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selection de cellules par la technique de l'hybridation in situ

L'hybridation in situ se fait effectivement sur des cellules mortes, sur lame, car il faut perméabiliser la membrane pour pouvoir faire rentrer les sondes... Les sondes sont des ARN complémentaires de ton ARN cible, couplées à un fluorophore par exemple, ou alors c'est des sondes chaudes (radioactives).   [...] On incorpore dans la sonde des UTP-dig. On revele ensuite avec un anticorps primaire anti-dig puis un anticorps secondaire couplé à la peroxydase. Enfin on ajoute au milieu deux reactifs (dont je vous eparge les noms complets) NBT et BCIP. Le produit de réaction est bleu/violet.  [...]

[Divers] Détection enzymatique

Le principe de la détection d'une activité enzymatique. Et bien sur le principe, c'est simple je dirais. au début t'as un un réactif et qui, avec autre chose, donnera lieu à une réaction et formera un produit. Or, bien souvent, cette réaction met beaucoup de temps avant de se terminer.  [...] Normalement, le substrat devrait diminuer, et la quantité de produit devrait augmenter. Il y a aussi un autre cas de figure, c'est que l'enzyme est encore complexée avec ce constituant. Enfin bref, au final il faudrait que tu aies par exemple dans le cas du produit, des anticorps fluorescents qui florescent quand ils sont en contact du produit, et donc tu comptes le nombre de lumières et après t'as ton nombre de produits, t'as pris soin bien sûr au passage de chronométrer et au final t'as ta vitesse de réaction.  [...]

abzymes?

Non, c'est bien abzyme, contraction de a nti b ody et d' enzyme. En fait, on met à profit le fait que la structure du site actif d'une enzyme à une excellente complémentarité avec celui de l'état de transition du produit de la réaction catalysée. Les abzymes sont donc des anticorps reconnaissant un antigène qui est un analogue chimique de l'état de transition (qui est forcément instable, donc non isolable) de la réaction que l'on souhaite catalyser.  [...] OK. Je vois a peu pres. Mais quel est l'utilite de ce procede Dosage Détection de substances Réaction.  [...]

[physiologie] Anaphylaxie

Le système immunitaire apprend à reconnaître cette substance et produit des anticorps dirigés contre elle. Malheureusement, en cas de choc anaphylactique, au lieu d'avoir une réaction immunitaire modérée, on a une réaction de plus en plus vive à chaque exposition.  [...] Ce sont des réactions biochimiques, et le système immunitaire est aussi sollicité (il me semble que la synthèse ou la libération de fortes quantités d'histamines est impliquée surtout, pour les anticorps, je ne sais pas).  [...]

même marquage immunofluorescence dans le vert et le rouge

il faut faire attention a l'espèce reconnue par un anticorps mais aussi a l'espèce chez qui il est produit. Ex. deux secondaires, un anti chèvre et un anti lapin, anti lapin fait chez la chèvre, il peut y avoir cross réaction.  [...] En fait, je pense savoir à quoi c'est du, j'ai re-vérifié les anticorps secondaires et il s'avère qu'il y a deux anticorps anti-souris dans la boite. un produit chez la chèvre et l'autre chez le lapin. le hic c'est que sur les aliquots, la provenance n'est pas indiqués.  [...]

[Immunologie] Tolérance et rejet immunitaire

Prévoir la réaction (tolérance ou rejet) suite à la tentative de greffe de peau, d'une part d'une souris AA sur une souris (hybride) AB, et d'autre part d'une souris AB sur une souris AA.  [...] une réaction immunitaire cest lorsque l'organisme se défend face à une agression.. là cest une réaction immunitaire spécifique donc il y aura production de lymphocytes et donc d'anticorps pour lutter contre le corps étranger.  [...]

[Microbiologie] Le LPS

lors de la lyse des bactéries, le lipide A est libéré et stimule la réaction inflammatoire (fièvre...). si une réaction inflammatoire est trop forte, cela devient toxique pour l'individu (production de composés toxiques...). cela explique que si on donne des antibiotiques bactéricides alors que la bactériémie est très élevée, on risque de lyser un grand nombre de bactéries et donc libérer du lipide A en masse.  [...] après, l'endotoxine peut être utilisée comme adjuvant dans des vaccins à petite dose. en effet, cette toxine stimule la réaction inflammatoire ce qui optimise l'efficacité des vaccins. en effet, la réaction inflammatoire stimule l'immunité adaptative (production d'anticorps et de cellules mémoires.).  [...]

[Biochimie] Nouvelle bactérie résistante

Ma remarque s'orientait plutôt vers le côté immunologique lié à la pénétration d'un virus dans l'organisme. Si l'on oublie tous les points limitants que gorben a énuméré, il reste malgré tout la réaction naturelle de notre organisme face à une intrusion virale et cette réaction passe, entre autre, par la production d'anticorps (le principe de la vaccination en somme.  [...] On leur a commandé un produit, ils l'ont vendu. J'aimerais bien connaitre leur faute dans ce cas. Pareil pour le gouvernement, mieux vaut prévenir que guérir. Nous avons perdu quoi... 60 millions d'Euros Bien, si le risque s'était révélé réel, les morts aussi auraient pu se compter par millions.  [...]

[Immunologie] Réponse par anticorps

- En plus les anticorps restent en relativement faible quantité dans le sang. Pour qu'il y ai une réaction sur une protéine dérivé du soi qui reste en faible concentration (et bien sur sans adjuvant) ya peu de chance.  [...] - Et puis même si il y avait une réaction contre l'anticorps cela finirait par détruire le LB qui le produit c'est tout, donc pas de grosse conséquences (ça se trouve ça nous arrive se moment ).  [...]

Immunologie

J'ai fais de la coloration immunohistochimique indirecte et je n'arrive pas à comprendre le principe de la révélation au DAB. Je sais que le colorant brun se produit après la réaction du DAB avec la peroxydase qui se situe sur l'anticorps secondaire mais ce n'est vraiment pas clair pour moi.  [...] En fait dans la réalité la plupart du temps l'anticorps secondaire est couplé à la biotine et on ajoute par dessus la peroxydase couplée à la streptavidine (la biotine et la streptavidine ont une très forte affinité). Cela permet d'amplifier le signal (plusieurs enzymes par anticorps) et avoir le choix de la technologie de révélation (En changeant la streptavidine mais en utilisant le même secondaire). Pour votre culture personnelle.  [...]