• Forum - Procédé, Production, Technique, Culture, Cellules

[Biotechnologie] Production des anticorps monoclanaux

[Biotechnologie] Production des anticorps monoclanaux.  [...] Hormis la technique des hybridomes, le procédé de production par la technique d'ascite et le procédé par culture des cellules B, quels sont les autres techniques de production des anticorps monoclaunaux qui exsitent, je voudrais avoir des informations sur ça.  [...]

[Biotechnologie] isolation d'hepatocytes par perfusion a la collagenase(help:-( )

bonjoure a tous, dans le but de faire une culture primaire d'hepatocyte, on procede dabord a l'isolation d'hepatocytes apartir du foie entier par la technique de perfusion a la collagenase(dissociation a la collagenase).pourriez vous m'eclairer sur cette technique.  [...] Broyer dans une passoire à thé avec le piston d'une seringue pour récupérer les cellules. Récupérer le broyat dans du PBS-SVF 5%-EDTA 0,1M froid et laver.  [...]

[Biologie Cellulaire] Grattage des cellules, sur glace ?

J'ai une petite question d'ordre technique. Je procède en ce moment à des extractions d'ARN. Pour cela, je dois d'abord gratter mes cellules au fond de flasques, les récupérer et les faire culotter avant de les stocker à -30°C. J'ai l'habitude de gratter des cellules en les gardant sur glace après les avoir lavées deux fois au PBS.  [...] En les grattant tu induis un stress fort, tu as de fortes probabilité d'avoir déclenché des mécanismes, tu as décompartimenté ce qui peut avoir laissé agir des enzymes là ou elles n'auraient pas dues... et tout ces trucs viennent modifier l'état de la cellule, tu n'es plus dans les conditions initiales,  [...]

Extraction d'ADN

La technique pour l'isolement rapide d'ADN mitochondrial (mt ADN) à partir de cellules d'animaux, est basée sur le procédé sélectif de dénaturation alcaline de BIRNHOIM et DOLY et évite l'utilisation de la centrifugation en gradient de densité dans le CsCl.  [...] iL n'y a d'adn que dans la racine du poil, c'est à dire dans les cellules du bulbe foliaire. Le poil n'est qu'une sécrétion protéique de ces cellules.  [...]

La cryogénisation : une utopie ?

On lit toujours que le procédé n'est pas au point car il détruit les cellules... Dans quelle mesure cela est-il grave Une technique avancée pourrait-elle régénérer les tissus, ou les lésions sont trop graves En particulier, les neurones sont-ils touchés.  [...] Donc moins de la moitié ou peut-être moins de 20% de la structure cellulaire est effectivement encodé. Ça paraît incroyable, mais ça marche comme ça depuis des milliards d'années. Tout le reste repose sur des réactions chimiques par cascades d'actions et rétroactions.  [...]

[Biotechnologie] production industrielle d'interferon alpha-1

Je sais pas ce que tu cherches exactement mais j'ai un bouquin entre les mains et je me suis penchée sur la question, il est dit que la fabrication des interferons se fait à l'aide de souches E.Coli recombinantes, la seule exception étant la production de l'IFN beta 1a qui est obtenu dans des cellules CHO recombinantes.  [...] Comme exemple citons la production de l'IFN alpha 2a (Roféron A marque déposée )par les produits Roche (procede utilisant le passage en cellules E.coli K12) les cellules sont d'abord lysées par congélation. puis on les façonne en pelotes contenant les corps d'inclusions recombinants, facilement stockables,ensuite on reprend les pelotes par un tampon et on mélange pour en extraire les protéines avant de séparer le surnageant des débris cellulaires par ultracentrifugation.  [...]

[Biologie Cellulaire] laisse moi de l'embryologie fondamentale

comment il y a un caryotype prénatal où on utilise le sang maternel puis on procède à une filtration pour récupérer les cellules fStales et les mettre en culture..., puis on observe les chromosomes fStales pour diagnostiquer le cas, car la culture des cellules qui baignent dans le liquide amniotique sont venu de la feuillet embryonnaire qui constitue les annexes, comme cette feuillet est venu de l'une des deux cellules de la première division mitotique du Zygote, donc on peut se tremper dans le cas où la cellule responsable à la constitution du feuillet qui se différencie pour avoir le fStus a tous le réserve génétique ( 46 chromosomes, XX / XY ) et l'autre cellule -qui constitue les annexes- porte une anomalie génétique (47chr,Tri21.  [...] Durant toute grossesse, il existe un échange cellulaire entre mère et foetus. Des cellules souches hématopoïétiques ou mésenchymateuses constituent une partie des cellules foetales transférées dans la circulation maternelle [...]

[Biochimie] Comment désagréger des protéines recombinantes?

[Biochimie] Comment désagréger des protéines recombinantes.   [...] Comment désagréger des protéines recombinantes La protéine est produite dans E.coli puis je procède à une extraction protéique, une purification IMAC et un dessalage. Enfin, je la filtre à 0.2um avant de la tester sur cellules mais la protéine d'intêret forme des agrégats après quelques jours de conservations à 4°C ce qui m'oblige à relancer des campagnes de production.  [...]

[Biologie Cellulaire] Effets de la congélation

Son inconvénient est sa toxicité pour la cellule. La solution est donc une décongélation très très rapide pour déjà éviter les phénomènes de déshydratation sur le même modèle que lors de la congélation et puis pour obtenir rapidement un milieu liquide qu'on peut retirer tout de suite pour mettre un milieu de culture autour des cellules sans DMSO.  [...] La surgélation est une technique industrielle qui consiste à refroidir brutalement (quelques minutes à une heure) des aliments en les exposant intensément à des températures allant de -35 °C à -196 °C. Grâce à ce procédé, l'eau contenue dans les cellules se cristallise finement limitant ainsi la destruction cellulaire dixit wikipedia mais ils ont du la prendre d'ailleurs et elle correspond à la réalité.  [...]

Définir la vie... - Page 2

L'hypothèse du caractère néoténique au sens large de l'être humain procède aussi d'une dimension anthropologique et philosophique, soulignée entre autres par le philosophe français Dany-Robert Dufour[1]. du fait de son inachèvement, l'homme serait un être intrinsèquement prématuré, dépendant de la relation à l'Autre, d'où la substitution nécessaire de la Culture à la Nature propre à cette espèce, et sa place particulière dans l'histoire de l'évolution, l'homme se réappropriant le monde par la parole, la croyance symbolique et la création prothétique, c'est-à-dire la technique.  [...] La technique et la culture se substituant à la programmation instinctuelle des autres animaux, créent la possibilité d'adaptations extrêmement plus rapides que celles permises par le processus darwinien de sélection naturelle, fondé sur la transmission des caractères génétiques.  [...]