• Forum - Précipitation, Protéines, Solution

Solubilité

solubilitée extraction par solvant...un soluté est plus soluble dans un solvant que dans un autre donc on peut l'extraire facilement, chromatographie...ca permet la séparation de proteines par exemple en fonction de leur solubilité, phénomène de saturation.  [...] ..precipitation qd la concentration en substance dissoute est trop importante, relarguage...trop de sels dans une solution de proteines vont faire precipiter ces proteines elles sont dénaturées. Les exemples sont tres nombreux en biologie et en chimie, a toi de choisir.  [...]

Extraction de l'ADN

[COLOR= Plum ]Bonjours,je voudrais savroir pour quoi au cours de l'extraction de l'ADN génomique d'Arabidopsis thaliana.aprés broyage du tissu et la mises de la solution de lyse,pour précipitation des protéines,on doit incuber le mélange dans une étuve et pour quoi exactement à 65°C [/COLOR ].  [...] Peut-être est-ce une température suffisante pour dénaturer les protéines partiellement tout en restant inférieur au Tm de ton ADN.  [...]

précipitation des protéines

que veut dire la précipitation des protéines et que veut dire la demi saturation des protéines car on dit que les globulines précipitent à 50% de saturation et l'albumine à +de 50% de concentration dans le sulfate d'ammonium. Que cela veut il dire.  [...] en fait la précipitation des protéines arrive lorsqu'il y a une faible solubilité de la protéine dans la solution. En concentration faible de sels dissouts dans la solution, (donc faible force ionique) les sels interagissent avec les radicaux des protéines et aident à leur dissolution, or qu'en forte concentration saline, tout change, en effet, il n'y a plus assez de éluant (pris par les sels) donc les protéines se regroupent, on dit qu'elles précipitent (relargage).  [...]

[Biochimie] Chromatographie échangeuse d'anions avec salting-out

L'énoncé est le suivant. Une solution renfermant les protéines suivantes, albumine (pI = 4,6), uréase (pI=5,1) et myoglobine (pI=7,5) est déposée sur une colonne d'échangeuse d'anions à pH = 6,5. La colonne est lavée avec un tampon pH 6,5 renfermant des quantités croissantes de NaCl.  [...] Ma réflexion. la myoglobine est la seule à être chargée +, donc elle n'est pas retenue. Les deux autres vont être retenues car chargées -, mais forcément avec des temps de rétention différents. Est-ce que l'albumine restera plus longtemps retenue car son pI est encore plus en-dessous du pH 6,5 que celui de l'uréase Au début je me suis dit que peut-être ça a avoir avec la solubilité des protéines (salting-out), mais on n'a pas vu de moyen pour connaître à partir du pI l'ordre de précipitation de peptides en solution saline croissante.  [...]

[Biochimie] Protocole de purification d'une protéine, vos avis

JE NE SAIS PAS SI A CETTE ÉTAPE LES RIBOSOMES SONT ILS PRESENT DANS LA SOLUTION PROTEIQUE APRES PRECIPITATION AU SULFATE D'AMMONIUM.  [...] à éliminer le sulfate d'ammonium de la précipitation. Si la concentration en sel est trop élevée, la protéine ne s'accrochera pas à l'échangeuse d'ions.  [...]

[Biochimie] L'acétone à froid dans l'extraction de l'ARN

Oui effectivement je confirme que l'utilisation de l'acétone est fait pour la précipitation des protéines, c'est vraie qu'on utilise généralement l'éthanol pour la précipitation des protéines, maintenant la précipitation à l'acétone est aussi plus efficace car, contrairement à l'éthanol, très peu de protéines sont solubles dans l'acétone.  [...] Si mes souvenirs sont bons, une fois qu'on a une interface claire après les lavages au phénol, on met de l'acétone avec notre solution d'ARN, on la laisse au froid toute la nuit puis on centrifuge longtemps à forte vitesse pour précipiter l'ARN. On obtient alors un culot qui ne contient que l'ARN q'on sèche alors par 1 ou 2 lavages à l'éthanol.  [...]

précipitation des protéines

la précipitation des proteines se fait préferentiellement au sulfate d'ammonium, et on obtient après un culot protéique. Est-ce qu'on peut avoir des protéines ou peptides qui echappent à cette précipitation et pourquoi.  [...]

[Biochimie] Definitions et propriétés

En effet le phénomène que tu décris s'appelle le salting out. Toutes molécules nécessite (en solution aqueuse) des molécules d'eau pour leur solvatation. Lorsqu'on augmente fortement la concentration en sels, les ions vont s'accaparer les molécules d'eau et donc les protéines n'auront plus assez de molécules d'eau pour être sous forme soluble.  [...] salut fabien, moi je fais l'xtraction de l'ADN à partir du sang (entre 8 et 10 ml) humain avec la technique salting out, pour la précipitation des protéines j'utilise 1 à 1, 2 ml de NaCl 6x molaire.  [...]

[Biochimie] western surnageant culture

je souhaiterais avoir des renseignements afin de détecter par western blot une protéine contenue dans le milieu de culture de cellules. Faut-il concentrer (précipitation, ultracentri, chromato,...) les protéines présentes dans le surnageant de la culture Comment procéder.  [...] Sinon sur ce forum, Gorben parle souvent d'une précipitation au TCA qui permet de concentrer les protéines. Ca devrait aussi pouvoir vous intéresser.  [...]

[Biochimie] purification protéine

Je travaille sur la purification de protéines. Lorsque l'on effectue la précipitation par le sulfate d'ammonium, on récupère bien le culot (on cherche donc à faire précipiter notre protéine d'intérêt alors que j'ai écrit l'inverse dans mon cours). J'ai un petit doute.  [...] l'addition du Sulfate d'ammonium à forte concentration diminue la quantité d'eau disponible pour solvater les protéines.Ces dernières vont se précipiter.  [...]