• Forum - Quantité, Bactérie, Solution, Protéine

[Biochimie] Induction d'une protéine

La 1ère étape de la manipulation consiste à mettre au point les conditions de surexpression de cette proteine, pour cela on dispose d'une préculture de bactéries recombinantes permettant de produire l'adénine désaminase, je dois différentes conditions d'inductions ( Milieu LB / Milieu TB) ainsi que variation de la quantité d'IPTG, la DO d'induction est de 0,6.  [...] Et enfin si j'ai bien compris, c'est normal que mes DO avec IPTG ne soient pas superieur aux DO sans IPTG, car la quantité de bactérie dans ma solution n'est pas liée à la surproduction de protéine engendrée par l'IPTG, dans ce cas je ne vois pas l'intérêt de faire une étude comparative.  [...]

[Physiologie] operon lactose

alors que si on ajoute de l iptg,el pourra etre synthétisé car l IPTG va se fixer sur le répresseur lac I,le répresseur change de conformation,et son site de liaison a l'opérateur se trouve modifié,l ARN polymerase va donc transcrire l'ARN M et le protéine CI sera donc synthétisée,est ce ca.  [...] je pense qu' il est introduit dans la bactérie qui a intégrer le prophage contenant la variante B car sur le graphique,on voit que l'activité de la bétagalactosidase augmente avec l IPTG,puis commence a chuter quand la quantité d iptg devient trop importante,donc il y a une régulation qui se produit et qui s'explique par la présence de la proteine CI,est ce ca.  [...]

[Génétique] Transgénèse et fonction du géne

Un fragment d'ADN humain contenant le gène codant l'hormone de croissance humaine a été isolé, purifié et introduit dans le génome de la bactérie Escherichia coli. La bactérie cultivée en fermenteur, produit alors la protéine humaine, qu'il est possible de purifier en grande quantité et d'utiliser à des fins thérapeutiques.  [...] L'hormone de croissance n'est produite qu'en petite quantité par la seule hypophyse, une petite glande à la base du cerveau. En produire par le biais de cadavres suppose déjà de lever toutes les questions éthiques, c'est compliqué. Ensuite il faut être rapide afin d'éviter la dégradation de la protéine, pouvoir s'assurer que chaque cadavre était sain (voyez le procès qui se joue actuellement).  [...]

[Biologie Moléculaire] Clonage

Et ensuite de manière générale pour exprimer une grande quantité de protéine eucaryote on essai de voir si cela fonctionne dans une bactérie (quand ca marche c'est génial car c'est très facile à mettre en place, c'est pas cher et ca fonctionne très bien) malheureusement ca ne fonctionne pas souvent donc on passe dans des système d'expression eucaryote (levures, cellules d'insectes).  [...] Oui, ca parait une solution de riche mais effectivement les prix ont bien baisser et surtout c'est un gain de temps considérable. En plus ca permet de résoudre les problèmes des codons d'usage, en donnant à l'entreprise dans quel type de bactérie on souhaite travailler, elle va syntéthiser le gène avec les codons d'usage de la bactérie.  [...]

PCR et vecteur de clonage

Pour prendre un exemple relatif à ce qu'a expliqué Yoyo, si par exemple tu veux qu'une bactérie exprime une protéine A codée par le gène A exogène a la bactérie bien sûr, tu vas dans un premier temps faire une PCR (en utilisant des primers spécifiques) à partir du génome d'un organisme exprimant ce gène A.  [...] La bactérie pour se multiplier va répliquer son génome et le plasmide contenant le gène A. Au final tu obtients donc un plasmide d'expression, en grande quantité, et contenant le gène d'intérêt. Tu peux également récupérer la protéine A (synthètisée par la bactérie car codée par le gène A) dans ton milieu de culture.  [...]

[Biologie Moléculaire] Comment Provoquer le passage du cycle lysogénique au cycle lytique?

Pour le phage lambda, en provoquant des dommages au matériel génétique de la bactérie. Si tu arrives à faire se déclencher le système SOS chez E. Coli, il va induire le passage en phase lytique du phage lambda qui était sous forme lysogénique.  [...] Tu peux également augmenter, toujours pour le phage lambda, la quantité cytoplasmique de la protéase bactérienne FtsH par exemple en fournissant plus de nutriments et un milieu de culture plus riche à la bactérie. La protéase étant produite en plus grande quantité (de par l'augmentation de nutriments pour la bactérie), elle va courcircuiter les mécanismes lysogénique de lambda et induire sa phase lytique.  [...]

[Biochimie] Expression protéique

Ensuite, vérifie si ta protéine est adaptée à l'expression hétérologue en bactérie. Si ta protéine entre dans au moins une des catégories suivantes, ça peut etre compliqué.  [...] Dans les deux derniers cas, la situation peut etre rattrapable en bactérie. Si ce qui t'intéresse, c'est de produire la protéine pour l'utiliser ensuite dans diverses manipes, passe en E. Coli et privilégie la souche Rosetta qui est particulièrement adaptée à ce genre de cas.  [...]

[Microbiologie] quantité de chaleur dégagée par une bactérie (E.Coli si possible) durant son cycle?

[Microbiologie] quantité de chaleur dégagée par une bactérie (E.Coli si possible) durant son cycle.  [...] je n'arrive pas à trouver cette quantité de chaleur dans le web. Est-ce que la mesure par calorimétrie a été faite par un laboratoire dans le passé Merci d'avance.  [...]

[Microbiologie] incubation de bactérie

C'est comme avec la recherche de spores de clostridium dans les eaux de rivières, tu as tellement peu de bactéries pour une grande quantité de volume que quand tu prélève de la solution diluée, t'es pas sur d'avoir des bactéries étant donné que c'est un lait de vache qui doit être pasteurisé, donc pour avoir plus de chance de tomber sur un prélèvement de bactérie plutot que de solution complètement stérile.  [...] bah voila.. c'est bien sa.. donc, c'est le meme système que le dénombrement des coliformes, avec la table de Mac Grady (je pense qu'elle s'applique pour sa) et tes résultats positifs ou non, tu prend le NPP (3 chiffres) le plus bas (il me semble) et ensuite pour avoir le nombre de bactéries/ ml, tu multiplie le NPP par la dilution la plus faible où tu prend ton NPP donc en gros sa fait.  [...]

[Evolution] est ce que l'évolution est "égo-stricte"?

en quelques sorte oui, ma question d'une autre manière est quelle est l'utilité de l'antigène bactérien, si ce n'est présenter sous forme codée par des protéine les caractéristiques intérieur de la bactérie au macrophage.. je pense que ça ne sert à rien à la bactérie à part ça, la démasquer au système immunitaire des hôtes ou je me trompe peut être.  [...] La protéine antigénique a très probablement une autre utilité pour la bactérie qui n'a rien a voir avec son caractère antigénique, même si il faut se méfier d'interprétation disons finalistes de l'évolution selon lesquelles tout caractère aurait forcément une utilité.  [...]