• Forum - Protocole, Culture, Cellules

[Biologie Cellulaire] cultures cellulaires primaires

Ensuite, un schéma de protocole de culture, ce n'est pas assez précis. Cela dépend encore des cellules, certaines sont adhérentes d'autres surnageantes par exemple et pour chacun de ces cas le protocole sera différent.  [...] C'est à dire que oui, j'en fais tous les jours de la culture primaire de cellules humaines. Après, le protocole de culture ne varie pas par rapport à la culture de lignées.  [...]

[Biologie Cellulaire] Aide pour culture en boite de Pétri de cellules type cellules d'oignons.

En connaissez vous d'autres Quelle protocole utilisé pour mettre en culture ces cellules (faut il prendre une fine couche d'oignon et la posée sur la gelée ) Es ce que les colorants comme le Rouge neutre, le bleu de Méthylène ou Feulgen peuvent inhiber le cycle cellulaire est donc tués des cellules (si oui, quel colorant utilisé afin de ne pas fausser mes résultats).  [...] Nouvelles questions. Comment se procurer ces cellules Quel protocole utilisé pour les mettre en culture Et avec quoi se cultivent-elles.  [...]

[Biochimie] ِQue veux dire le "X" dans les concentration

Si j'ai bien compris, ça veut dire que c'est concentré 50 fois plus que la normale. Pour avoir du 1X, je dois par exemple prélever 100µL du produit A et le diluer dans 4,9mL de solvant (milieu de culture dans mon cas). C'est bien ça.  [...] Admettons que mon milieu de culture soit de 10 mL. S'il faut rajouter 3X du produit A, je met en fait dans mon milieu de culture 30ml de mon produit A 1X (volume final 40 ml ).  [...]

[Immunologie] isotype et cytometrie

Mais de toute façon j'ai un protocole de culture cellulaire avant la cytometrie, et les marqueurs que je test doivent être expimés sur 100% des cellules, ou 0%.  [...] Les marqueurs que j'utilisent sont discriminants absolu du type cellulaire que je cherche à mettre en évidence (en fait je cherche à valider un protocole de culture cellulaire...).  [...]

[Biologie Cellulaire] milieu de culture

lorsque l'on étudie l'effet d'une substance sur la croissance de cellules de cancer de sein quel protocole doit on faire, dans quel milieu de culture doivent être mises les cellules et quelles methodes d'analyse de la croissance des cellules va t-on utiliser, celles qui seront les plus pratiques et les moins couteuses, merci beaucoup.  [...] Je voulais juste savoir se que l'on doit mettre dans un milieu de culture hormis le milieu essentiel pour la culture des cellules mcf7 par exemple et lorsqu'on étudie la croissance des cellules mcf7 en présence d'un composé quelles sont les méthodes appropriées pour voir si les cellules prolifèrent ou meurent.  [...]

Co-Culture

Bonjour je dois établir un protocole de co-culture entre des cellules cancéreuses. MDA-MB-231 et des fibroblastes 3T3 différenciés par l insuline en vue de devenir des adipocytes. Malheureusement je n ai que des notions limitées de culture in vitro. si quelqu'un aurait des pistes à me donner pour je puisse établir mon protocle ce serait gentil. merci d avance.  [...] voilà j ai ma réponse maintenant je la mets à disposition. utilisation d'un transwell dans des plaques avec ou sans coating suivant ce que vous voulez observer.   [...]

[Biologie Cellulaire] protocole de culture cellulaire

Bonjour, je suis en train d'effectuer un stage dans un pays anglophone et je ne comprends pas tout (pas grand chose même). On m'a expliquer comment faire des cultures cellulaires mais je ne comprends pas toutes les étapes et on m'a expliquer le protocole dans le désordre et pas de manière très complète.  [...] Tu as en culture tes cellules 3T3 que tu maintients à 37°C, 5% CO2, dans un incubateur avec comme milieu de culture un milieu DMEM supplémenté en SVF (10% je penses), de la glutamine et des antibiotiques. Ca c'est le classique pour entretenir (faire se multiplier) tes cellules.  [...]

[Biologie Cellulaire] Dmso

Petite question de curiosité, quelqu'un saurait-il me dire à quoi sert le DMSO que l'on utilise dans le milieu de culture pour congeler les cellules.  [...] J'ai eu l'occasion de comparer des taux de survies cellulaires avec des cellules placées dans différentes conditions et on observait 25% de mortalité cellulaire avec un protocole classique (10% de DMSO dans le milieu de culture, décongélation rapide à 37°C), 30% de mortalité avec 10% de DMSO et une décongélation lente à température ambiante (20°C environ) et 20% de mortalité avec un mélange à 1% de DMSO et une décongélation rapide à 37°C.  [...]

[Biologie Moléculaire] transfection lipofectamine LTX and PLUS reagent invitrogene

Pour 100µL de milieu de transfection (ADN-lipo-Plus reagent dans de l'opti-MEM), je te conseille d'ensemencer tes cellules la veille dans 1mL de milieu (si tu cultives en plaques 24 puits, à adapter sinon) de manière à ce qu'elles soient à H80% de confluence le lendemain, puis le lendemain pendant l'incubation de tes complexes, de laver ton puits avec du PBS, de remettre 400µL de milieu de culture sans serum puis d'y rajouter tes 100µL de milieu de transfection (limiter le volume pendant la transfection permet de réduire le temps que mettront les liposomes pour sédimenter).  [...] Je n'ai pas beaucoup de recul sur la culture des cellules en Opti-MEM. Je n'utilise ce milieu que pour la phase de transfection proprement dite, par la suite je remets toujours le milieu de culture classique.  [...]

[Biologie Moléculaire] Western blot sur des echantillons de foie murins

Merci pour les protocoles. C'est tres gentil. Mais pour les lysats, je ne parlais pas de cellules en culture, mais de fragment d'organes. Il s agit du foie de souris. As tu un protocole.  [...] oui, je me ferai aider. Mais avant j ai quand meme besoin d un protocole.Le probleme c'est que je pars de rien. Dans le labo, ils ont dosè d autres proteines, pas celles la. De plus, ils le font souvent sur des cellules en culture. Cest pour cela que je suis un peu perdue. J'attens ton message demain.  [...]