• Forum - Quantité, ADN, Bande, Marqueur

[Biologie Moléculaire] Déterminer la masse d'ADN dans une bande après électrophorèse

Ensuite il y a une extrapolation à faire pour déterminer combien il y a d'ADN dans la bande de marqueur à partir de la quantité de marqueur déposée dans le puits.  [...] La question en elle-même est donc. comment faire pour déterminer la quantité d'ADn présente dans chaque bande du marqueur PM.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème de PCR

On a fait amplifier de l'ADN de certains de nos échantillons et on faisant migrer les produits sur gel, il s'est avéré que y a eu contamination (révélation d'une bande sur gel correspondant au contrôle négatif).  [...] Aucune bande qui pourrait montrer une certaine amplificationd'un fragment d'ADN. par contre tout en bas du gel et au niveau de tous les tubes y a une bande de la même taille et même intensité (paraît comme s'il s'agissait de fragments d'ADN dégénérés...) et qui correspond à la plus petite bande du marqueur et qui est située aussi tt en bas.  [...]

[Biochimie] Concentration d'un produit PCR

ca depend de l'intensité de la bande, en général tu peu t'aider du marqueur de poids moléculaire. ca te donnera une idée de ta concentration.  [...] Oui on peut doser à partir d'un gel d'électrophorèse, en faisant des comparaisons de fluorescence (en gros on sélectionne une bande témoin ou on lui dit il y a tant et il peut estimer la quantité d'ADN dans notre bande). Après c'est un jeu. il faut bien sélectionner sa bande, avoir un gel propre, etc... Et la précision n'est pas super.  [...]

[Biologie Moléculaire] pb dosage ARNtotal spectro

Oui je retrouve de l'ARN...mais je vois peu la bande qui correspond à l'ARN 28S. Je vois bien la bande qui correspond au 18S + smear = ARNm. (il faut dire aussi que je n'ai pas de marqueur de migration d'ARN, du coup je mets comme marqueur du marqueur 1kb ADN double brin alors les tailles les distances de migration de correspondent pas entre mes ARN et le marqueur).  [...] La dilution que tu utilises est trop forte. Pour ta migration avec l'ARN, laisse tomber le marqueur de taille car les tailles sont differentes entre ADN et ARN. Perso, dans ce cas la, je n'en mets pas de marqueurs de taille.  [...]

Problème de migration SDS-PAGE

j'étudie la capacité de renaturation (qui semble se faire de manière spontanée) de deux protéines, et j'utilise l'électrophorèse SDS-PAGE comme méthode d'analyse.   [...] Je fais migrer mes fractions sur un gel SDS-PAGE 15%, la migration ne migre pas droite par rappport à mon marqueur de taille, j'ai des trop grosse bande (non du à la quantité de protéine déposée) qui déborde c'est assez bizzarre auriez-vous une solution à mon soucis.  [...]

expression, répression d'un gène

Il y a d'ailleurs des maladies génétiques dues à une mutation dans le promoteur des gènes, dans ce cas le phénotype est du par une expression quantitativement inadaptée (exemple la beta thalassémie).  [...] Ensuite, l'ADN est déposé sur gel de polyacrylamide et à l'aide d'un marqueur de taille on peut déterminer le nombre de répétitions. Si la personne est homozygote pour ce microsatellite, il y aura qu'une bande, si elle est hétérozygote il y aura 2 bandes.  [...]

[Biologie Moléculaire] Electrophorese gel d'agarose

C'est pourquoi dans un des puits on verse une solution de marqueur de taille. C'est un cocktail de plusieurs ADN dont on connait la taille.  [...] Après migration tu observe une ou plusieurs bandes, tu compare la distance puits/bande à celle de ton ADN à celui du marqueur et tu peu déterminer sa taille.  [...]

Cycle cellulaire et cytofluorimétrie

par contre je comprend pas comment tu vois que le marquage est plus ou moins fort. j'arrive pas a voir la distinction entre G1, S et G2. et la concentration en marqueur marque la quantité en ADN c'est ca.  [...] via leur quantité d'ADN (2n, 4n et état intermédiaire) on est capable de connaitre la proportion de cellules a chaque phase du cycle (G1, S, G2,...) et c'est déjà pas mal je trouve, non.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction ARN

les 18S et les 25S apparaissent mais avec une faible intensité, et j'ai une bandes en bas en sous du marqueur qui parait très intense est ce qu'il s'agit de contaminations ou d'ADN j'ai essayer de faire un traitement DNase la bande disparaît mais les 18 et 25S sont presque invisible,  [...] 6. Transférer (500µl) de la phase aqueuse supérieure dans un nouveau tube et ajouter 500µl d'isopropanol. Mélanger à la main doucement pendant 5 minutes.   [...]

[Biologie Moléculaire] DNA mass ladder

Selon le fournisseur, cette marqueur de taille permettrai de lire en même temps le nombre de paire de base (pb) et la quantité d'ADN d'un échantillon (en nanogramme) sur un gel.  [...] Oui vite fait, le marqueur que j'avais n'avait que deux bandes pour estimer la concentration, j'ai jamais trop essayé de vérifier si c'était pr écis. Je ne pense pas que ça le soit. Pour ce qui est de ton marqueur, ça me parait en effet un peu délicat de différencier pr écisément les bandes.  [...]