• Forum - Poids, Fragment, ADN

[Génétique] hybridation adn/adn : technique de southern blot

Si tes bandes ne descendent pas, c'est peut être aussi parce que tes fragments sont trop gros. Il faudrait essayer un gel moins concentré.  [...] Mon ADN lambda à un poids moléculaire de 48 502 pb. Et le premier fragment de mon marqueur correspond à 21 226 pb. Or en regardant mon gel, je constate que mon ADN lambda( puit n°4) à migré au meme niveau que le premier fragment du marqueur. comment peut- on expliquer cela puisqu'ils n'ont pas le même poids moléculaire.  [...]

A quoi sert une électrophorèse ?

Les marqueurs servent à évaluer le poids de ton fragment d'ADN qui migre. si tu as un marqueur à 100 pb et que ton ADN a migré au même niveau que les marqueurs (bande des marqueurs et de ton ADN sont côte à côte), ça veut dire que ton fragment d'ADN fait aussi 100 pb (car les molécules migrent en fonction de leur taille).  [...] Aussi, on parle aussi de fragments d'ADN, quand l'ADN migre et qu'il y a plusieurs barres, c'est que ces fragments ont tous migrés indépendamment des uns des autres.  [...]

[Biologie Moléculaire] identification gène PCR

J'ai fait une expérience sur l'insertion d'un fragment d'un gène sur le plasmide, et j'ai obtenu une photo des différentes séquences d'ADN via électrophorèse en gel d'agarose. La question est de connaitre le poids moléculaire de ma séquence, et je ne sais pas comment (c'est en bp).  [...] En parallèle de tes migrations tu as du déposer un marqueur de poids moléculaires. Qui te permettra de connaitre approximativement la taille de tes fragments. Si ce n'est pas le cas, tu n'as plus qu'a refaire une migration avec ton marqueur.  [...]

[Biochimie] Poids plus élévé après digestion enzymatique

Je suis actuellement en train de digérer un fragment d'ADN qui après avoir été digéré possède un poids (1200pb) plus élévé qu'après la PCR (1000bp). Est-ce que par hasard quelqu'un aurait une petite idée d'où pourrait provenir mon erreur.  [...] J'ai envoyé mon fragment à séquencer et il s'avére qu'il est juste. Je ne sais toujours pas pourquoi sur le gel il m'aparait comme ayant 200 pb de plus mais bon il est correct.  [...]

[Génétique] Plusieur question?

Deux version différentes d'un même gène sont bien un allèle. Mais contrairement à l'appellation trompeuse, ils ne donneront pas une même protéine, mais une protéine différente utilisée pour une même fonction.   [...] Non car une séquence nucléotidique peut être un fragment d'ADN ou d'ARN.  [...]

Acides Nucléiques

L'ADN est chargé négativement. La séparation se fait en fonction de la taille des fragments qui diffère d'un seul nucléotide entre chaque bandes les plus proches visible sur le gel.  [...] Salut. Au moment de la migration, la charge est identique pour chaque fragment d'ADN car la préparation de ton ADN pour l electrophorese sert justement a masquer la charge réel de tes fragments afin que ces derniers aient tous la même charge fictive et migrent uniquement selon leur poid moléculaire.  [...]

[Biologie Moléculaire] Construction Banque ADNc

On peut faire un traitement au NaOH, qui détruit l'ARNm et on utilise une ADN polymérase pour avoir le 2e brin d'ADNc, via l'extrémité en épingle à cheveux du premier brin d'ADNc.  [...] Normalement c'est le fragment de Klenow qu'on utilise généralement sous le terme ADN pol I, non L'ADN polymérase I est une enzyme qui d'une part polymérise l'ADN à partir d'une matrice mais qui d'autre part coupe l'ADN grâce à son activité exonucléasique 5'-3'.  [...]

[Biologie Moléculaire] [biologie moleculaire] Le code génétique

1. recherche d'homologie -. 2. clonage du fragment d'ADN cense contenir le gene -. 3. analyse de l'expression de ce gene (deletion, expression etc..).  [...] 1. identification d'un phenotype mutant -. 2. recherche par complementation du fragment d'ADN permettant de restaurer le phenotype sauvage -. 3. analyse de ce fragment d'ADN.  [...]

Adénovirus et cre-lox

Alors pour insérer qqch (je vais faire autrement pour les demi sites, ce sera plus simple ^^ ) dans un fragment d'ADN par recombinaison Cre-Lox.  [...] Pb n°1. soit ton ADN ciruclaire contient des portions d'ADN bactérien dont il faut se débarasser, soit il faut faire des minicercles plasmidiens (minicircles en anglais je crois, je sais pas l'exacte traduction en francais).  [...]

[Génétique] ADN polymérase

L'ADN polymérase I vient se fixer sur la lacune. Elle allonge le fragment d'Okazaki par son activité de polymérase 5'. 3' et retire l'amorce d'ARN du fragment d'Okazaki suivant par son activité d'exonucléase 5'. 3'.  [...] La ligase vient achever le travail en catalysant la formation d'une liaison phosphodiester entre une extrémité 3'OH d'un fragment d'ADN et une extrémité5' phosphate d'un autre fragment.  [...]