveau de la granulosa apparait des récepteurs à la FSH(et oestradiol).  [...] Je suis comme toi car je ne comprends pas comment les follicules sont recrutés s'ils ne dépendent pas des hormones hypophysaires. Je n'ai rien trouvé dans les livres concernant cette question, mais peut-être que d'autres hormones interviennent (mais lesquelles ) ou que des molécules (tels que des facteurs de croissance) les stimulent.   [...]

[Divers] Contenu "Matériels et méthodes" - rapport stage M1

Les extraits protéiques sont dénaturés à 95°C pendant 5 minutes en présence de LSB 1X final avant d'être déposés sur un gel de polyacrylamide dénaturant à 6%. Les immunoprécipitations sont dénaturées à 95°C pendant 5 minutes dans 25 µl de LSB 2,5X. Après migration électrophorétique, les protéines sont transférées en milieu liquide sur une membrane de nitrocellulose (HybondTM C Extra, Amersham Bioscience) pendant 1h30 dans un tampon de transfert (50 mM Tris base, 40 mM Glycine, 1,3 mM SDS et 10% éthanol).  [...] Après transfert, la membrane est bloquée dans une solution de lait 5% TBS-Tween 0,2% pendant 1 heure à température ambiante sous agitation. Elle est ensuite incubée avec les anticorps primaires anti-BRCA1 monoclonal (D9) dilué au 1/500 (Sigma®), anti-HSP60 monoclonal (CK) au 1/1000 (Sigma®) pendant une nuit à 4°C sur une plaque rotative.  [...]

[Biologie Cellulaire] Fécondation

- pourquoi à la puberté il y a reprise de la méiose chez les ovocytes La mise en place du système LH/FSH ne peut pas agir sur les follicules primaires étant donnés qu'ils n'ont pas encore de récepteurs à la FSH et LH (ils ne peuvent donc pas être stimulés par ces hormones et produire de la progestérone nécessaire à la reprise de la meiose chez l'ovocyte).  [...] - Lors de la fécondation, la membrane de l'ovocyte se modifie de sorte qu'il ne puisse plus y avoir d'autres spermatozoïdes qui entre. Mais quel genre de modification la membrane plasmique de l'ovule subit-elle Je sais qu'il y a modification de la zone pellucide, mais il est possible que d'autres spermatozoïdes aient pénétré la zone pellucide, donc la membrane plasmique de l'ovule doit elle aussi être imperméables aux spermatozoïdes.  [...]

[Microbiologie] western blotting

j'ai fait migrer mes protéines par sds page en puits confondus, sur le gel les bandes sont nettes, en faisant le transfert sur membrane de nitrocellulose et après révélation par le 4 chloro1 naphtol je n'ai pas obtenu des bandes pourquoi à votre avis sachant que le transfert s'est bien passé j'ai dilué les anticorps primaires 1/100 et les anticorps secondaires 1/2000 je doute par rapport au titre des anticorps que j'ai utilisé sachant qu'ils proviennent des patients atteints de Mycoplasma pneumoniae qu'est ce que je dois faire.  [...] Le rouge ponceau est aussi pratique pour vérifier qu'il y a bien des protéines sur la membrane, les étapes de blocages peuvent parfois etre problématiques. J'ai parfois observé qu'un blocage plus court améliorait les signaux.  [...]

[Biologie Moléculaire] Transfection Huv-ec-c

Cela fait 4 semaines que je tente désespérément de transfecter des cellules Huv-ec-c (provenant d'ATCC, pas des cultures primaires) avec un plasmide pEGFP-N3 dans lequel est inseré l'ADNc codant pour ma protéine d'intérêt (et j'ai vérifié qu'il y était).  [...] De manière moins idiote, on peut aussi se dire que la transfection est OK mais que le plasmide n'exprime pas la GFP pour diverses raisons (exemple. La protéine de fusion modifie la conformation de la GFP et l'empeche de fluorescer...).  [...]

Gestes qui sauvent en milieu scolaire

Je suis membre d'une association de parents d'élèves, et nous souhaiterions organiser une formation aux gestes qui sauvent dans les deux écoles maternelles et les deux écoles primaires de notre commune.  [...] Enfin, sachez que les enseignants peuvent aussi mettre en place des initiations et vous recommande notamment la lecture de cet article. http.//www.secourisme-pratique.com/p...oles/index.htm.   [...]