• Forum - Protéine, Fiable, Contrôle

[Biologie Moléculaire] normalisation western blot après fractionnement cellulaire

Je fais un fractionnement cellulaire et j'obtiens la fraction cytosolique, membranaire, nucléaire et cytosquelettique. Ensuite je fais un western blot pour ma protéine d'intérêt dans chacune de ces fractions mais pour pouvoir la quantifier, je cherche une protéine contrôle pour normaliser mes résultats dans les fractions cytosoliques et membranaires en premier lieu.  [...] Quelle protéine peut être assez fiable à utiliser comme contrôle dans chacune de ces fractions.  [...]

mesure de l'expression d'un gene

Il est donc possible de remplacer le gene en question par un gene rapporteur (dont l'activité de la proteine est facilement quantifiable B-galactosidase, luciferase etc...).  [...] Le seul inconvénient, mais qui est déterminant. il faut posséder une anticorps fiable dirigé contre la protéine d'intérêt.  [...]

[Biochimie] Etude de la phosphorylation d'une protéine

Heureusement cette protéine est couplée à l'EGFP, j'ai donc pu mettre au point une immunoprécipitation pour la séparer des autres protéines cellulaire sur SDS-PAGE. En parallèle je réalise un blot avec l'anticorps dirigé contre la protéine virale. Ensuite je découpe sur mon gel coloré au nitrate d'argent la bande immunoprécipitée correspondant à ma protéine.  [...] D'après mon expérience, ceux-ci sont peu fiable. Surtout que si ta protéine n'est pas purifiée, tu as pas mal de chance d'allumer une protéine contaminante.  [...]

[Biochimie] Questions à propos de l'activité enzymatique (1èreS)

Conformation est utilisee pour signifier la structure 3D grossierement, cad tout ce qui est repliement dans l'espace, interactions resultantes (l'acide amine 335 peut etablir des interactions dues a ses proprietes biochimiques avec l'acide amine 22, par exemple), la presence ou non de plusieurs sous-unites formant la proteine fonctionnelle, bref.  [...] Elles sont artificielles dans le sens où on les fait produire à un organisme autre que celui de provenance de la protéine. Mais la protéine est suffisamment identique à la protéine naturelle pour qu'on puisse observer des activités enzymatiques ou autres de manière fiable.  [...]

Expression de protéines

J'ai fait une expression de protéine taguée Histidine contenue dans un vecteur d'expression pTrcHis2B (protéine de Plasmodium falciparum ) dans des bactéries d'expression Rosetta 2, seulement lors de l'extraction de cette protéine puis dépôt sur gel j'ai 2 tailles différentes de cette même protéine.  [...] Si tu es certain que les deux bandes correspondent à ta protéine (la mass spec est de loin la méthode la plus fiable, bien plus qu'un WB), tu as probablement eu une protéolyse spontanée. Il faudrait savoir si ta bande de plus haut poids correspond à la masse attendue pour ta protéine, auquel cas tu aurais de la protéine intacte en fraction soluble et de la protéine clivée en fraction insoluble.  [...]

[Génétique] Déterminants génétiques des individus

sans jamais avoir vérifié je dirais que oui c'est blanc puisque là, la couleur n'a rien a voir avec la mélanine contrairement a la couleur de la peau,  [...] Pour revenir à cette histoire de morale génétique. imaginons qu'un gène contrôle notre sens moral, cela voudrait dire que selon l'allèle, la version du gène qu'on a, on sera moralement fiable ou un sociopathe. De la même façon que ça gère la couleur blond ou brun des cheveux.  [...]

division cellulaire

Du fait de ce mécanisme et d'autres mécanismes de contrôle (phase G2), la réplication de l'ADN est un processus extrêment fiable (erreur de l'ordre de 1/10 9 ).  [...] Aprés la réplication, l'adn est décondensé, il est impossible de pratiquer un mitose sur de l'adn décomdenser, lors de la profase l'adn se condense, et on voi l'apparition de duseau mitodique, qui ne serviron que dans l'anaphase, vien ensuite la methaphase la condensation est maximal, les chromosome forme un lot au millieu de la cellule appelé plaque équatorial, lors de l'anaphase les chromosome se casse au niveau de leur centromere pour ne former plus qu'un chromosome seul ou a une chromatide, grace au fuseau mittique les chromosome mono chromatique vont ainsi migrer au pole de la cellule la fin de la mitose est caractérisé par la télophase,   [...]

[Biologie Moléculaire] Criblage d'une banque d'ADNc

Comment est-ce que tu fais pour trouver la séquence précise d'un gène à partir d'une protéine sinon Je doute fortement qu'on soit capables de produire les doigts dans le nez des anticorps contre n'importe quelle protéine (et à condition d'avoir déjà produit la protéine, ce qui est loin d'être une mince affaire...).  [...] - on veut chercher la séquence d'un gène codant pour une protéine présente dans Xcellule dans Xcondition(donc on vérifie de ce fait si elle est présente dans cette condition et savoir la séquence du gène codant). et puisque le séquençage de protéines est trop difficile et peu fiable que le séquençage d'un ADNc on essaie de.  [...]

toxicité des vaccins - Page 8

Si ce n'est pas le cas, je ne vois pas en quoi l'affirmation D'un autre côté il n'a pas pu être démontré que le vaccin était responsable de l'apparition de maladies telles que la sclérose en plaque (alors que le nombre de personnes vaccinées est largement suffisant pour faire des études statistiques très fiables). peut être gênante.  [...] En outre, comme je l'ai déjà dit, le préservatif, personne ne l'utilise toute sa vie une fois qu'il a un partenaire fiable qui a fait le test de dépistage du HIV. Plus de préservatif, plus de protection contre les autres MST, dont l'hépatite B.  [...]

[Biologie Moléculaire] [biologie moléculaire] Swissprot

Ici c'est son numero d'accesion dans les bases de donnees. Lors de la soumission de la sequence la banque donne un numero automatique a la sequence. ce numero est unique et permet de retrouver ta sequence. Si plusieurs morceaux de proteines ont ete sequencees independament tu peux avoir plusieurs numeros (a toi de trouver celui qui correspond a la proteine entiere).  [...] SwissProt est une banque de données généralistes de protéines, très fiable si l'on croit ce qu'y disent les mecs Càd que les séquences publiées dans SwissProt sont contrôlées et passent par une annotation manuelle (regarde dans une fiche, tu verras les champs commençant par CC.  [...]