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[Biochimie] origine de la vie

La création spontanée de protéines est mémorisée (pour celles utiles) à partir des bases azotées créant ainsi des molécules d'ARN. Je pars donc du principe que la codification de l'ARN est le résultat de la mémorisation des opérations chimiques d'assemblages d'acides aminés pour constituer une protéine intéressante pour la cellule.  [...] Mais si on part du principe les les constituants fondamentaux du vivants et notamment les acides aminés et les bases azotées (que l'on trouve dans les météorites) existent dans la nature, ne serait-il pas possible qu'une cellule naisse spontanément aujourd'hui peut être dans des conditions particulières.  [...]

[Biologie Cellulaire] Etudier l'expression d'une protéine entre différentes cellules.

pour cela tu mets les cellules en culture puis à un certain temps tu prélève les cellules et tu fait l'extraction de la protéine et purification. lorsque tu fait le westerne blot tu révélera avec des anti-corps diriger contre la protéine d'intérer. sinon tu peux faire aussi un marquage de la protéine avec des acides aminées radioactive en utilisant la technique de pulse chasse.  [...] Eh bien le principe c'est que tu amplifies tes gènes d'intérêt à partir de l'ARN issu d'une seule cellule. Tu sais donc ce qui se passe dans une cellule et pas dans un homogénat de plusieurs cellules.  [...]

Surexpression d'un gène

Dans ce cas la il n'y a pas de mutations en jeu, simplement une augmentation d'affinité des facteurs de transcription pour ce gène, principalement du à des mécanismes moléculaire.  [...] par exemple si on prend le cas des protéines heatshock qui sont des protéines de réponse a un choc thermique, il y en aura des quantité très mince en temps normal, mais au moment d'une chaleur intense, la cellule va se mettre a synthétiser bien plus de cette protéine qu'elle n'en produit en temps normal, car (sans rentrer dans les détails, et en te vulgarisant le principe au maximum,) certaines molécules on senti le choc thermique et ont dit qu'il fallait que les ARN polymerases (les enzymes qui vont faire s'exprimer les gènes pour pouvoir avoir des protéines) se fixent sur le gène de protection au stress thermique et qu'elles en fabriquent beaucoup d'ARNm.  [...]

pcr quantitative et standard interne

J'ai compris le principe de la pcr (amplifier un fragment d'ADN ou d'ARN). Mais qu'est ce que la PCR quantitative c'est la taille du fragment amplifié que l'on veut connaitre, c'est ca et quel rapport avec la notion de standard interne (j'ai noté dans mon cours que le standard interne est un gène présent dans ttes les cellules et qu'il a pour but de corriger les erreurs O_O).  [...] Ainsi, un gène peut être très exprimé dans un tissu à un instant t ou peu exprimé. Si tu n'as pas de référence, difficile d'en faire la différence. Tu utilises donc un standard interne. On utilise en général un gène dit de ménage. En fait c'est un gène, comme pour la tubuline, qui s'exprime tout le temps, de la même manière quelque soit le tissu, la cellule ou le temps. J'espère que ça t'aide.  [...]

ADN polymérase et ligase

Oui je parlais de la réplication. Dans une transcription c'est le même système mais on passe d'ADN double brin à ARN simple brin. Les enzymes sont différentes mais le principe reste le même.  [...] Oui je disais c'est le même car on garde le principe de copier de l'ADN ou de l'ARN. Seulement que comme tu le dis très bien, pour la transcription il n'y a pas de fragments d'Okasaki et pas d'ARN dans la réplication. C'est très juste, mais dans les deux cas, une enzyme va s'amuser à copier le brin, dans le cas de la réplication c'est les fragments d'Okasaki pour un sens et dans l'autre c'est l'ADN polymérase, enfin c'est le système classique.  [...]

Hybridation in situ

Tu précipites le reste 2x dans 2.5 microL LiCl 4M + 75 microL EtOH 100% froid. (la seconde fois tu ajoute 22 microL H2O) et tu mets ca à chaque fois 1/2h à -80 sans oublier de centrifuger au moment des rincages.   [...] Ben parce que le principe c'est d'hybrider des ARNs... la sonde est une sonde ARN antisens à l'ARN natif présent sur les coupes et que tu cherches à réveler.  [...]

[Biologie Moléculaire] Complexe RISC et ARNi

je ne comprends plus rien j'ai des source qui me dise que l'arn double brin une foi introduit dans la cellule est couper en petites séquence par la ribonucléase Dicer, Ca D'accord.  [...] Le domaine PAZ interagit avec l'extrémité 3' de l'ARN simple brin alors que le domaine Piwi interagit avec l'extrémité 5'. En quelque sorte, l'ARN simple brin est maintenu par ses extrémités et exposé vers l'extérieur facilitant ainsi son interaction avec les molécules d'ARNm cibles.  [...]

[Biologie Cellulaire] Traduction d'ARN messagers

oui les ribosomes se fixent sur l'arn m (présence de récepteurs spécifique) et lisent la chaîne. En principe un Arn m donne une protéine mais c'est un peu plus compliqué et il est possible d'avoir plusieurs protéines à partir d'un arn m (car il y a plusieurs sites de coupures).  [...] quand les ribosommes se fixent sur l'arn m ce arn m se lis en plusieurs parties c'est a dire une partie se lis au niveau du prémier ribosomme puis le deuxiéme... comment passer d'un ribosomme a l'autre merci.  [...]

[Biologie Moléculaire] problème migration ARN gel agarose

Je pense surtout qu'avant de faire migrer de l'ARN il faut être certain qu'il est bien redissout dans le TE ou l'eau et l'avoir dosé. Parce que là c'est compliqué de dire où se trouve le problème. Peut être que vous avez mis tous vos ARN dans le gel sans le savoir, où qu'ils sont super concentrés.  [...] Mais si on part du principe que l'ARN n'est pas dégradé, alors le mire visible correspond aux ARNm et il faudrait une concentration monstrueuse en ARN total pour que les ARNm donné ce genre d'image.  [...]

[Biologie Moléculaire] Transduction ?

Le principe de la transduction est enfaite par l'intermediaire d'un phages transmétre un matériel génétique d'une cellule A (qui sera lysé) a une cellule B.  [...] Va falloir que je lui fasse des cours de reproduction à ta prof car je ne savais pas qu'un bactériophage avait un caractère sexuel.. Ce n'est qu'une pénétration du matériel génétique dans la cellule hote. Peut être qu'elle a voulu imager ou faire une comparaison mais pour moi ce n'est pas de la reproduction.  [...]