• Forum - Quantité, ADN, Solution

[Biologie Moléculaire] Dosage de l'ADN

Le dosage d'une solution d'ADN par spectroscopie à 260nm indique une absorbance (DO) de 0,78. Quelle est la quantité d'ADN contenue dans 15µl de cette solution.  [...] Mais la ou je ne suis pas d'accord avec toi c'est que le nombre 0.456 vient dans l'enonce E, alors que l'on te dit que tu mesures 0.230 dans l'enonce C et on te dit que la quantite d'ADN de la solution en question est 109,65 mg/l en D. Donc, pour moi, il faut faire le calcul avec les donnees de C et D, avant de prendre une donnee de E.  [...]

[Biochimie] Calcul d'une concentration en ADN

Le but de l'exo est de déterminer la quantité d'ADN plasmidique dans une solution de 100mL. On sait que la taille du plasmide est de 3500pb. On introduit dans la solution des enzymes qui détachent les sucres, bases et phosphates les uns des autres, puis on détermine qu'il y a 9,8g d'unité osidique dans la solution.  [...] J'ai compris comment déterminer la masse d'ADN présent dans la solution, à partir de la masse d'unités osidique. J'ai également compris comment déterminer la quantité de matière de plasmide à partir de la taille de celui-ci et je vous en remercie d'ailleurs car c'était pas gagné.  [...]

[Biologie Moléculaire] Dilution d'ADN "contaminante"?

Ce que je ne comprends pas c'est comment tu peux estimer que tes solutions diluées sont contaminées en comparaison avec tes solutions mère alors que tu dis toi-même que les mesures au niveau des solutions non diluées sont biaisées.  [...] P.S. Au fait, je suis plutôt curieuse de savoir quelle technique tu utilises pour obtenir une telle quantité d'ADN que ta solution en soit visqueuse.  [...]

Dégradation de l'ADN

J'utilise actuellement la DNase I cependant je ne peux utiliser du MgCl2 dans ma solution or le tampon fourni avec l'enzyme et l'enzyme elle-même est activée en présence de MgCl2.  [...] J'ai donc essayé de remplacer le MgCl2 par d'autres activateurs potentiels tels que le MnCl2, le Cl3Co à différents temps d'incubation à 37 °C et en augmentant la quantité de Dnase I (jusqu'à 60 U de dnase / ug d'ADN) mais il reste toujours assez d'ADN dans la solution pour être amplifié par PCR.  [...]

Rôle de l'EDTA dans dans l'isolement de l'ADN

Je dois faire l'isolement de l'ADN de thymus de veau. Dans la solution A utilisée pour homogénéiser le thymus dans un waring blendor, il y a une certaine quantité de EDTA. Quelqu'un pourrait-il me dire à quoi sert le EDTA dans cette solution Et pourquoi le thymus de veau et non de porc (moins cher à mon avis) par exemple.  [...] De l'EDTA dans une solution de solubilisation cellulaire va permettre, en chélatant les cations bivalents (Mg2+. Ca2+), de rompre les jonctions entre les cellules à dissocier d'un tissus (ici les tissus du thymus). En éffet, Les protéines permettant la jonction cellulaire (ex.  [...]

[Biotechnologie] solution hypotonique et lyse cellulaire

[Biotechnologie] solution hypotonique et lyse cellulaire.  [...] Après avoir fait travailler google je me tourne vers vous. Je me pose la question suivante. Pour extraire de l'adn à partir de sang total, on commence par faire éclater les rouges en solution hypotonique. J'aimerais simplement comprendre pourquoi les leucocytes résistent à ce traitement Est ce que c'est une question de quantité de canaux ioniques.  [...]

Normalisation RT-PCR quantitative

La solution universelle est de faire une gamme d'ADN génomique. le génome haploïde comporte un exemplaire de chaque gène, i.e. 1 copie. Si tu connais la masse d'un génome haploïde (j'ai trouvé une publi avec la masse d'un centaine de génome végétaux par cytométrie en flux), tu peux calculer le nombre de génomes haploïdes contenus dans une quantité donnée d'ADN génomique, c'est à dire le nombre d'exemplaire de chaque gène. 1 équivalent-génome = 1 copie du gène.  [...] Réaliser la PCRq avec 3 dilutions de la même RT permet de vérifier que le nombre de copies du gène cible est bien proportionnel à la quantité de RT. Si ce n'est pas le cas, on a saturé la réaction (trop d'ADN -. diluer) ou on est dans le bruit de fond (pas assez d'ADN, mettre + de RT).  [...]

[Biologie Moléculaire] pb de mutagenèse dirigée

mon problème est que je n'obtient pas de colonies avec mon plasmide recombiné, les témoins de mutagenèse et de transformation sont OK, j'ai bien des colonies bleues et blanches. mais les bactéries traitées avec mon plasmide ne poussent pas sur le milieu de culture LB+ampicilline quelque soit la quantité d'ADN ou de solution bactérienne étallée.  [...] POur les quantités, tu parts de quoi d'une miniprep si c'est le cas oui j'essayerai un peu plus (mais pas trop sinon tu vas galérer avec la DpnI).  [...]

[Biologie Cellulaire] Notion quantité d'adn / molécule d'adn

Bonjour, j'aurai une question de vocabulaire. Mon cours sur la meiose dit le nombre de chromatides correspond au nombre de molécule d'ADN. ensuite on dit qu'en phase G2 de meiose, on a 2 chromatides 2 et 4n molécules d'ADN/4Q ADN. Mais on a également 2 molécules d'ADN si je suis la citation du cours.  [...] Pourriez vous me confirmer si mon raisonnement est le bon pour différencier les termes 2 molécule d'ADN = nombre de chromatides et 2 n molécules d'ADN = quantité d'ADN.  [...]

Quantité d'ADN chez différentes espèces animales

La quantité absolue d'ADN dans un organisme dépend de trois choses.  [...] Les mitos sont présentent dans toutes les cellules mais en quantité variable et en fonction des besoins un cellule peut augmenter son nombre de mitos (le contraire marche aussi) faisant varier dans le même sens le nombre de génome mitochondrial et donc la quantité totale d'ADN.  [...]