• Forum - Question, Bactérie, Plasmide

[Biotechnologie] La mort collopérative

Bref, ma question concerne les OGM et plus particulièrement la première méthode d'insertion d'un plasmide dans une cellule végétale grâce à la bactérie Agrobacterium tumefaciens.  [...] En résumé, les scientifiques dans les années 90 ont réussi à insérer un gène de résistance aux herbicides dans le soja grâce à la bactérie citée plus haut. Cependant, il fallait trier les cellules génétiquement modifiées, car elles n'avait pas toutes accepté le gène de résistance au roundup.  [...]

[Biologie Moléculaire] Vecteur d'expression

Je suis nouveau ici et j'ai déjà une question à vous poser concernant les vecteurs d'expression. Ma question est pour quelle raison on introduit un gène(lacI) codant pour l'enzyme répresseur au niveau du plasmide alors que ce gène est déjà présent au niveau du chromosome de la bactérie.  [...] Du coup, le gène est placé en aval d'un promoteur inductible. Ici, c'est le promoteur de l'opéron lactose qui est exploité. En présence de glucose, le gène transfecté ne sera pas exprimé par tes bactéries car lacI réprimera la transcription.  [...]

[Biologie Moléculaire] Identification d'un gène déterminé

Donc si je reformule ma question je veux observer si une gène (en l'occurrence le gène bla ici) qui se trouve tout d'abord dans un plasmide peut être recopié par la bactérie dans son patrimoine génétique. Et est-ce possible que cela se produise.  [...] une seule bactérie E.coli est-elle capable de chercher un gène dans son propre plasmide ou est-ce qu'une conjugaison bactérienne est obligé d'avoir lieu.  [...]

[Biochimie] nucléase

Le moyen couramment utilisé en labo est de virer le groupement phosphate des extrémités 5' générées après coupure. Pourquoi ne voudrais-tu pas que ça se réassocie. exemple, tu veux exprimer une protéine dans une bactérie pour l'étudier. tu insères le gène codant pour ta protéine dans un plasmide d'expression bactérien qui contient donc une cassette de clonage.  [...] Est-ce que ta question concerne un contexte de clonage Je veux dire par là, ouvrir un plasmide, liguer un insert, le faire exprimer par une bactérie.  [...]

[Microbiologie] Culture bactérienne troublante

j'ai une grande question qui a plus ou moins a voir, est ce que le plamide que l'on transfecte à la bactérie risque de tuer la bactérie, je m'explique, dans vos expérience il semble que la concentration de vos plasmide soit trop important mais ce peut il que le plasmide réagisse mal avec l'adn bactérien et soit léthal.  [...] ce peut il alors qu'en changeant de plasmide le résultat change et par conséquent si l'on effectue la transfection sur des bactéries des plasmides différents ayant tous les meme gene d'interret ( dans des expériences séparées sur la meme souche de bactérie) des résultats différents.  [...]

[Biochimie] insertion de séquence chez des eucaryotes

Petite question. Lorsque l'on introduit une séquence (par exemple dans un plasmide) pour l'amplifier dans une bactérie, je vois bien comment ça marche, mais pour les eucaryotes, comment fait-on pour insérer une séquence dans le noyau et pas seulement dans le cytosol A part la micro-injection, je vois pas très bien.  [...] On transfecte un plasmide par différentes techniques (lyposomes, CaCl2...) et l'ADN trouve tout seul son chemin une fois dans la cellule. Et je pense pas que ce soit en rapport avec la division cellulaire car les cellules que je transfecte CaCl2 en GFP deviennent fluorescente 4h après mais c'était une bonne idée ^^.  [...]

Expériences en génétique…

J'ai donc un peu repondu de travers à la question en expliquant comment recuperer un gène introduit dans une bactérie grace à un plasmide. Dans ce cas là, comme on connait le plasmide, il n'y a pas à chercher à identifier le gène. On connait la taille du fragment de restriction, c'est tres simple.  [...] Les plasmides peuvent se transmettre de bactéries en bactéries et c'est à cause de ça qu'une bactérie, qui au départ est sensible à un antibio, peut devenir résistantes aux antibiotiques...Donc je crois que tu l'as compris. le processus de résistances aux antibios se fait naturellement.  [...]

ADN recombinant et plasmide

Bonjour, oui c'est bien cette diapo. J'en ai déduis que le plasmide ne provient pas de cette bactérie car elle a déjà ses chromosomes, normalement si ce serait le plasmide de la même espèce de bactérie alors elle n'aurait pas de chromosomes mais des plasmides, non X et Y sont des bacteries d'espèces différentes.  [...] Bonjour, merci beaucoup, en effet je pensais que le plasmide provenait d'une bactérie, mais on est d'accord que le plasmide existe vraiment dans la nature (c'est à dire chez certaines bactéries).  [...]

[Biologie Moléculaire] Gène0 AOX1!!

Le plasmide se trouve dans la bactérie et vit sa vie indépendamment de son hôte. En clair, il se réplique à son rythme. Le nombre de copies présentes dans la bactérie est variable selon les plasmides. Il existe des plasmides qui se répliquent beaucoup (des dizaines de copies par bactéries) et à l'opposé des plasmides qui se répliquent peu (une à quelques unités par bactéries).  [...] Pour répondre à Log, en complément à ce qu'a dit piwi, dans une bactérie,on peut trouvé une centaine de plasmides...et ce ne sont pas toutes les bactéries qui vont assimiler le vecteurs, pour les sélectionner,il existe ce qu'on appelle le Criblage...je peux m'étaler si tu veux.  [...]

[Biologie Moléculaire] Protocole de recombinaison homologue chez les bactéries

J'ai un gène sur un plasmide que que je voudrais insérer dans le génome principal d'une bactérie. Après avoir fait la construction sur le plasmide et transformé les bactéries, connaissez vous le protocole à suivre pour insérer le gène par recombinaison homologue.  [...] Je relance cette question. quelqu'un connait il un protocole clair pour faire de la recombinaison homologue chez les bactéries afin de faire passer un gène modifié qui est sur un plasmide au chromosome principal.  [...]