• Forum - Protéines, Solution, ADN, ARN, éthanol

Extraction de l'ADN

S'il vous plait est ce que quelqu'un peut me dire si le Nacl permet l'élimination de l'ARN ou des protéines lors de l'extraction de l'ADN.  [...] dans le cas de salting out on ajoute du NACL concentré pour précépiter les protéines et on récupère la solution contenant l'ADN + ARN dégradé puis on précipite l'ADN grâce à l'éthanol absolu et on se débarrasse de l'ADN.  [...]

protocole analyse d'ADN

Voila quelqu'un connaitré le procédé d'extraction de l'ADN pour reconnaitre un suspect (protocol expérimental)Merci d'avance.  [...] de manière général, il faut casser les cellules, éliminer les débris celulaire, par centrifugation. éliminer les ARN, par des RNAses ou par des méthodes chimiques couplées aux autres étapes du protocole. il faut ensuite éliminer les protéines, souvent par un mélange phénol-clhloroforme, puis faire précipiter l'ADN à l'éthanol (en présence de sels) ou isopropanol.  [...]

Solubilité d'ADN et d'ARN

J'ai une question concernant la solubilité d'ADN et d'ARN.. D'apres ce qu'on m'a dit l'adn est soluble dans l'eau et l'arn dans les solvants organiques comme l'alcool, phénol, chloroforme.. Mais ARN précipité en présence d'alcool mais non pas l'ADN.. Est ce possible Pouvez quelqu'un m'expliquer SVP.  [...] L'ADN et l'ARN ne SONT PAS SOLUBLES dans le phénol, le chloroforme, l'ethanol, l'acétone, l'isopropanol etc... C'est d'ailleurs bien pratique quand on veut les extraire et les purifier.  [...]

[Identification] Extraction d'ADN

Homogénéiser doucement le contenu de l'Erlenmeyer, puis transférer 10 mL de ce filtrat dans l'éprouvette. Ajuster ensuite le volume jusqu'à 40 mL avec la solution froide d'éthanol à 90° (verser très délicatement et lentement la solution d'éthanol).  [...] L'alcool sert effectivement à précipiter l'ADN mais ceci est potentialisé par les sels tels que le NaCl qui vont permettre de liberer l'ADN de protéines qui y sont fixées.  [...]

[Biologie Moléculaire] travaux pratiques, isolation plasmide

L'éthanol 70% permet de faire précipiter l'ADN. On utilise d'abord de l'éthanol 96% (ou plus concentré) car on le rajoute en général à un volume de solution aqueuse qui contient l'ADN (souvent après une étape de phénol-chloroforme) et qui va diluer un peu l'éthanol.  [...] On rajoute un volume suffisant d'éthanol concentré pour obtenir une concentration finale à environ 70%. On centrifuge alors pour faire tomber l'ADN au fond du tube, on enlève le surnageant et on mets ensuite de l'éthanol à 70% directement, car il n'y a plus de solution aqueuse pour diluer l'éthanol.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction d'ADN plasmidique

L'ADN chromosomique et les protéines dénaturées sont précipités par 150 µl d'une solution d'acétate de potassium 3 M pendant 5 minutes à 4°C puis éliminés par centrifugation (1000 g pendant 5 minutes à 4°C).  [...] Un volume d'éthanol 100% froid est ajouté au surnageant afin de précipiter l'ADN plasmidique pendant 5 minutes à température ambiante. Après 5 minutes de centrifugation à 10000 g, le surnageant est éliminé et le culot est lavé dans une solution Tris 0,1 M / éthanol 70% puis dans l'éthanol 100%.  [...]

Biochimie : Pourquoi a-t'on besoin d'éthanol pour extraire le fructose du citron?

Je pense que l'éthanol sert à se débarrasser des protéines et des nucléotides (ADN, ARN) qui perdront leur solubilité et précipiteront plus facilement à la centrifugation.  [...] .Mais les électrolytes présents dans la solution vont maintenant pouvoir se lier aux groupements phosphates de l'ADN, ce qu'empêchait l'eau mais pas l'alcool, puisqu'il est moins polaire. Ainsi l'ADN est neutralisé et précipite dans l'éthanol.  [...]

[Génétique] Extraction d'ADN plasmidique de bactéries

Bonjour, alors voila j'ai fait un TP sur l'extraction d'ADN et pour faire mon compte rendu j'ai un petit soucis, le spectrophotomètre indique que ma solution a.  [...] J'ai la présence de composés aromatiques et de très peu d'éthanol dans ma solution, mais je me demande comment j'ai pu contaminer ma solution, est ce du au tampon que j'ai utilisé pour solubiliser et dénaturer les protéines.  [...]

[Biologie Moléculaire] Questions variées...

A. dans le cadre des pathos à transmission autosomiques dominantes, si un enfant est sain et que l'un de ses parents est atteint il peut s'agir d'une néomutation (je sais bien qu'en général si un de ses parents est atteint c'est lui qui lui aura transmi la maladie dans la plupart des cas mais cependant est-ce possible).   [...] D.L'ADN en solution précipite lorsqu'on augmente la force ionique. (V ou F je ne sais pas le rapport à la force ionique, je pensais qu'on précipitait uniquement l'ADN avec l'ethanol).  [...]

[Biologie Moléculaire] Resolubilisation des proteines aprés extraction au trizol

Après avoir récupéré la phase rouge contenant l'ADN et les protéines, on a ajouté 300µl d'éthanol 100% pour précipiter l'ADN. Après incubation 3mn, on centrifuge à 4600 tours pendant 5 mn. On prélève la phase aqueuse à laquelle on ajoute 1ml d'isopropanol pour précipiter les protéines.  [...] C'est l'éternel problème des protéines, une fois précipitées elles peuvent le rester...Il existe certaines solution qui impliquent de dénaturer les protéines (urée 8M ou chlorure de guanidium 6M) pour les solubiliser. Plus rare mais parfois très efficace solubiliser dans de l'arginine 1 ou 2 M, ça peut donner des bons résultats.  [...]