• Forum - Protocole, Concentration, Protéines

[Biochimie] dot plot et overlay

Pourriez vous m'aider à retrouver un protocole complet sur l'overlay et la concentration de protéines que je dois déposer.  [...] je compte faire une gamme de concentration des deux protéines mais avant tout je dois trouver LE COMMENT de la technique.  [...]

Extraction de l'ADN

Le NaCL concentré (par exemple 5M) sert à précipiter les protéines, et utilisé dans le protocole de salting out pour cette raison à cette concentration si élevée.  [...] L'ARNase sert à dégrader L'ARN il est utiliser au début de l'extraction Si on utilise un protocole de phénol chloroforme on peut grâce au phénol éliminer l'ARN degradé et les protéines.  [...]

[Biochimie] Plusieurs questions sur les chromatographies échangeuses d'ions et d'affinité

**Quel est le rôle de l'excès de substrat(engendrer une compétition entre le substrat collé aux résines et celui ajouté,ce qui permettrait aux protéines de sortir de la colonne) et celui de l'augmentation de concentration de NaCl dans ce genre de chromatographie.  [...] Généralement elle contient un tampon (maintenir le pH constant à une valeur donnée), une concentration en sel (généralement supérieure à 50mM pour éviter les intéractions entre la phase stationnaire et les protéines). Ensuite ton tampon peut contenir d'autres molécules mais là ça dépend de ton protocole.  [...]

[Biologie Moléculaire] Western sur protéine membranaire

Je n'ai pas la réponse à ta question ne bossant pas sur ce type de protéines mais est ce que tu as jeté un oeil sur protocol-online.org (C'est pas une blague).  [...] J'avais prévu d'utiliser le TCA j'ai un protocole qui marche tres bien pour les protéines cytoplasmiques. Je vais faire le laemli en parallele et on verra bien ce que ca donne.  [...]

problèmes gels SDS PAGE

J'ai actuellement un petit problème avec mes gels SDS PAGE, ils sont très moches même le marqueur moléculaire. on ne voit rien surtout au niveau des PM élevés là où je devrai voir ma protéine. Est-ce que quelqu'un peut me donner un protocole détaillé. gel de concentration à environ 3,5%, gel de séparation à 8%, traitement des échantillons... ou bien me diriger vers un lien.  [...] Si ton problème est uniquement pour le shauts poids moléculaires, peut-être peux tu essayer un 6%. Mais si tu as déjà vu ta bande avec un 8% alors c'est un autre problème. Si tu as fait plusieurs gels et que ça n'a pas fonctionné, mon conseil (ca m'est arrivé un certain nombre de fois ).   [...]

[Biotechnologie] Protocole d'extraction des proteines totales

[Biotechnologie] Protocole d'extraction des proteines totales.  [...] salut, je suis un jeune chercheur tunisien, bref, je cherche un article scientifique contient un protocole d'extraction des proteines totales de tissu vegetales( ex. palmier dattier), tenir compte que je veux faire une electrophorese monodimensionelle, SVP c trooooooop urgent si il ya plus d'articles priere les envoyez-moi sur email.  [...]

proteinesdans le culot ou le surnageant

Si votre tampon initial ne contient que du tris, en principe certaines des protéines seront solubles, d'autres pas et se retrouveront donc dans le culot. Une protéine soluble n'a malheureusement aucune raison de précipiter si elle est en solution, même a haute vitesse.  [...] Si le protocole est connu et décrit, j'imagine qu'on peut considérer que les protéines sont au fond. Si c'est un nouveau protocole, c'est à vérifier, mais d'apres les infos il n'y a pas de raison que le culot contienne toutes les protéines de l'extrait.  [...]

[Microbiologie] Staphylocoque doré et tryptone

Je suis totalement inculte en biologie mais, ayant un projet de statistiques sur la culture de staphylocoques dorés en fonction de la température, de la durée et de la concentration en tryptone, j'aimerais avoir certaines explications.  [...] Connaissez-vous des liens qui me permettraient de comprendre le protocole (pourquoi on fixe la concentration en tryptone à 1% et pas à 1.4%).  [...]

[Biochimie] Protocole de purification des protéines membranaires

À mon avis les étapes de purification qu'on doit accomplir afin d'obtenir une protéine pure et intacte consiste a procédé a une chromatographie échangeuse d'ion, HPLC, l'électrophorèse sur gel, électrophorèses bidimensionnelle.  [...] Pour les méthodes utilisées je les connais mais moi je cherche le protocole exacte autrement dit la succession des méthodes.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction protéines pariétales

J'ai une ou deux idées sous le coude. partir sur des volumes d'extraction + importants et précipiter les protéines au TCA tenter un protocole d'extraction des protéines en pH alcalin.  [...] Sinon euh... je sais que moi j'extrait mes protéines par variation du pH en connaissant le pHi de mes molécules d'intéret (ph9 en récupérant le surnageant puis précipitation à pH 4,5 mais je ne sais pas si ça pourrait t'être utile).  [...]