• Forum - Questions, Extraction, ARN

[Biologie Moléculaire] Extraction des ARN

J'ai quelques questions concernant l'extraction des ARN par le TRIzol® LS Reagent.  [...] 3/ Est ce que je peut garder un volume sanguin (ou plutôt la fraction sérique) pour autre utilisation ultérieure ELISA par exemple et quelles sont les bonnes conditions de conservation.   [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction des ARN par la méthode phénol/chloroforme

j'aurais une petite question au sujet de l'extraction des ARN totaux par la méthode au phénol chloroforme.  [...] Le seul rôle que je connais pour le chlorure de césium, c'est la centrifugation par gradient mais ce n'est pas une obligation pour une phénol / chlo.   [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction des acides nucléiques

J'ai un petit problème en TP de biologie moléculaire, c'est lors de l'extraction de l'ADN et de l'ARN. Mes questions.  [...] 2-pourquoi on utilise ph basique lors des extraction des acides nucléiques.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction faible qté ARN

Salut. j'utilise habituelement l'extraction phenol/chlorophorme et glycogene pour extraire les arn des mes cultures cellulaires.. et le rendement est amliore, pas de facon faramiseuse, mais il y a une difference qui justifie l'achat.  [...] Je n'ai jamais eu de problèmes de contamination de phénol donc je ne peux malheureusement t'aider sur ce point. Peut-être le mieux serait d'utiliser les colonnes conçues pour les extractions d'ARN Dispendieuses, mais propres.  [...]

[Biochimie] Problème Extraction ARN totaux méthode Trizol-Chloroforme

Je viens de terminer pour la 6ème fois mon extraction d'ARN totaux à partir de cerveaux de souris par la méthode du Trizol puis Chloroforme et j'ai toujours le même problème. Au final, j'ai une très faible concentration d'ARN (de l'ordre de 200ng/µL).  [...] ca doit être le rendement total. je te jure que 200ng/µL c'est deja suffisant pour pas mal d'applications. Sur du foie j'ai entre 400 et 1000, j'ai une collègue qui fait ça sur du cerveau je lui demanderai.   [...]

[Biochimie] L'acétone à froid dans l'extraction de l'ARN

après avoir cherché à plusieurs reprises sur internet, je n'ai pas réussi à trouver le rôle de l'acétone à froid dans l'extraction de l'ARN.  [...] On me l'avait expliqué comme étant une étape de purification, toutes les molécules qui pouvaient se fixer sur l'acide nucléique ne pouvait le faire dans l'acétone. Sur le moment, j'avais pris ça pour argent comptant, mais maintenant, c'est vrai que c'est intéressant comme réflexion.   [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction de l'ARN+ RT-PCR

Les rendements sont tres bons et la purete parfaite (pour de l'extraction de l'ARN bacterien).  [...] Jusqu'à maintenant, j'ai pu testé l'extraction d'ARN (à partir de cellules humaines) avec les kits.  [...]

[Biologie Moléculaire] Conservation ARN

Après une panne de congélateur nous nous sommes posés la question de la température de conservation des ARN après extraction.  [...] La conservation d'ARN après extraction est possible à la température -20°C en une semaine en utilisant la RNA Later fournie par SIGMA.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction ARN Lignée cellulaire et Bactérie

J'aimerai profiter de votre savoir vis à vis de l'extraction d'ARNm dans le cas suivant. Je vais mettre en culture des bactéries (lactique) sur des cellules (HT-29) pendant quelque. En fin de cinétique j'aimerai pouvoir isoler l'ARN Bactérien ainsi que l'ARN eucaryotes.  [...] J'ai regardé un peu ce qui se fait et bien souvent, il s'agit d'une extraction ARN classique qui inclue les deux ARN. J'ai également remarqué qu'il était aussi possible d'éliminer 90% de l'ARN eucaryotes avec un système de colonne mais là j'avoue que j'ai peur du prix (je me trompe peu être). Enfin bref qu'es qui vous semblent le mieux.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction d'ARN de plantes

Je vais tester dans mon laboratoire une nouvelle méthode d'extraction d'ARN à partir de graminées (poacées pour les gens modernes), en utilisant du Ribozol™ (AMRESCO).  [...] Je te conseille systématiquement de passer par des kit adaptés aux plantes ou des protocoles modifiés. Tu peux risquer bien entendu mais le problème est que la concentration en sucre des échantillons est très importante et parasite les réactions, généralement c'est la cause de mauvais rendements.   [...]