• Forum - Protéines, Quantité, Rapport, Total

Electrophorèse sds-page de la MMP2

Après avoir fait une transfection ce cellules, j'ai récupéré des surnageants contenant mes protéines proMMP2 et deltaproMMP2. J'ai analysé mes protéines sur un zymogramme contenant de la gélatine (substrat préférentielles de mes protéases) et j'ai pu observer leur activité grâce à des spots de digestion sur mon gel coloré au bleu de Coomassie.  [...] sur le gel Page vous vouliez voir les MMP au bleu de coomassie ou toutes les protéines j'imagine que c 'est pour normaliser la quantité de MMP par rapport au total.  [...]

[Biochimie] Dosage des protéines

La quantité de protéines totales ne peut pas augmenter, sauf si vous faites de la magie. Donc vous allez perdre des protéines tout au long de votre purification.  [...] Si vous considérez les chiffres absolus qui sortent du spectro, ce n'est pas une quantité, c'est une concentration qu'il faut rapporter au volume de protéines à chaque étapes. Normalement le nombre total devrait diminuer, si il augmente c'est que vous avez un souci dans la conduite de vos manip.  [...]

Proteines sang

Il n'y a rien de particulier à comprendre. la valeur des protéines totales circulantes est normale. Dans une pathologie, il y a des valeurs normales et, éventuellement,des valeurs anormales. Le bilan est à interpréter en fonction de la clinique et de l'évolution.  [...] Tout à fait. La CRP est une protéine parmi beaucoup d'autres de concentration très faible par rapport au total et il faut une augmentation, donc une réaction inflammatoire extrêmement importante pour provoquer une valeur anormalement élevée des protéines totales.  [...]

[Biologie Moléculaire] Q-CPCR encore !

Et c'est là que ca me pose problème. SI tu prends un gène qui est est autant exprimé dans 500 ng d'ARN dans deux tissus différents (avec les répétitions qui vont avec..), tu dis que c'est un gène de référence, mais si tu ramènes ca à la quantité d'ARN total celui n'est plus un gène de référence bien qu'on soit à la meme quantité de matière.  [...] Mais, si tu t'intéresses au niveau d'ARN dans une cellule donnée, tu vas exprimer le niveau de transcription de ton gène par rapport à R. Comme tu ne connais pas R, tu vas utiliser un multiple de R (le même pour les 2 tissus pour que cela soit comparable), par exemple la quantité d'ARN que tu as utilisé pour faire ta RT.  [...]

Lecture graphique éléctrophorèse

Pour les extraits nucléaires. en ramenant au total de protéines nucléaires, la part de protéines légères (sous 20 kDa) = environ 1/3 des protéines nucléaires totales.  [...] 2/4 sont fausses selon ma correction, pourtant au delà de 30 minutes de marquage désigne le protocole 2, et il y a bien des protéines dans les deux graphiques. Si on cible le graphique gauche il y a bien synthèse, voir importation dans noyau étant donné que les protéines nucléaires sont synthétise dans le cytoplasme puis importés, il y a bien soit on parle du graphique de droite, mais dans les deux cas le protocole 2 est élevé... Qu'en penses tu.  [...]

western blot

D'où déjà, nous avons pense au fait que le transfert total des protéines par semi-dry n'a pas eu lieu. Or nous avons observe le transfert partiel du marqueur. De ce fait nous avons utilise le gel transféré et avons refait le transfert par semi-dry et nous observons un transfert total.  [...] J'aimerais savoir comment faire pour transférer toutes mes protéines par semi- dry Est ce que le colorant (simple blue) a un effet sur le transfert total des protéines pour un semi-dry.  [...]

[Génétique] Combien la femme a-t-elle de gènes de plus que l'homme ?

Sinon ceci dit, la question n'a pas beaucoup d'intérêt en réalité. avoir plus de gène ne prédispose absolument pas à grand chose de plus, lorsque les disparités quantitatives sont d'un ordre de grandeur aussi faible par rapport au nombre de gènes au total qui constitue le génome.  [...] Pour l'instant, seule info trouvée sur l'origine de la lactation, qui aurait déjà existé chez les synapsides (par dérivation de glandes apocrynes de la peau, et de protéines impliquées dans l'immunité)... intéressant mais hors sujet (mais comme c'est intéressant, je donne le lien, à tout hasard.  [...]

western blot, protéine phosphorylée et protéine totale?

Ensuite t-JNK signifie total-JNK, tu en as besoin pour déterminer une quantité de protéine phosphorylée. On ne peut pas vraiment dire que ce soit un contrôle interne. Si tu étudie la phosphorylation d'une protéine il te faut bien montrer quand tu fais une time course que l'a phosphorylation augmente sinon ça ne veut rien dire.  [...] Finalement GAPDH est lui un contrôle de charge, tu peux faire actine ou tubuline, c'est juste pour montrer que tu as loadé sur ton gel la même quantité de protéine. Ca sert à la normalisation.  [...]

Normalisation RT-PCR quantitative

Mais le problème de la méthode des delta delta de Ct, est que c'est de la quantification relative, i.e. mon gène est n fois plus/moins exprimé que tel autre. Si tu veux faire de la quantification absolue, il te faut faire une gamme-étalon avec des quantités connues d'ADN et comparer le Ct de ton gène cible avec les Ct de la gamme.  [...] Par contre, il faudra peut être que tu rapportes tes Ct à la quantité de RT (ou d'ARN total initial) dans certains cas. Car parfois, il faut diluer beaucoup pour avoir un Ct correct, c'est-à-dire non saturé et hors du bruit de fond. En gros, je gardais les Ct entre 20 et 35 (mais j'avais ma gamme d'ADNg pour me guider).  [...]

Le rapport Campbell ; Découverte majeure ou manipulation de données scientifiques ? - Page 3

Au passage, un pourcentage ne rime à rien en l'absence d'une quantité totale, d'autre part, la qualité de ces protéines varie, tout comme le reste de l'alimentation, tout comme les besoins (aussi étrange que ça puisse vous paraitre, un bébé n'a pas les mêmes besoins qu'un adulte) et enfin, ce n'est pas 6 à 7 % mais beaucoup moins ( 0.  [...] Le biais le plus répandu étant que la comparaison devrait être faite versus une population qui ne varierait que par le facteur étudié, ce qui n'est jamais le cas, même si on essaie d'en amortir quelques uns de ceux qui sont retrouvés (exemple, pour les végétariens, ils sont comparés à des gens qui différent sur d'autres habitudes de vie, en commençant par l'apport calorique et protéique total, l'exercice physique - qualité et quantité - ou certains facteurs de stress, physiques ou psychologiques, etc.).  [...]