• Forum - Protéine, Rendement, Enzyme

[Divers] Aide sur proteine enzymatique

Tout d'abord la synthes d'une proteine, quelle soit enzymatique ou pas c'est la meme chose, donc sert toi de se que tu sais sur la synthese des proteines.  [...] Les facteurs suseptible de modifié l'activité d'une proteine enzymatique sont trés nombreux mais je pense qu'il faut que tu reflechisses au concentration de substrat present dans le milieu.  [...]

[Biologie Moléculaire] Purification Protéines Tag 6His

Ce qui arrive parfois avec le [His] 6 c'est qu'il se replie sur la protéine, du coup le rendement de fixation est moisi. Une petite dégradation de la protéine pourrait empêcher cela et augmenter l'affinité de cette version pour les billes. Ce phénomène est totalement protéine dépendant.  [...] Ce qui arrive parfois avec le [His]6 c'est qu'il se replie sur la protéine, du coup le rendement de fixation est moisi. Une petite dégradation de la protéine pourrait empêcher cela et augmenter l'affinité de cette version pour les billes.  [...]

difference entre le ph optimum et le ph isoelectrique

j'ai une question, j'espère que vous pourrez m'aider. quelle est la différence entre le ph optimum et le ph isoélectrique, vu que tous les deux font qu'en milieu plus acide, l'acide aminé (la protéine, enzyme) est de charge positive, alors qu'en milieu basique celui ci est de charge négative.  [...] Le pH optimum est le pH où l'enzyme fonctionnera le plus efficacement (meilleur rendement) tandis que le pH isoélectrique comme tu l'a indiqué est un outil pour définir sa charge en fonction du pH.  [...]

[Biochimie] Paragraphe à faire sur les enzymes

L'activité des protéines contribue à la réalisation du phénotype. Comment les caractéristiques des enzymes leur permettent-elles d'intervenir dans la catalyse Après avoir défini une enzyme, vous décrirez les modalités de son activité et les facteurs physiques qui modifient ces modalités.  [...] Inhiber une enzyme, c'est bien la rendre inactive pendant un moment Et augmenter son rendement c'est en augmentant la quantité de substrat dans la réaction.  [...]

[Divers] enzymologie aide

un extret cellulaire contient 200mg de proteine et 20ug de ce extrait catalysent la transformation de 0.95 umol de substrat en 5mn.  [...] la fraction précipité contient 40mg de proteine et 20ug de cette fraction catalysent la transformation de 2.3 umol de substrat en 2 mn.  [...]

[Biologie Moléculaire] séquençage ADN

Je séquence directement mon produit PCR. Je pourrais l'integrer dans un vecteur mais cela prendrais trop de temps car je n'ai pas seulment ce fragment (un exon) à sequencer mais j'ai 50 autres exons du coup je m'imagine vraiment pas faire 50 clonages. Par contre j'ai entendus dire que séquencer à partir de vecteur c'etaies beacoup plus jolies au niveau des séquences donc peut être que sa vaut le coup de le faire pour certains fragments.   [...] Au début du message je signalais que ces plasmides de TA cloning dérivaient du pUC. Ils sont optimisés pour améliorer le rendement du clonage des fragments de PCR. Du coup en ouvrant un pUC tout bête avec une enzyme de réstriction qui génère un fragment à extrémités franches tu devrais pouvoir cloner tes PCR mais le rendement ne sera peut être pas très bon.  [...]

[Biotechnologie] batch simple et batch soutiré

D'un autre coté, j'ai batch soutiré. un seringue avec mes billes d'enzyme, puis j'ajoute le substrat, et ma seringue etant relié a un petit robinet, j'ouvre le robinet de façon a faire écouler environ 1 goutte toute les 2sec.(environ 10min pour que tout s'écoule).  [...] Mais je n'arrive pas a comprendre pour on obtiens un meilleur rendement avec un batch simple a enzyme fixée, qu'avec le batch soutiré à enzyme fixée.Car moi je m'attendais, a avoir un meilleur rendement avec le batch soutiré du fait qu'il y avait un flux.  [...]

[Biologie Moléculaire] Séquençage non réalisable sur certains produits PCR

2. Ensuite lors des PCR j'ai dans un premier temps essayer avec l'enzyme Ex taq. j'obtenais des produits de PCR de très faible intensité (mais visible en augmentant l'exposition aux UV.  [...] avec l'enzyme Ex taq. j'obtenais des produits de PCR de très faible intensité (mais visible en augmentant l'exposition aux UV).  [...]

[Evolution] Intérêt de la Photorespiration & évolution.

Comment expliquer qu'une enzyme pourtant très ancienne et très répandue n'ai pas subi de mutation qui du moins lui ai favorisé un avantage sélectif lui permettant de supplanter une Rubisco au rendement imparfait.  [...] Les chercheurs en génie génétique planchent depuis un moment pour retirer cette activité carboxylase... sans succès. Serais ce la preuve que cette double spécificité de substrat soit trop fine et que l'on ne trouve ainsi pas se séquence codant l'enzyme avec une spécificité simple pour le dioxyde de carbone J'imagine qu'a défaut de supprimer cette double spécificité on doit également chercher à diminuer le Km de l'enzyme pour l'oxygène.  [...]

[Biochimie] Expression et purification de protéines recombinante en milieu minimum

Expression et purification de protéines recombinante en milieu minimum.  [...] Je cherche à améliorer mon rendement dans la production d'une protéine recombinante (7000 Da) dans E.Coli, et dans un milieu minimum enrichis en 13C et 15N. Conditions de cultures, Milieu...etc.  [...]