• Forum - Prélèvement, Conseiller, échantillon, Température ambiante

[Biologie Moléculaire] Extraction des ARN

1/ Pour un échantillon fluide en particulier un prélèvement sanguin est ce qu'on utilise un TRIzol particulier et quel volume minimal de départ peut on utiliser.  [...] 2/ Après le prélèvement sanguin est-ce qu'il est conseiller d'utiliser un anti-coagulant et de conserver l'échantillon à température ambiante (quelques jours), la coagulation du sang peut elle influencer la survie, la qualité des ARN sachant que les ARN qu'on cherche codent pour un facteur de croissance.  [...]

[Biochimie] Identification de spermatozoïdes

Je pense alors qu'on peux être catégorique, c'est bien un spz on voit pas plus en détails car je l'ai vu 1 j après le prélèvement donc il s'est un peu disloqué à mon avis dont les formes pas bien caractéristiques.  [...] On peut voir sur 2 photos (/3) des amas informes qui ne sont pas sans me rappeler l'état d'une culture cellulaire après lyse. Tu as fais ton observation un jour après prélèvement et je suppose que tu as stocké ton échantillon à température ambiante, donc les spermatozoïdes sont probablement morts, suivi d'une agrégation des membranes lysées spontanément.  [...]

[Microbiologie] Cellules et bactéries sous micro-ondes

Bien mélanger en agitant longuement 5 g de levures avec 100 mL d'eau dans un grand flacon pour four à microondes. Porter à ébullition pendant quelques minutes au four à microondes et filtrer avec un filtre à café. Procéder de la même façon avec un cube de bouillon de bSuf.   [...] Avec un compte goutte, prélever un échantillon. Ouvrir la boîte contenant le milieu et toucher la surface du milieu avec l'extrémité du compte-gouttes en une dizaine d'endroits différents. Refermer le couvercle. Abandonner la boîte à température ambiante.  [...]

[Immunologie] Conservation d'un échantillon de sang total avant centrifugation en vue de sérologie

- Combien de temps au maximum l'échantillon sanguin peut se conserver à température ambiante.  [...] - Sachant que je compte faire les prélèvements sur tubes secs, combien de temps au minimum je dois laisser l'échantillon sanguin au repos avant de centrifuger afin d'obtenir un sérum de bonne qualité.  [...]

Conservation d'échantillons biologiques à t° ambiante

A votre avis, combien de temps je peux conserver des échantillons biologiques, à température ambiante, en vue d'une extraction d'ADN.  [...] Au pire transporte tes échantillons dans un sachet étanche recouvert de glace, ce sera toujours mieux que la température ambiante. Comme l'a dit Gorben si c'estpour en extraire de l'ADN ca ne devrait pas poser de soucis, ca ne serait pas le même problème si tu voulais en extraire de l'ARN.  [...]

[Biochimie] Utilisation du bain marie dans le dosage des enzymes

Je suppose que l'utilisation du bain mari c'est pour donner une température adéquate à la réaction lors de sa provocation dans la cuve du spectrophotomètre. Mais là je pense ceci. le tampon et la substance distinée à régire avec l'enzyme sont conservés à une température de 26C°, Ok MAIS l'homogénat et sur la glace 4C° et au moment du mélange dans la cuve 4C° et 26C° je ne sais pas ce que ça va donner.  [...] Très bien vu mais il est probable que le volume de votre échantillon (homogénat) soit très inférieure à celui du tampon (et de la cuve, qui est à température ambiante.)si bien que l'échange thermique entre les deux va égaliser les températures des deux autour de 26°C.  [...]

lysat proteique

petite question du a une betise de ma part today. Je souhaiterai savoir si des lysats proteiques tiennent le choc a temperature ambiante. Aujourd hui j ai oublie toutes mes extractions proteique sur la paillasse ( y avait quand meme inhibiteur de protease) et donc je ne sais pas si mes echantillon seront bons pour un western.  [...] Je vous conseil de refaire l'expérience car si vous souhaitez des résultats pouvant être pris en compte, il faut être le plus minutieux possible.  [...]

[Biologie Cellulaire] Coupe histologie

Pour les coupes histo, au labo, on utilise les bains de paraformaldéhydes (PFA) à 4% sur le nuit (environ 14-16h) pour la fixation. Après déshydratation progressive de l'échantillon (éthanol 70, 95 puis 100%), celui ci est plongé dans du xylène pure (la paraffine n'étant pas miscible dans l'éthanol et l'eau) avant l'inclusion dans une cassette de parafine (56-58°C), puis durci (au froid ou à température ambiante).  [...] Une astuce également. mettre l'échantillon à -20°C plusieurs minutes avant de le découper. Cela aide généralement à faire des coupes plus fines et plus nettes (car plus dure). Attention comme même, l'échantillon peut casser.  [...]

[Biologie Cellulaire] Dmso

Le DMSO permet à l'eau de cristalliser dans un système cubique, moins dangereux que le système hexagonal habituel. Son inconvénient c'est sa toxicité pour la cellule. C'est pourquoi quand on sort un échantillon de l'azote liquide (ou des vapeurs) on le place à décongeler dans un bain-marie plutôt qu'à température ambiante.  [...] J'ai eu l'occasion de comparer des taux de survies cellulaires avec des cellules placées dans différentes conditions et on observait 25% de mortalité cellulaire avec un protocole classique (10% de DMSO dans le milieu de culture, décongélation rapide à 37°C), 30% de mortalité avec 10% de DMSO et une décongélation lente à température ambiante (20°C environ) et 20% de mortalité avec un mélange à 1% de DMSO et une décongélation rapide à 37°C.  [...]

[Biochimie] calcul taux : Amidon Amylose/Amylopectine

A 0,1 g de la farine complète du mil, 5 mL d'une solution de KOH (1N) ont été ajoutés. Le mélange a été homogénéisé à la température ambiante et neutralisé par ajout de 5 ml de la solution HCL (1N). Le mélange a été mis en ébullition au bain marie pendant 15 min puis refroidit.  [...] Le volume a été ajusté à 10 ml puis centrifugé à 4000 x g pendant 5 min. A 0,05 ml du surnageant, 4,85 mL d'eau distillée et 0,1 mL de réactif d'iode ont été ajoutés. L'ensemble a été incubé 10 min à température ambiante et l'absorbance a été déterminé aux deux longueurs d'onde (580 nm pour l'amidon et 720 nm pour l'amylose) contre un blanc préparé dans les mêmes conditions en remplaçant l'échantillon par l'eau distillée.  [...]