• Forum - Production, Protéine, Système, Expression

[Biochimie] Purification de protéine recombinante de faible PM

Normalement, faire un western afin de valider la production de la protéine dans le système d'expression est la première chose à faire. Cela peut éviter de gaspiller inutilement le matériel nécessaire à la purification de la protéine.  [...] Je ne suis pas tout a fait d'accord. Tu DOIS voir ta proteine en coomassie. Si tu ne la vois qu'en WB tu peux considerer que l'expression n'est de toute facon pas suffisante pour une purif alors il faut travailller les conditions d'induction, rien ne sert de depenser ton temps et ton energie en WB.  [...]

[Biologie Moléculaire] Système d'expression de prot invitro (cell free)

Je dois produire une protéine grande environ 160 kDa avec un système de production transcription / traduction provenant de mais, homme, lapin et bactérie. Me protéine est une protéine de levure.Voilà ce que je pensais faire.  [...] Ma question est la suivante. Quelqu'un a-t-il déjà utilisé ce genre de kit pour un application similaire (grande protéine - GST - et levure) Si oui lequel avez vous utilisé.  [...]

Aide article : Système d'expression protéique hautement régulé, modulé et à haut niveau (PBAD)

Pour les cellules humaines, le système le plus utilisé actuellement est le système Flip-In T-Rex de Thermo Fisher. Ce système permet une expression uniforme, précisément contrôlée, avec un temps d'activation faible et pas ou peu de fuites transcriptionnelles en absence d'induction.  [...] Je ne connais pas les taux d'expression que l'ont peut atteindre avec ce système, ça n'intéresse pas grand monde d'ailleurs. On se dirige plutôt vers une expression proche des niveaux endogènes que l'inverse ces derniers temps.  [...]

Trangénèse > caroténoides > cossupression de gène ...

pour moi, la cosuppression d'un gène ou gene silencing est le fait d'éteindre l'expression d'un gène, c'est à dire d'entrainer l'arrêt de la production de la protéine qu'il code, en provoquant la destruction des ARNm de ce gène au fur et à mesure de leur production.  [...] En gros, si tu introduit par transgenèse une construction qui produit l'ARNm de ton gène-cible en grande quantité. Le système de régulation de l'expression du gène va détecter l'excès d'ARNm et détruire tous les ARNm de ce gène. Du coup, au lieu d'augmenter la quantité d'ARNm de ce gène et donc la quantité de protéines, on obtient l'effet inverse.  [...]

questions de P1

Alors j'explique mon point de vue. La récessivité se définit par rapport a un phénotype (tout comme la dominance). Un allèle récessif peut donc très bien s'exprimer en terme de messager et de protéine, sans produire de phénotype particulier, et être donc qualifié de phénotype.  [...] 1 et 2 c'est ca, par contre pour la 3 tout dépend si on parle d'expression du gène et de sa production de protéine ou si on parle d'expression phénotypique...la quesiton est mal posée et ca sent la question piège...d'insinct j'aurai mis A parceque l'on pense directement on phénotype quand on parle d'allèles dominants et récessifs.  [...]

[Biologie Cellulaire] Vecteur d'expression transitoire

Mais comment va se faire l'expression en fait Des facteurs de transcription vont reconnaître le promoteur et l'activer, entrainant l'arrivée de l'ARN polymérase (comme un gène normal).  [...] Tout à fait, c'est ce qu'il faut mettre dans ton vecteur d'expression, et tu peux rajouter aussi entre la séquence codante et le signal de polyadénylation une séquence intronique. Habituellement on utilise celle du virus SV40. L'épissage du pré-ARNm favorise l'export de l'ARNm qui fait partie des régulations de l'expression génique eucaryote, et donc là tu favorise encore une production massive de ta protéine.  [...]

Système A B O

Ta question est très vague... tu veux savoir comment un gène est exprimée, comment il conduit à la production de la substance sans dire protéine.  [...] L'allèle H Qui a une forme récessive et dominante h permet la production de la substance H. cette substance permet l'expression d'un des allèles du système A B O. Ma question, c'est comment cette allèle arrive à la production de substance H.  [...]

[biologie moléculaire] Opéron lactose

salut,je suis désolée mais quelqu'un peut m'expliquer tout ça.je ne connait pas un gene qui s'appelle lacZ',et je demonde pourquoi on doit utuliser IPTG pour provoquer_ meme experimentalement- l'expression du gene lacZ qui vas donner une protéine inactif qui sera besoin d'un complimentair.  [...] L'IPTG est utilisée notement en biotechnologie dans les cas de productions de protéines recombinantes par un vecteur d'expression que l'on fabriquera avec un gène d'une protéine fusion (le gène lacZ ds ce cas ci) qui permettra une lecture du gène controlée et donc une production controlée de la protéine cible.  [...]

[Génétique] svt devoir

on prendre le géne en question, et on le transcrit en ARNm, qui est traduit par le ribosome qui donne une proteine qui a une fonction bien précise, (ici c'est de transporter l'O2 dans le sang),  [...] Imaginons le mélanocyte, une usine produisant de la peinture (pigment) pour la peau. La production de peinture se fait par étapes. Différents ouvriers(protéines) vont ajouter différents produits etc. Si on des ouvriers n'est plus fonctionnel. Il a les bras cassés par exemple(protéine non fonctionnelle issue de l'expression d'un gène altéré).  [...]

[Biologie Moléculaire] Quelles sont les différentes Mitochondries

Absolument pas. Cette différence se limite à une seule protéine. Tout le reste du système de production d'energie est absolument identique. cycme de Krebbs, chaine respiratoire, etc. Mais en bout de chaine, le canal a proton couplé à une ATP synthétase est remplacé par un canal à proton simple.  [...] Surtout qu'il ne faut pas oublier comment se forme une mitochondrie. par division, comme une bactérie (ce qui a beaucoup contribué à la théorie endosymbiotique). Donc ta mitochondrie avec protéine découplante dérive forcement d'une mitochondrie qui ne la possède pas, puisqu'à la fécondation, seul des mitochondries ne possédant pas cette protéine découplante sont présent dans l'embryon.  [...]