• Forum - Plasmide, Code, Protéine, Cellule

[Génétique] Conséquence de l'intégration d'un vecteur dans une bactérie

Oui c'est ça que je voulais qu'elle comprenne toute seule. si elle a plus de boulot à faire que les autres du TP elle mettra plus de temps -. la bactérie qui doit fabriquer le plasmide et synthétiser la protéine est ralentie dans sa multiplication.  [...] Donc pour un plasmide qui ferait disons 4,6kb cela représente donc 10 du génome. Si le plasmide code 4 protéines là aussi on est à 10. Cela me semble totalement négligeable pour une cellule. Mais bon peut etre que je me montre.  [...]

ADN recombinant et plasmide

Lorsqu'on fait une expérience de clonage comme celle que tu vois sur la diapo, le plasmide n'est pas retiré d'une bactérie. C'est un vecteur que l'on a en stock dans nos labos (et que l'on achète à des sociétés qui les produisent souvent) et qui permet d'insérer le fragment d'ADN qui nous intéresse pour le multiplier en grande quantité dans des bactéries (généralement des Escherichia coli ).  [...] Merci Zellus pour ta réponse, c'est donc parce que l'ADN mitochondrial code pour des protéines essentielles pour réaliser la respiration cellulaire et donc pour la survie de la cellule que ce n'est pas un plasmide.  [...]

[Biologie Moléculaire] Contamination transformation

Cas typique avec les transformants sur ampicilline. le gène de résistance à l'ampicilline qui est sur ton vecteur code une protéine qui peut diffuser dans le milieu et conférer une pseudo-résistance à des cellules qui n'ont pas ton plasmide, donc des faux-positifs.  [...] Et pour la coloration verte, peut-être que l'intégration a eu lieu dans un gène codant pour une protéine impliquée dans une voie du métabolisme. Si cette protéine n'est plus produite à cause de la recombinaison, elle ne peut plus faire son boulot et il y a peut-être accumulation d'un métabolite vert dans les bactéries (cette protéine est donc probablement non essentielle).  [...]

[Biochimie] Manipulation de l'ADN: plasmide

L'intérêt est de couper ET notre morceau d'ADN d'intérêt ET le plasmide avec le MÊME enzyme de restriction. Ainsi lorsqu'on les mets en présence l'un de l'autre, ils auront tendance à s'attacher et nous permettre de refermer le plasmide nouvellement constitué.  [...] Le plasmide étant constitué d'ADN tu as besoin d'une origine de réplication afin de permettre aux polymérases de le reproduire dans la bactérie. Si le morceau d'ADN ajouté code pour une protéine, la présence d'un promoteur et d'un terminateur te permettra d'activer la production de la protéine à partir du plasmide.  [...]

[Biotechnologie] ADN recombinant réplication dépend du cycle cellulaire ?

Le plasmide (vecteur) qui fait partie de l'ADN recombinant sera injecté dans le cytoplasme d'une bactérie comme e.coli et donc la réplication de l'ADN recombinant sera dépendant du cycle cellulaire ou non.  [...] En fait l' ADN recombinant qui est composé de plasmide qui est le vecteur et de l'ADN inséré ainsi que d'autre gène inséré dans ce vecteur comme le gène de résistance à l'ampicilline le gène marqueur lactZ qui code pour la protéine béta galactosidase et le polylinker qui s'insère dans le gène marqueur lactZ sans influencé son fonctionnement, bref en gros lors de l'injection de l'ADN recombinant dans les cellules hote comme e.  [...]

[Biologie Moléculaire] le mystère des séquences non codantes

Si on enlève à un gène ces deux régions, cela deviendra une séquence non-codante, mais possédant quand même l'information génétique de ta protéine. Celle-ci, si le gène est unique dans ta cellule, ne sera jamais exprimée.  [...] Il ne faut pas interpréter les choses ainsi. une séquence codante code pour une protéine et est donc utile pour la cellule alors qu'une séquence non-codante ne code rien et est inutile. Loin de là. Une séquence codante donne une protéine alors que l'autre permet à ta cellule de contrôler quand, comment et dans quelle circonstances une séquence codante doit être transcrite et/ou traduite.  [...]

TP sur les plasmides

Après une culture bactérienne on a trouvé qu'E. coli était responsable et plus particulièrement un plasmide afa-3, qui code pour l'adhésine (protéine qui est responsable de la diarrhée -en gros-).  [...] On a comme modèle de référence donc un plasmide de type afa-3 d'E. coli. On a fait une simulation de digestion de ce plasmide, ce qui nous a donné plusieurs fragments de plasmide.  [...]

[Biologie Moléculaire] Plasmide

En plus y a des petites ORF dans les extrémités, on pense que ça code pour la protéine qui a été montrée comme fixée en 5' du plasmide. Elle permettrait d'initier la réplication, mais rien n'est montré.  [...] imaginons que je veuille étudier une protéine tagguée ou un promoteur a l'aide d'un gène reporteur, dois-je obligatoirement utiliser un plasmide pr transfecter ma cellule par lipofection ou biolistique.  [...]

Arn

2-Quelle sont les conséquences d'une maturation de l'ARN pré-messager Je sais que ceci provoque la fabrication de différentes protéines d'un même gène. Est-ce que ces protéines ont les même fonctions.  [...] Je suis d'accord avec cette affirmation. Il y a simplement des régulations qui permettent d'initier la transcription du gène qui code pour la protéine dont la cellule à besoin à un instant 't'.  [...]

[Biologie Cellulaire] ARNm

Certains sont à l'origine de la traduction en plusieurs milliers de protéines, d'autres uniquement de quelques unes. Ca dépend de la fonction de la protéine qu'il code, du statut de la cellule,  [...] Mais comme l'a dit FlyingBike, dans un certain nombre de cas ils ne sont pas dégradés.   [...]