• Forum - Pull, Protéines, Anticorps

Interaction entrée viral protéine cellulaire

On a identifier une proteine x exprimée à la surface de ton virus adoré, et on souhaiterait identifier les protéines exprimées à la membrabe plasmique de ta cellule hôte avec lesquelles x interagit.  [...] Quitte a synthetiser une proteine recombinante autant faire un pull-down avec une fusion GST-proteine X. Si tu utilises une etape anticorps, ne pas oublier de cross-linker l'anticorps avant l'IP... Un autre detail, identifier des proteines membranaires par mass spec n'est pas une partie de plaisir.  [...]

[Biochimie] Qu'est ce qu'un pull down?

Voilà je voudrais savoir ce qu'est un pull down en biochimie quand on parle d'interaction Proteines/Liagand.  [...] c'es une méthode qui permet d'étudier les intéractions protéine/protéine (éventuellement protéine/ligand). Le but est d' attrapper les molécules qui intéragissent avec ta protéine que tu immobilise en utilisant un anticorps ou un tag.  [...]

[Biochimie] Techniques biochimiques

Donc il faut te contenter de ce qu'on t'a appris et surtout travailler l'interprétation des TD que tu as fait puisque c'est vraiment le plus important. En TD, on travaille pas mal les possibilités qui sont permises avec une technique et apprendre à faire le parallèle entre un résultat expérimental et la réalité biologique qu'il y a derrière.   [...] Il n'est pas nécessaire d'en connaitre beaucoup plus sur ces techniques. Il est surtout important de savoir quel message elle laisse suivant les autres manips qui sont faites en parallèle. C'est avant tout une question de démarche scientifique à s'approprier.   [...]

[Biochimie] conservation des protéines en milieu aqueux

en fait je souhaite juste conserver ces protéines en solution pour réaliser des dosages. Le problème est que les dosages ne pourront être réalisés que quelques heures après l'expérience... par conséquent, il me parait important de savoir si la dégradation des protéines aura déjà commencé.  [...] Ok donc je vous conseille fortement de conserver vos protéines dans un tampon quelconque (buffer d'IP, de pull down, de purif, etc...) et de stocker tout ça à -20° ou à -80° voire même en faisant un flash freeze si vous en avez la possibilité, même pour quelques heures.  [...]

témoins de pull down

j'ai une question qui me chiffonne. lors d'un test d'intéraction entre deux protéines (A-his et B-GST pour être plus claire.) par pull-down sur colonne, je me demande si je n'ai pas oublié des témoins.  [...] quelqu'un m'a conseillée de faire un témoin en passant sur la colonne ma protéineA-his incubée avec de l'albumine. Qu'est ce que vous en pensez ça testerait quoi exactement.  [...]

[Biologie Moléculaire] Pull down GST

j'essaye de produire une protéine en fusion avec la GST afin de faire des tests d'interaction pull-down avec des extraits cellulaires.  [...] J'ai quelque souci de production de la protéine, j'arrive en avoir mais à des quantités pas très élevée. Sauriez-vous combien il faut de proteine en fusion avec la GST sur les billes pour faire le test pull down.  [...]

Interaction cellule/virus

Ou sinon tu construits une protéine de fusion GST/glycoprotéine virale et tu fais un pull down classique sur un un lysat membranaire des cellules sensibles pour voir si tu descends bien ton récepteur cellulaire... T'as pas forcément besoin d'une interaction avec la cellule entière...non.  [...] Il existe un anticorps contre la glycoprotéine, mais on le sait deja que cette glycoprotéine est impliquée dans la fusion. Moi je m'interesse à l'interaction glycoprotéine/recpteur, et la fonction de cette interaction. Il me faudrait un anticorps contre le recepteur cellulaire, mais il n'existe pas.  [...]

[Biochimie] Extraction d'un extrain protéique embryonnaire

1. J'aurais extraire les protéines embryonnaires de Zebrafish (des petits poissons). Mon problème se pose au niveau de l'extraction pas au niveau de la récupération des embryons. Je ne sais pas si je dosi les conserver dans la glace, dans l'azote ou à RT.  [...] 2. Ma deuxième question concerne la conservation des protéines, je ne sais pas si je dois les garder dans un tampon (buffer) ou si mon extrait de protéine resterait stable à 4°C dans l'eau. Je ne sais pas non plus si le plus simple est de hyophiliser l'extrait et de le garder en poudre.  [...]

[Biotechnologie] Soustraitance de la technique "pull-down"

Je suis en Master Pro de BIO et j'effectue un management de projet. Dans le cadre de ce projet, il m'est plus rentable de sous traitées certaines étapes. j'aimerais soustraiter une étape de biologie moléculaire, la technique de pull-down par chromatographie d'affinité.  [...] Connaissez vous des sociétés de Biotech ou des laboratoires (privés de préference) qui proposent ce service.   [...]

[Physiologie] Comment évolue notre cerveau?

Un autre exemple, cité par un généticien marseillais au cours d'une EPU sur la grande prématurité, celui d'une étudiante en 5è année de médecine à laquelle on a découvert au décours d'une IRM faite pour une cause incidente, des lésions clastiques périventriculaires qui normalement auraient conduit à un pronostic d'IMOC.   [...] En revanche faire du tricot complexe (pull à motif par exemple), du crochet, de la musique... mobilise l'agilité, la mémoire, l'imagination et la concentration. Autant dire que faire faire du solfège à ses enfants peut paraître rébarbatif en premier lieu mais l'aidera dans toutes ses autres activités.  [...]