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[Biologie Cellulaire] Pharmacologie moléculaire

Bonjour, je ne comprends pas c'est quoi un système d'expression hétérogène que j'ai trouvé dans mon cours de pharmacologie moléculaire pouvez vous m'aider car j'ai cherché sur google mais sans réponse... merci d'avance.   [...] C'est pour la production de protéines recombinantes. Un système d'expression correspond à l'organisme que tu utilises pour exprimer ta protéine (bactéries, levures, cellules d'insectes...). Lorsque tu produits une protéine dans l'organisme où elle est présente naturellement (par exemple si tu produits une protéine humaine dans des cellules humaines ou une protéine de coli dans E.  [...]

Aide article : Système d'expression protéique hautement régulé, modulé et à haut niveau (PBAD)

Vectors Containing the Arabinose PBAD Promoter. Cette article démontre l'avantage d'utiliser un système arC -PBAD (d'un point de vue cinétique, efficacité et peu d'effet secondaire), cependant il date de 1995, j'aimerai savoir si actuellement il existe un système de régulation de l'expression protéique qui le surpasse.  [...] Pour les cellules humaines, le système le plus utilisé actuellement est le système Flip-In T-Rex de Thermo Fisher. Ce système permet une expression uniforme, précisément contrôlée, avec un temps d'activation faible et pas ou peu de fuites transcriptionnelles en absence d'induction.  [...]

[Biologie Cellulaire] Culture cellulaire MDCK

Ensuite quand ils parlent de production de carcinoembryonic antigen (CEA) c'est que ces cellules produisent cette protéine. Pour faire short, le CEA est une protéine de la famille des adhésines qui est normalement exprimée uniquement pendant la vie embryonnaire.  [...] Lors du processus de cancérisation il arrive très souvent que des protéines qui ne devraient plus être exprimées le redeviennent. Ils te le précisent car cela peut fausser l'étude qui tu veux mener. Cela peut aussi expliquer les problèmes que l'on peut rencontrer quand tu veux passer les cellules et que la trypsine ne fonctionne pas de façon optimale.  [...]

Découverte contre le cancer

Cette publication constitue un jalon déterminant dans le programme de recherche du Dr Veillette, qui est un expert international de l'identification des mécanismes moléculaires contrôlant la réponse immunitaire. L'article, qui sera publié online le 28 août 2005 dans Nature Immunology, apporte une preuve génétique du rôle inhibiteur de EAT-2 dans les cellules NK.  [...] Plus spécifiquement, cette découverte établit, à l'aide de souris chez qui la protéine EAT-2 est éliminée par des manipulations génétiques, que la suppression de EAT-2 mène à la production de cellules NK qui sont beaucoup plus efficaces à tuer les cellules cancéreuses.  [...]

mucoviscidose

Merci pour vos réponses, mais j'ai encore une question. En effet, cette protéine membranaire ne s'adapte pas aux cellules mais en quoi cela provoque-t-il la production d'un mucus visqueux, puisuqe si la protéine ne s'adapte pas elle est donc considérée comme absente et dans ce cas ne devrait rien produire.  [...] Effectivement, la mutation delta F 508 est la plus fréquente. Cette mutation provoque un défaut de maturation sur une partie des protéines canaux synthétisé.  [...]

[Biochimie] Comment désagréger des protéines recombinantes?

[Biochimie] Comment désagréger des protéines recombinantes.  [...] Comment désagréger des protéines recombinantes La protéine est produite dans E.coli puis je procède à une extraction protéique, une purification IMAC et un dessalage. Enfin, je la filtre à 0.2um avant de la tester sur cellules mais la protéine d'intêret forme des agrégats après quelques jours de conservations à 4°C ce qui m'oblige à relancer des campagnes de production.  [...]

[Biologie Moléculaire] Méthodes d'étude de l'ADN

Sur la seconde colonne, ce sont les protéines des cellules HelaAAVtCR-SC35GFP qui sont analysées. Ces cellules possède un virus AAV modifié et inactif (pour le moment) dans leur génome. De plus, une transfection stable a été réalisée pour ajouter la séquence codante (ADNc) de la protéine SC35GFP.  [...] Le but de cette était de vérifier la production de SC35GFP, et surtout vérifier son poids moléculaire ainsi que la quantité relative vis-à-vis de la protéine SC35 native. On a donc put en conclure que la protéine SC35 n'est pas trop sur-exprimé (2-3 fois plus dans les cellules SC35GFP+) et que cette sur-expression est stable dans le temps.  [...]

[Biologie Moléculaire] mes échantillons avec le laemmli se transforment en gel !

Pour un western blot je prépare mes échantillons (des surnageants de cellules pour une production de protéine recombinante) dans du laemmli (Tris, SDS, glycérol, bromophenol blue, ß-mercaptoethanol). Jusque là tous va bien, mais après l'étape à 95°C je me retrouve avec une sorte de gel compact dans mon tube.  [...] Vous avez simplement beaucoup de materiel au départ. Si vous pouvez travailler avec moins (exemple. faire de simples WB) vous reglerez votre problème. Sinon (exemple. purif de protéines) il faut simplement soniquer pour fluidifer l'extrait.  [...]

Vaccin hépatite B - Page 4

Le vaccin contre l'hepatite B est effectué par expression d'une protéine dans la levure Saccahromyces cerevisiae. a aucun moment des cellules CHO ne sont utilisées dans la production de vaccin.  [...] 3- Purification de la protéine, éliminant toute trace de cellules productrices, de virus, de produits de dégradation de la protéine, de milieux de culture.  [...]

[Génétique] Production d'interleukine 2

J'ajouterais qu'une production en cellule procaryote me parait-être peu intéressante. cette protéine est glycosylée à différents niveaus, et d'après une brève recherche sur google cela a une forte incidence sur son activité biologique. De plus, je ne suis pas pour la production de protéine de cette taille en cellules procaryotes (problème de production en corps d'inclusions...).  [...] Pour produire la protéine à partir de là, il faut que tu réalises une transfection en cellule eucaryote (HEK293 par exemple) en utilisant un agent de transfection (lipofectamine...). Tu appliques également une pression de sélection par un antibiotique. Là il va falloir attendre un peu et comparer la mortalité de tes cellules avec des HEK non transfectées également sous antibiotique.  [...]