• Forum - Protéines, Intérêt, Activité

Immunoblot

Et pour le western, on détecte les protéines avec un anticorps dirigé contre la protéine d'intérêt, cet anticorps lui-même porteur d'une activité détectable (fluorescence, activité enzymatique, radioactivité).  [...] Lorsque l'on arrête le courant électrique et que la migration s'achève, les protéines légères auront migré plus vite et seront donc en bas du gel alors que les lourdes seront plus en haut du gel.  [...]

[Biochimie] Rendement et facteur de purification

Normalement, il y a notre protéine d'intéret A + pleins d'autres protéines dans l'extrait initial. On a donc une activité totale x dans cet extrait qui est proportionnelle à la quantité de A dans l'extrait.  [...] Quand on purifie, normalement élimine un maximum les protéines non-A, et perd un peu de A, on obtient donc une activité totale y différente de x... à partir de là, il faut calculer les rdts et facteur de purif, et c'est là que le bat blesse car je ne saisis pas qui représente quoi.  [...]

[Biochimie] pH protéines hydrosolubles animales

Le pH des protéines hydrosolubles n'a pas d'importance dans la solubilisation des protéines. Il faut simplement être dans un tampon permettant de maintenir les protéines en solution.  [...] Comment pourrai-je vérifier que les protéines d'intérêt sont bel et bien dans ma solution Par un dosage par la méthode de Bradford par exemple.  [...]

[Biochimie] Purification de la catalase du foie de rat.

On réalise une dénaturation des protéines pour les détruire sauf la catalase. On réalise des fractionnements sur une colonne d'hydroxylapatite et on mesure l'activité catalasique et l'absorbance pour vérifier la pureté. Je n'ai pas vraiment saisi l'intérêt de cette purification et du TP.  [...] Je pense que le but était tout simplement de vous montrer comment on procède pour l'étude d'une protéine (purification, dosage, test d'activité...). Et la catalase a dû être choisie parce que les personnes qui vous font ce TP ont un protocole déjà préparé pour cette enzyme.  [...]

[biochimie] activité spécifique/activité totale

Bonjour, c'est la première fois que je me sers de ce forum et je ne comprend absolument pas comment créer ma propre question ^^.   [...] Dans mon cours il est dit que l'activité totale évalue la quantité de protéine d'intérêt dans le milieu et que l'activité spécifique évalue la quantité relative de protéine d'intérêt dans le milieu.  [...]

[Biologie Cellulaire] Séquence nucléotidique des protéines.

Effectivement, ce serait plutôt de séquence peptidique dont il faudrait parler. C'est donc soit une erreur, soit un abus de langage renvoyant à la séquence du gene ou de l'ARNm codant pour la dite protéine.  [...] L'idée peut être ici de suivre l'expression protéique de la protéine d'intérêt en suivant l'activité de l'enzyme rapportrice.  [...]

[Biotechnologie] Quelles protéines d'intérêt médicale ne peuvent être synthétisé qu'en cellule eucaryotes

La transfection stable permet de modifier le génome d'une cellule et de lui faire exprimer un gène d'intérêt, pas forcemment pour le produire en masse, mais plutôt pour l'étudier ou étudier son influence. Le seul inconvénient est que faire du stable n'est pas forcément évident et que ça ne fonctionne pas ou très mal pour certaines protéines mais ça reste des cas relativement rares et la plupart des gènes peuvent être transfectés en stable.  [...] Je connais bien les avantages et inconvénients des transfections stables, je fait justement un rapport dessus et pour étoffer un peu le truc je souhaiteais donner des exemples applicable à la biotech ou à la médecine, comme par ex la sytnhèse de protéines possibles uniquement chez les eucaryotes.  [...]

[Biochimie] Activité enzymatique

Je cherche à doser l'activité d'une enzyme impliquer dans l'amylolyse. Je travaille sur des bouilles de farine que je resuspend dans du sérum physiologique. J'ai besoin de centrifuger à 10 000g et je me demande si je ne précipite pas mon enzyme d'intérêt. Comme je n'ai aucune expérience en protéine/enzymo je sollicite votre aide.  [...] Ca me rassure si les protéines ne précipite pas dans du sérum physiologique, c'est déja une très bon point à vrai dire. Par contre il est quasiment impossible de solubiliser le culot et même de le pipetter(c'est de l'amidon bien pateux style maizena en plus compacte) a moins de chauffer fortement, ce qui a mon avis va alterer l'activité enzymatique.  [...]

[Génétique] Retard sur gel

mais l'on voie 2 bandes car. la plus petite bande il n'y a qu'un site fixé par la protéine, la plus grande bande car il ya les 2 protéines fixés.  [...] Ou alors comme tu dis un autre facteur de transcription à la place de la protéines couplé au FT. Mais dans ce cas dans les deux FT il y aurait un activateur et un inhibiteur car je vois pas l'intéret de 2 activateurs ou inhibiteurs si ils se marche dessus.  [...]

Passage de la membrane plasmique par les protéines

ces protéines irait dans le cytoplasme donc ne serait pas directement dégradé (c'est le point clef je crois). Si tu considères un eucaryotes unicellulaire, il n'y a pas d'intérêt évident à récupérer les protéines du milieu si ce n'est pas pour les digérer.  [...] Par contre mitochondrie et chloroplaste ne peuvent pas produire elle même leurs protéines, il y a donc un grand intérêt à être capable d'importer les protéines (en réalité cette dernière explication est très bancale car elle raconte l'histoire évolutive à l'envers, car à la base mitochondrie et chloroplaste pouvaient fabriquer leurs protéines, mais leurs gènes ont été intégré à celui de l'hôte, mais cela nous éloigne de ta question).  [...]