• Forum - Qualité de l'eau, échantillon, ADN

[Biologie Moléculaire] Bandes "ondulantes" sur gel d'agarose

Je n'avais encore jamais rencontré ce problème auparavant et c'est la 3e fois consécutive que ça le fait. J'ai réextrait mon ADN, changé de TAQ polymérase, de peigne, prélevé des primers dans de nouveaux aliquots mais je ne comprends pas pourquoi je n'arrive pas à avoir une belle bande type. - à la place de ces ~~~~.  [...] Cela m'est déjà arrivé. J'avais résolu le problème en chauffant l'agarose très fort avant de le couler. Il faut que l'agarose bout et là en principe la qualité du gel est parfaite. Peut-être y a-t-il d'autres causes comme la qualité de l'agarose, la qualité de l'eau utilisée pour préparer l'agarose Je ne pense pas que cela provienne de l'échantillon d'ADN que tu déposes.  [...]

Pureté de l'ADN

Re, le blanc= eau distillée autoclavé et sans nucleases. C est la.même eau dans laquelle mon ADN est en suspension pour le chlorophorme je n'en rajoute pas seul avant le précipitation de l'ADN si c'est votre question... Eclairez moi svp.  [...] Re, J ai refais mon extraction J ai même refais l'étape chlorophorm phenol 2fois et J ai changé d'eau distillée au final pour mesurer la do. Cette fois ci j'ai 0.07 pour la do de l'eau mais la do de mon échantillon d'ADN reste toujours faible 0.2 à 260.'(.  [...]

[Biologie Moléculaire] probléme de migration d'ADN sur gel d'agarose

A son issue, on regarde les résultats sur gel d'agarose(+Bromure d'éthidium).Le témoin négatif(2microlitres d'eau à la place de l'ADN) est bien négatif, le témoin positif(ADN de feuille de tomate dont on est sur qu'il s'hybride) est bien positif.Le problème survient sur notre échantillon.  [...] Essaie aussi de diminuer la quantité d'ADN de ton échantillon Vous l'avez dosé pour vérifier que vous être dans le même ordre de grandeur que le témoin positif.  [...]

Besoin d'avis pour optimiser extraction d'ADN à partir de tissu FFPE en vue d'une CGH

Je propose donc de réaliser le protocole de base, ainsi que celui-ci, mais en faisant varier 3 paramètres (j'ai le droit de faire 4 analyses). Tout ceci à partir d'un même échantillon bien sur. Que me conseilleriez vous de faire varier Le temps d'incubation de la protéinase, afin (dans le cas ou mon protocole fonctionnerait) de déterminer si un temps plus court peut suffir.  [...] ps. me confirmez vous que le Nanodrop me permet d'identifier la présence de contaminants et la concentration d'ADN, mais pas sa qualité Raison pour laquelle j'ai besoin du Qubit...en gros, il faudrait peut être que je réalise mon protocole à partir d'une plus grande quantité d'échantillon, afin d'obtenir plus d'ADN de bonne qualité, pour que le marquage en random-priming fonctionne.  [...]

[Biologie Moléculaire] Interprétation PCRq en temps réel (SYBER Green)

En effet j'ai fait une gamme d'étalonnage (avec différentes dilutions de l'ADN de champignon) qui m'a servie pour ma régression linéaire, j'ai ensuite estimé la Concentration en ADN de champignon des échantillons. Les amorces sont bien spécifiques de la séquence à amplifier et j'ai réaliser 3 répétition de témoin eau.  [...] L'utilisation en PCR des séquences ITS (ADN) dites universelles ont la même utilité que les séquences 18S (ARN) en RT-PCR, à savoir valider la présence d'ADN dans ton échantillon, leur qualité, et éventuellement normaliser tes dépôts. C'est un contrôle positif.  [...]

[Biochimie] Microscopie électronique

Mais il note que pour pouvoir recouvrir l'échantillon d'atomes de métal lourd, il faut assécher la cellule sans passer par l'état liquide (pour éviter la tension superficielle élevée de l'eau). Autrement dit, il faudrait que l'eau passe de l'état solide à l'état gazeux directement.  [...] j'ai lu à plusieurs reprises qu'il était possible de substituer l'eau par de l'alcool que l'on va sublimer. Il faudrait que je retombe sur mes sources, je vais chercher car je ne sais plus quel alcool est utilisé. Mais, dans les notes de cours d'un ami, la méthode qui est décrite est la congélation de l'échantillon puis sa sublimation directe.  [...]

ADN - et communication

P. Garjajev. Garjajev et son collègue, le physicien quantique, le Dr. Vladimir Poponin, ont fait une observation insolite en mesurant les vibrations émises par des échantillons d'ADN. I ls ont irradié un échantillon d'ADN avec la lumière laser, et ont obtenu, sur un écran, un modèle typique d'ondes.  [...] P. Garjajev. Garjajev et son collègue, le physicien quantique, le Dr. Vladimir Poponin, ont fait une observation insolite en mesurant les vibrations émises par des échantillons d'ADN. Ils ont irradié un échantillon d'ADN avec la lumière laser, et ont obtenu, sur un écran, un modèle typique d'ondes.  [...]

Présentation PCR en temps réel

La quantitative permet de quantifier (d'où son nom) l'ADN dans ton échantillon alors que la Real Time ne s'intéresse qu'au côté qualitatif, donc savoir si un amplicon est formé. On peut aussi avoir certaines infos sur cette amplicon.  [...] Merci de me corriger,c'est vrai que là je me perds encore... en fait d'abord je parle de la reel time au niveau du principe qui montre le côté qualitatif qulque soit la methode(intercalant ou sonde) et ensuite la quantification relative et absolue.  [...]

Différences d'ADN entre les ètres vivant ?

Imaginons que tu me demandes de te fournir un échantillon de mon ADN pour faire une électrophorèse et que je te passe un échantillon contenant de l'ADN de salade, quelque chose te mettrait la puce à l'oreille ou non.  [...] Par ta faute mon expérience à foiré Tolistento. Au vu du résultat de la 1ère électrophorèse, on peut déduire que l'échantillon que tu m'as donné ne contenait pas ton ADN, puisqu'à vrai dire ce n'était pas l'ADN d'un Homme. Et c'est pareil pour la 2csd électrophorèse.  [...]

[Biologie Moléculaire] distribution de la taille de fragment d'ADN pour un échantillon de petite quantité

[Biologie Moléculaire] distribution de la taille de fragment d'ADN pour un échantillon de petite quantité.  [...] Je recherche un protocole ou une méthode permettant de visualiser la taille de fragment d'adn pour un extrait d'ADN de très faible concentration (eg. 1pg-1ng).  [...]