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[Biologie Cellulaire] Immunofluorescence et cycle cellulaire

Je souhaite identifier dans quelle phase du cycle cellulaire ma protéine est exprimée en immunofluorescence par co-marquage. Pourriez-vous m'indiquer des marqueurs qui fonctionnent très bien pour différentier les différentes phase du cycle.  [...] Oui je pense que c'est une bonne idée,car la protéine CENP-F commence à s'accumuler dans la matrice nucléaire durant la phase S, atteignant une expression maximale durant la phase G2. Au début de la mitose, CENP-F se concentre sur les kinétochores où elle persiste jusqu'en métaphase.  [...]

[Biologie Cellulaire] Synthèse de la Cycline D

je ne suis pas calé sur le cycle cellulaire, mais déjà ce que tu donnes ne permets pas de dire si la protéine est nucléaire ou cytoplasmique, puisque tu dis qu'elle induit la phase G1, mais tu ne dis pas comment. Bien sûr, l'expression de la Cycline D commence obligatoirement dans le noyau.  [...] Le gène est dans le noyau, la transcription, c'est dans le noyau. Mais la traduction, donc la synthèse de la protéine Cycline D sera forcément hors du noyau. Quant à son rôle, elle pourrait effectivement agir dans le noyau, comme tu le suggères, en activant l'expression de gènes, si le complexe cycline D/cdk était un facteur de transcription, mais on peut imaginer aussi qu'elle pourrait agir autrement en étant dans le cytoplasme.  [...]

[Biologie Cellulaire] Immunofluorescence

oui mais si ma protéine est nucléaire mes anticorps fluorescent ne vont pas passer dans le noyau donc comment dois-je faire pour mettre en évidence cette protéine dans le noyau.  [...] donc si j'ai bien compris pour mettre en évidence la pr ésence d'une protéine nucléaire, on utilise des anticorps contre cette protéine et des intercalants de base et donc si on a un mélange des 2 cela vaut dire que la proétaine est pr ésente dans le noyau.  [...]

[Biochimie] Extraction proteine nucleaire nematode

Sinon tu peux taggé ta proteine mais ca va te prendre du temps, si tu as la séquence tu fais un histidine tag ou une fusion avec la gst et tu isole sur colonne d'affinité. Mais pour ca va falloir faire des constructions, les microinjecter, et avoir des vers transgéniques.  [...] Bon je ne suis qu'étudiant pour le moment, donc je te déblatère ce que j'ai vu en cours. J'ai un peu bossé sur le nématode en stage mais j'ai pas purifié de proteine.  [...]

[Biologie Cellulaire] Meiose des ovocytes

Merci pour votre reponse,vous avez raison,ma question n'a pas été trop claire,mon souhait est celui de savoir,pour quoi à la fin de chaque cinèse de la méiose il y a formation de deux cellules ayant des formes inégales(la forme de l'ovocyte formée n'est pas comme celle du globule polaire formé).   [...] Au terme de cette phase de maturation nucléaire un ovocyte primaire a donc fourni un seul gamète, qui est un ovocyte secondaire.  [...]

[Biologie Cellulaire] Emerine

- La lamine est une protéine qui est en contact avec la membre nucléaire interne. Elle est en contact grâce à un farnesyl de la membrane nucléaire interne (la membre d'un noyau possède des lipides ) et un acide aminé de la lamine. la cystéine. Elle possède aussi une séquence NLS de reconnaissance.  [...] Cependant, après je parle d'émerine, c'est une protéine de la membrane nucléaire interne ou pas Je ne suis pas sur, mais elle sert elle aussi de fixation à la lamine sur la MNI.  [...]

ubiquitine et protéasome

Le protéasome se situe au niveau cytosolique non Si ma protéine X d'intéret s'exprime au niveau nucléaire, et si je surexprime la protéine Y permettant d'apporter X à la voie de dégradation. est ce que je peux par un marquage spé de la protéine X montré sa dégradation par exemple si le marquage de X se déplace du compartiement nucléaire vers cytosol.  [...] si apres inhibition du proteasome, le niveau d'expression cellulaire de ta proteine est plus grand, tu pourras passer a l'etape suivant (ubiquitinylee où comment).  [...]

[Biochimie] Du DTT dans mon buffer de RT-PCR

Donc les protéines membranaires et sécrétées pr ésentent souvent des ponts disulfures alors que peu de protéines nucléaires ou cytosoliques en ont.  [...] Presque à chaque coup, une protéine sécrété en contient au moins un, alors que je n'ai encore jamais vu de ponts SS dans une protéine nucléaire ou cytosolique.  [...]

[Vocabulaire] Peptide antigénique.

Parler de génome cellulaire, encore une fois c'est un peu hasardeux. Un antigène peut être sur une protéine endogène (donc codée par le génome nucléaire ou mitochondrial), ou exogène (une bactérie, un virus, un parasite, un peptide synthétique, etc...).  [...] Un antigène peptidique peut être sur une protéine endogène (donc codée par le génome nucléaire ou mitochondrial), ou exogène (une bactérie, un virus, un parasite, un peptide synthétique, etc...) (il existe des antigènes de nature non peptidique).  [...]

[Biochimie] Extraction d'une protéine nucléaire pour WB

Le probleme c'est que ma protéine est pas très exprimé et les anticorps ne sont pas de très bonne qualité (et les tampons d'extraction pas forcement les meilleurs), au final j'ai beaucoup de non spécifique, pas beaucoup de signal au niveau de ma bande.  [...] un conseil pour les grosses protéines comme la tienne, il est recommandé de faire un transfert sur la nuit (ca transfert tres mal).  [...]