• Forum - Protéines, étapes, Protocole

[Génétique] Extraction d'ADN plasmidique de bactéries

été contaminée par des protéines et je me demandais avec quelles étapes de mon protocole cela a t'il pu arriver et pourquoi.  [...] J'ai la présence de composés aromatiques et de très peu d'éthanol dans ma solution, mais je me demande comment j'ai pu contaminer ma solution, est ce du au tampon que j'ai utilisé pour solubiliser et dénaturer les protéines.  [...]

protocole analyse d'ADN

Voila quelqu'un connaitré le procédé d'extraction de l'ADN pour reconnaitre un suspect (protocol expérimental)Merci d'avance.  [...] de manière général, il faut casser les cellules, éliminer les débris celulaire, par centrifugation. éliminer les ARN, par des RNAses ou par des méthodes chimiques couplées aux autres étapes du protocole. il faut ensuite éliminer les protéines, souvent par un mélange phénol-clhloroforme, puis faire précipiter l'ADN à l'éthanol (en présence de sels) ou isopropanol.  [...]

[Biochimie] Extraction et dosage

Bonjour. Le professeur nous a donner un Tp a rechercher alors que nous n'avons pas encore fait d'exemple au labo. Le terme est. Protocole d'extraction de protéines enzymatique a partir d'un cotylédon de graines d'arachide. Sur le net j' ai pu avoir une idée des dispositifs et solutions à utiliser mais je ne connais pas les étapes a suivre proprement dit quand il s'agit d'un cotylédon d'arachide qui est assez particulier.  [...] S'il vous plait j'ai besoin d'indication. L'exercice est a présenter dans les plus brefs délais. Merci de m'aider.   [...]

[Biologie Cellulaire] Extraction protéique pour western blot

Salut, voilà un petit protocole rapide pour l'extraction des protéines. Attention, vu que tu n'as pas précisé quel est le type de cellules que tu utilises, je te donne celui que j'utilise. extraction de protéines à partir de cellules de mammifères Hela (marche avec pleins d'autres types cellulaires bien évidemment).  [...] Même si mon protocole est peut être trop long, il est néanmoins complet, et peut être fait en une 1/2 journée. Au moins, il pourra comprendre toutes les étapes, savoir ce qu'il y a dans le tampon, savoir combien il mets de protéines pour son gel... Bien sûr que c'est pas primordial pour juste vérifier si ta prot est bien là dans ton extrait, mais bon, j'imagine que si sa manip marche, il va devoir en faire d'autres, avec peut-être plusieurs boites, donc il faudra mettre une quantité équivalente pour chaque puits.  [...]

[Biologie Moléculaire] ligation

En pratique, on travaille rapidement et à froid entre chaque étape (afin d'éviter que le plasmide reste trop seul en solution et se circularise).  [...] Enfin, n'oublies pas que tu as dois toujours faire des étapes de vérifications entre chaque étape de ton protocole afin d'éviter de progresser dans le protocole si l'une des étapes n'a pas marché.  [...]

Génétique

2eme etape. tu ordonnes ces BACs avec une stratégie de fingerprinting (digestion de chacun de ces bac par une enz (hindIII par ex) et tu compares les profils pour rechercher les ressemblances et donc les bacs chevauchant). tu peux aussi les ordonner avec d'autres stratégies, hybrides irradiés par exemple.  [...] 4eme étape. tu analyses les sous clones de chaque bac pour reconstituer la seq de chaque BAC. puis tu analyses les séquences de tes bacs précédemment ordonnés pour reconstituer la séquence du chromosome.  [...]

[Divers] protocole expérimental

ce n'est pas un protocole expérimental. Ce sont des résultats attendus (et encore, on ne comprend pas grand-chose... tu as le droit de faire des phrases ou des bouts de phrases, parce que là, si on ne sait pas que tu parles de feuilles, on est perdus).  [...] La question est. Proposer un protocole expérimentale permettant d'obtenir le développement d'une plante entière à partir de cellules prélevées sur un végétal.  [...]

[Biochimie] Preparation et analyse de plasmides

Apres avoir recupéré les bacteries, un des etapes du protocole etait.  [...] En fait, on a fait notre electrophorese sur plusieurs especes de E.coli, HRPN PGAG PCK3 et PLTR avec ECOR1 et HINDIII, une autre chose que je n'ai pas comprise, c'est. Est ce que c'est enzymes de restriction vont séparer les plasmides avec le même nombre de fragments A priori non.   [...]

protocole d'extraction d'ADN

je travail sur l'extraction de l'ADN à partir des bactéries (LES STREPROMYCES), je cherche des protocoles d'extraction d'adn pour les bacteries mais je n'trouve que mes noms mais pas de protocole s'il yas quelqu'un qui peut m'aider.  [...] L'ADN plasmidique, court (~10³ paires de base), parvient à se reformer et reste en solution. On sépare alors les espèces par centrifugation. Les protéines précipitées, sont également éliminées avec le détergent et l'ADN chromosomique.  [...]

[Biochimie] Pepsine

1. Etape intraluminale. les prot. sont catabolisées en AA et peptides. Les enzymes protéoliptiques, synthétisés par les formes exocrines de l'appareil digestif, sous la forme de proenzymes (ou zymogènes) inactifs sont.  [...] Ensuite j'ai fait quelques recherches sur internet pour aboutir au fait que la pepsine hydrolisait bien... mais quoi les liaisons peptidiques, les protéïnes, ou bien.  [...]