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principe de transformation des levures?

A moins de cas particuliers les spheroblastes ne sont quasiment plus utilisés pour les transfos de levure. On utilise plutot le protocole utilisant du PEG et du LiAc qui est beaucoup plus simple car il evite la necessité de passer par des spheroblastes.  [...] le principe est tres simple le PEG et le LiAc perméabilisent la membrane de le levure, ensuite grace a un choc thermique l'ADN pénettre dans la cellule.  [...]

je suis en mode panique pour mon rapport(transfo levure)

Bonjour tous le monde, je en BTS anabiotech, et la j'aurai besoin que quelqu un m explique clairement le principe de la transformation des levures par choc thermique avec le PEG et le acétate de lithium (en vue de réalisé un double hybride).  [...] L'introduction des vecteurs recombinants dans la levure Saccharomyces cerevisiae Y190 se fait transformation au PEG.  [...]

Transformation/inativation d'un gène

Moi je voudrais déléter un gène chez Neurospora Crassa, a savoir un champignon ( je sais que les levures possèdent des plasmides, ce qui rend une transformation classique, style transformation bactérienne possible).  [...] Une dernière petite question, est que l'efficacité de transformation va être la même que j'ai les bactéries ( ou est ce que le fait d'être chez des procaryotes va diminuer un peu l'efficacité ).  [...]

a l'aide : double hybride en levure!!!!

l'efficacite de co-transfo. étaler une partie aliquote de ta co-transfo sur un milieu de culture sélectionnant les deux plasmides (normalement c'est du -Trp/-Leu). Ta partie aliquote de ta co-transfo sera bien évidemment diluée (1/100, 1/1000) avant d'être étalée. Ensuite, tu prends en compte ces paramètres.   [...] Exemple.J'ai transformé 15 µg de ma banque avec 5 µg de mon plasmide appât. j'ai donc Q = 5. J'ai resuspendu ma co-transfo dans Vtot = 10 mL. J'ai pris 1 µL de la co-transfo, que j'ai mis dans 99 µL de milieu adéquat. ça me fait donc une dilution au 1/100 que j'étale sur ma boîte de Petri (en schématisant rapidement).  [...]

Polyéthylène glycol (PEG)

Le Polyéthylène glycol ou PEG et utilise pour la transformation (insertion d'ADN) de nombreux type de cellules, entre autres les levures et les protoplastes de plantes.  [...] Selon mes sources, son rôle est lié à sa capacité à interagir avec les membranes. Cependant, j'aimerai en savoir plus. Est-ce que quelqu'un sais précisément commun le PEG participe à la transformation.  [...]

[Microbiologie] TP bac lait

c'est le même principe que le dénombrement des levures dans la bière c'est ça.  [...] voilà je viens de trouver deux mileux possibles pour faire le dénombrement des spores. le TSN et le TSC je voudrais savoir.- lequel utiliser.   [...]

Biomédicament

D'après ce que j'en ai compris, il s'agit de médicaments biologiques c'est-à-dire produits par des organismes vivants, ( bactéries, levures, etc...) qui fabriquent le principe actif.  [...] la morphine est un alcaloide, principal constituant de l'opium, qui est le latex qui s'écoule des boutons de pavot, (papaver somniferum). Il est récolté après incision des sommités florales, donc d'origine végétale.  [...]

[Biotechnologie] Construction plasmidique

Suite à cela, ne pas oublier de désaler le produit résultant de gibson assembly si tu fais la transformation bactérienne ensuite par électroporation. Donc maintenant transformation de tes produits dans des bactérie compétente. Puis culture. Puis miniprep. Puis digestion pour voir si ta les bons plasmides dedans, puis t'envoi donc les bon clones au séquençage.  [...] Mon cour traite en fait des différents plasmides, et des éléments qui le compose ( promoteur fort ou non, adn polymérase, gène de resistance etc...) ainsi que les transformation génétique chez les levures et bactéries.  [...]

[Biochimie] migration des AA proline glutamine

Pour répondre à la tienne, ce n'est qu'un domaine d'une protéine. Je fais un double-hybride avec ce domaine, et je vérifais qu'il était bien exprimé dans les levures aprés transformation.  [...] Pour ce qui des néoformations post trad sur les aa, aller oui, mais de là à en mettre pour une telle masse, il faut déja en caler un paquets des sucres et autres molécules.   [...]

[Biologie Moléculaire] Décision de replication de l'ADN

On a construit le plasmide suivant. ORIcolE1, gène conférant résistance à l'Amp, gène de sélection chez les Levures ( ura3 + ), en insert = fragment d'ADN génomique de S. cerevisiae. On a procédé à une transformation des cellules de S. cerevisiae [ura - ] par cette construction.  [...] Il se trouve que certains clones transformés de la sorte ont proliféré. les plasmides par lequels ils ont été transformés portent donc des séquences permettant la réplication des plasmides, sans intégration dans le génome.  [...]