• Forum - Quantité, Enzyme, échantillon

Biochimie enzymo excercices

Pour le premier exercice, si ton enzyme est de type michaelien et que ta concentration de substrat est trés fortement superieur au Km, alors la vitesse initiale est egale à la vitesse maximun qui vaut. Vm = kcat*[Et].  [...] PS. en general, on calcule l'activité specifique d'une preparation enzymatique en verifiant bien que l'enzyme travaille en vitesse initiale, dans un souci de comparaison possible entre manip.  [...]

[Biochimie] facteur de purif et rendement

Je vois bien la différence entre les 2 mais pdt le TP que nous avons fait, on essaye de purifier une enzyme... bon alors jusque là tout va bien. Je suis d'accord sur la définition que tu donnes du rendement et du facteur de purif, aussi sur le calcul à effectuer.  [...] L'activité totale de l'enzyme est mesurée dans la totalité de l'échantillon afin de savoir quelle quantité d'enzyme fonctionnelle on a avant et après la purif.  [...]

[Biologie Moléculaire] Expression d'un gène d'enzyme !

un viel homme a isolé une petite quantité d'attractase,une enzyme produisant une phéromone humaine puissante,à partir d'echantillon de cheveux de célébrités hollywoodiennes.Pour produire de l'attractase à son usage personnel,il a obtenu un clone génomique complet du gène de l'attractase,l'a connecté à un promoteur bactérien puissant dans un plasmide d'expression et a introduit le plasmide dans des cellules d'E coli.  [...] il a été anéanti de découvrir qu'aucune attractase n'etait produite par les cellules.Quelle est 'explication de son echec.   [...]

[Biochimie] calcul d'activité de différents marqueurs cellulaire

Connaissant le volume de l'échantillon dont vous mesurez la DO, vous pouvez en déduite la quantité molaire de DPIP consommée en 1 minute, ce qui correspond à l'activité de votre échantillon.  [...] edit. D'après ce que je comprends on te demande l'activité dans la fraction de 1 mL, pas dans les 10 µL de l'échantillon, si j'ai mal compris il faut bien sûr tenir compte de la dilution de l'échantillon. Si je ne me suis pas trompé sur l'interprétation, c'est l'activité spécifique qui va tenir compte de la dilution (en ramenant l'activité à la quantité d'enzyme, et donc au volume de l'échantillon ajouté à ta fraction de 1 mL).  [...]

Calcule d'activité spécifique à partir absorbance

Voila j'aimerais savoir comment calculer une activité spécifique de mon enzyme (trypsine) à partir d'une absorbance à 280 nm (fixé pour savoir quantité de protéines dans échantillons) et à 410 nm (la pente del a mesure de l'hydrolyse de mon subtrat par mon échantillon de trypsine en fonction du temps).  [...] La personne qui m'encadre m'a dit que je pouvais soit poser A280 1mg/ml= 1 ou partir du coeff molaire= 40000 (c'est pour faire une approximation car mon échantillon n'est pas totalement pure).  [...]

[Biochimie] Aliquot ou aliquote ?

Est ce que l' aliquotage est le fait de séparer un échantillon sur plusieurs tubes en quantité égale.  [...] Pas forcément un échantillon au départ, c'est juste le fait de séparer une quantité initiale en différentes quantités égales = échantillons.  [...]

[Biologie Moléculaire] distribution de la taille de fragment d'ADN pour un échantillon de petite quantité

[Biologie Moléculaire] distribution de la taille de fragment d'ADN pour un échantillon de petite quantité.  [...] distribution de la taille de fragment d'ADN pour un échantillon de petite quantité.  [...]

[Biologie Moléculaire] PCR quantitative

Car moi ce qui m'intéresserait si c'est possible c'est de savoir au final dans mon échantillon, quel est la quantité en ng de mon gène d'intérêt. Es ce que cela est possible et si oui comment on peut le faire.  [...] En principe, tu devrais connaître le nombre initial de copies de ta molécule d'intérêt (en fait, du fragment d'intérêt) dans ton échantillon. Tu peux alors en déduire ta quantité de cette molécule en ng.  [...]

[Biologie Moléculaire] Quantité d'ADN

Je dispose d'un échantillon contenant un extrait d'ADN. Cet échantillon a été dilué au 1/100. Je mesure la DO à 260 nm pour calculer la quantité d'ADN contenue dans l'échantillon.  [...] Oui mais pas au niveau de l'absorbance hein. D'abord tu fais ton calcul (ou ton report de valeur sur ta droite étalon) et ensuite tu prend en compte le facteur de dilution.   [...]

[Biologie Moléculaire] Q-CPCR encore !

Si tu as utilisé la même quantité d'ARN pour les 2 RT, alors c'est que tu as bien un différence. Par contre si tu avais pris x ul de chaque échantillon pour faire la RT, alors la il faudrait normaliser par la quantité d'ARN utilisé.  [...] L'idéal est de confirmer que tu as bien pris la même quantité d'ARN en quantifiiant aussi un gène de ménage (qui ne varie pas en fonction du traitement ou de la pathologie), et ce gène de ménage doit être au meme niveau dans tes 2 echantillons. Si ce n'est pas le cas, c'est que tu as.  [...]