• Forum - Protéines, Niveau, Expression

[Biologie Moléculaire] Page sds

Enfin, dernier point, j'espère que les protéines ont un niveau d'expression similaire, sinon, cela sera extrêmement difficile.  [...] En fait la deuxième protéine de 290 kD est une version mutée de la protéine à 280 kD, elle est moins exprimée que cette dernière environ 30 % de la normale, dans mon cas, j'essaye de voir si les deux protéines sont présentes simultanément ou pas et dans l'idéal déterminer la proportion de la protéine mutée en utilisant l'actine comme témoin interne. Pouvez vous me proposer un protocole.  [...]

[Divers] L'origine de l'homosexualité

Dans cette hypothèse quelles zones de l'ADN sont impliquées Sont- ce des gènes produisant des protéines liées aux hormones sexuelles.  [...] On sait que les récepteurs aux oestrogènes sont exprimés chez l'homme comme chez la femme, pareil pour certaines protéines responsables de la masculinité. La différence ne se situe pas dans leur présence ou leur absence mais dans leur niveau d'expression dans chaque type sexuel.  [...]

[Divers] Interprétation d'un article: question sur les cellules HEK293

En effet ça aurait été bien qu'ils mettent un western sur TLR2 et CEACAM1 avant transfection, au moins pour montrer que la transfection permet bien d'augmenter le niveau d'expression de ces protéines (si elles sont exprimées). Si les auteurs ne se servent que de la surexpression de ces protéines pour étudier des phénotypes particuliers, il n'y a pas de problème majeur à ce qu'on ne connaisse pas le niveau d'expression basal de ces deux protéines, dans le cas où elles sont exprimées.  [...] Tu peux essayer de taper HEK293 AND TLR2 ou CEACAM1 dans tes recherches, dans l'atcc tu ne trouveras pas les protéines exprimées dans les divers types cellulaires. Le mieux c'est pubmed, et les autres sites déjà mentionnés dans ce post.  [...]

[Génétique] Commutateur génétique

Il fallait lire la charte du forum avant, tu aurais vu qu'il faut mettre un titre explicite pour une question précise...comme par exemple commutateur génétique.   [...] Il peut s'agir d'un système comportant des régions du génome humain ou d'un gène agissant à la manière d'un commutateur en activant et désactivant d'autres gènes. Il peut également s'agir de protéines régulant la transcription d'un gène et contrôlant le niveau d'expression d'une autre protéine.  [...]

Refs Anticorps anti FATP1, 2 et 4

Je dois faire des westerns blot (cellules humaines, de souris et de rat) et je cherche des références d'anticorps qui marchent bien pour ces 3 especes (car je dois comparer le niveau d'expression de ces protéines entre les 3 especes). Il s'agit des anticorps suivants.  [...] anti Fatty Acid Transport Protein. FATP1, FATP2, FATP 4 (encore appelé SLC27A1, 2, 4). Je les ai commandés chez Biorbyt, mais ils ne marchent pas. Quelqu'un peut-il m'aider.  [...]

[Biologie Moléculaire] le mystère des séquences non codantes

Effectivement, les introns ont une fonction régulatrice qui peut s'expliquer de différentes façons. Leur épissage retardé dans l'ARN pré-messager, par exemple, permet d'abaisser le niveau d'expression du gène correspondant. L'existence de l'épissage alternatif est un autre niveau de modulation qui permet d'obtenir différentes protéines à partir d'un seul gène.  [...] C'est comme ça qu'avec environ 20 000 gènes, l'Homme exprime il me semble 100 000 protéines différentes. Sans ça, ce serait impossible. Imagine la taille de notre génome s'il fallait un gène par protéine, en plus de tous les gènes non codants.  [...]

ubiquitine et protéasome

si apres inhibition du proteasome, le niveau d'expression cellulaire de ta proteine est plus grand, tu pourras passer a l'etape suivant (ubiquitinylee où comment).  [...] Personellement j'utilise un système de purification sur Nickel. Je transfecte les cellules avec l'ubiquitine taggée (car voir une ubiquitination sans transfecter l'Ubi est impossible pour la plupart des protéines). Si la protéine est connue pour être dégradée par le protéasome, il faut bien entendu ajouter un bloqueur pour la visualiser.  [...]

[Génétique] Fonctionnement biochimique dominance et récessivité des allèles

J'aimerais savoir ce qui se produit au niveau biochimique lorsque qu'on est en présence de 2 allèles un dominant et un récessif d'un gène. est-ce que la dominance se traduit par une inhibition de l'expression de l'allèle récessif sur le chromosome homologue, ou est ce que les deux protéines (codées par le gène étudié) sont produites mais l'une d'elle interagit préférentiellement et exprime le phénotype associé.  [...] il y a des mutations qui modifient l'expression des gènes. Je ne connais pas d'exemple ou une protéine mutée modifie l'expression de la protéine sauvage.  [...]

[Biotechnologie] Ogm absorption

Bien souvent on observe de gros soucis d'expression type formation d'agrégat de protéine (ici on peut imaginer qu'étant dans des conditions de surexpression l'effet est exacerbé) Ou encore il impossible de former des ponts dissulfure dans le cytosol d'une souche de coli.  [...] Ou encore le gène s'intégrant n'importe ou il peut intérompre un autre gène cela pourrait avoir pour effet de changer son niveau expression ou encore aboutir à la formation de protéines chimériques dont les conséquences seraient inconnues.  [...]

[Biologie Moléculaire] Comment savoir qu'un ARNm est entier ?

Autrement, ce qui me fait penser que ça pourrait être une nouvelle isoforme, c'est que dans une protéine très proches, il a été observé des sites d'initiation alternatif qui donne naissance à des protéines entières et tronquées. De plus, en faisant des PCR le long de mon messager, j'observe qu'il y a des zones beaucoup plus difficiles que d'autres à amplifier (mais ça peut s'expliquer de plein de façons je pense...).  [...] Les bandes inférieures peuvent avoir leur expression régulée par le niveau d'expression de la protéine à 100 kDa, ce qui ne nécessite pas qu'ils soient des isoformes de celle-ci.  [...]